西蕃莲果汁抗衰老作用的实验研究

西蕃莲果汁抗衰老作用的实验研究杨莉，梁钢，林秀月，谭壮生，吴开国（广西医科大学预防医学教研室，南宁５３００２１）ＡｎＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＡｎｔｉａｇｉｎｇＥｆｆｅｃｔｏｆＰａｓｓｉｏｎｆｌｏｖａｅｄｕｉｓＪｕｉｃｅＹａｎｇＬｉ...     

鲤鱼精巢DNA抗脂质过氧化作用研究

鲤鱼精巢ＤＮＡ对组织奖浆自发的或由Ｆｅ＾２＿－Ｃｙｓｔｅｉｎｅ体系激的脂质过氧化作用均有显著的抑制作用,在０．１６￣１００μｇ／ｍＬ浓度范围内有明显的剂量依赖关系;小鼠ｉｇＤＮＡ１５ｄ,其脑、心、肝中丙三醛生成量明显减少,小鼠ｉｇＤＮＡ４５ｄ,其脑和肝脏中的脂褐素含量明显低于空白对照组。     

蜂胶对脂褐素的作用和机制

动物细胞内常有－种棕色的有白色荧光的不溶性物质堆积,尤其当人们进人老年期,人体的这种不溶性物质可陆续出现在面部、手背、小腿及足背等部位上,这就是脂褐素斑点,俗称“老年斑”。医学上称为脂褐素。脂褐素在人体表面的出现率大约占老年人的２７％,消除脂褐素是医学美容事业的新课题。目前对消除黄褐斑的药物研究大多是围绕着抗自由基氧化和提高ＳＯＤ的活性。另外设法抑制酪氨酸酶的活性,减少黑色素的生成也很重要。因为黑色素也是影响肤色的重要因素。皮肤肤色变深变浅决定于黑色素细胞的密度和黑色素的生成量等因素;而黑色素的…     

热休克蛋白5调控内质网应激在视网膜色素上皮细胞保护中的作用

目的　探讨相对分子质量70 000的热休克蛋白5（heat shock 70 kDa protein 5,HSPA5）调控内质网应激在N-亚视黄基-N-视黄基乙醇胺（N-retinylidene-N-retinylethanolamine,A2E）联合蓝光诱导视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium,RPE）细胞损伤对RPE细胞的保护作用。方法　建立A2E联合蓝光诱导RPE细胞损伤模型,显微镜下观察RPE细胞对A2E的摄取。在RPE细胞损伤后3 h、6 h、12 h、24 h和48 h,运用CCK-8法检测RPE细胞活力;Western blot检测RPE细胞内质网应激相关蛋白HSPA5和CHOP的表达情况。构建HSPA5 shRNA慢病毒载体抑制RPE细胞中HSPA5的表达,实验分3组,HSPA5干扰组转染了HSPA5干扰序列,阴性干扰组转染了阴性对照序列,野生型组为未转染的RPE细胞。检测在RPE细胞损伤时,干扰HSPA5对内质网应激相关凋亡分子CHOP、Caspase-12表达以及RPE细胞活力的影响。结果　细胞活力检测结果显示,A2E联合蓝光照射后3 h、6 h、12 h、24 h和48 h,RPE细胞活力分别是对照组的（80.9±6.2）%、（73.3±5.8）%、（70.6±5.4）%、（62.3±6.1）%和（51.4±4.5）%,与对照组相比差异均有统计学意义（均为P<0.05）。Western blot检测结果显示,HSPA5和CHOP蛋白表达在RPE细胞损伤后均有不同程度增高（P<0.05）。在A2E联合蓝光处理后12 h,HSPA5干扰组的CHOP和Caspase-12蛋白表达较对照组显著升高,并且RPE细胞活力明显下降（均为P<0.05）。结论　A2E联合蓝光可诱导RPE细胞发生损伤,损伤机制与内质网应激相关。HSPA5具有调控内质网应激,减轻A2E及蓝光损伤,促进RPE细胞存活的作用。     

猪光感受器外节诱导人视网膜色素上皮细胞脂褐素形成

目的:建立体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞脂褐素形成模型,为研究RPE细胞衰老过程中细胞结构及功能的改变以及由于其衰老而引起的一系列年龄相关性眼病如年龄相关性黄斑变性奠定基础。方法:采用梯度离心法制备猪眼光感受器外节(POS),将实验组RPE细胞与POS共培养3wk,在电镜下观察RPE细胞内脂褐素形成的形态学过程。结果:RPE细胞与猪POS共培养后,POS脱落的膜盘逐渐被RPE吞噬并崩解,板层小体在溶酶体内形成,随着培养时间的延长,板层小体的数量增多;对照组细胞培养相同时间后细胞器形态没有明显变化,仅有少量板层小体形成,实验组较对照组RPE细胞脂褐素含量明显增多。结论:将人RPE与猪POS共培养,促使了细胞内脂褐素的形成和蓄积,其过程周期短、操作简单、重复性强,可以作为体外培养的人RPE脂褐素形成模型。     

正常人后极部自发荧光分布定量研究

目的 观察正常人群后极部自发荧光(AF)的分布特点.方法 在我院眼科门诊行眼底检查的正常健康者78名156只眼纳入研究.采用共焦激光扫描检眼镜HRA2对所有受检者行AF检查,获取后极部AF平均图像.应用Digimizer 3.7.1.0图像分析系统进行长度定标,以凹部为圆心,做半径为175、750、1250、2750μm的同心圆,将黄斑区分为中心小凹、中心凹、旁中心凹及中心凹周围区.除中心小凹外,用夹角为90°的2条放射线将各区进一步分为上方、下方、鼻侧及颞侧4个象限.测定黄斑区各分区4个象限及视盘的AF荧光强度.同时,以凹部为原点,分别测定中心小凹垂直、水平方向的AF荧光强度.对比分析黄斑区各分区4个象限和黄斑各分区不同年龄、性别及眼别之间的AF荧光强度的变化情况.结果 视盘、黄斑区各分区4个象限AF荧光强度比较,差异有统计学意义(F=528.648,P＜0.01).中心小凹垂直方向AF呈V型分布,水平方向AF呈倾斜M型分布.不同年龄组黄斑区各分区4个象限AF,中心小凹,旁中心凹下方、颞侧、中心凹周围区上方、下方、颞侧间差异有统计学意义(P＜0.01).不同眼别间黄斑区各分区4个象限AF荧光强度比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).不同性别间黄斑区各分区4个象限AF荧光强度比较,中心小凹,中心凹上方、下方、鼻侧及中心凹周围区颞侧间差异有统计学意义(P＜0.05);其余分区象限间差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 正常人黄斑中心小凹、中心凹、旁中心凹及中心凹周围区上方、下方、鼻侧及颢侧AF分布不均;AF强度随年龄增加而增强;不同眼别间AF分布对称;不同性别间AF分布可能无差异.

Abstract：

Objective To observe the characteristics of fundus autofluorescence (AF) distribution at the posterior pole in normal subjects. Methods Seventy-nine normal subjects (156 eyes) were studied.Confocal scanning laser ophthalmoscope (cSLO) HRA2 was used to obtain the AF average image at the posterior pole. The distance was calibrated by Digimizer image analysis system. With umbo as the center,the macula was divided into foveola, foves, parafovea and perifovea areas which with the radius 175, 750,1250 and 2750 μm respectively. Each area was further divided into inferior, superior, temporal and nasal quadrants by two radial lines angle of 90°, except for foveola. The AF intensity in four quadrants of different macular regions and optic disc were measured. The AF intensity in vertical and horizontal direction of umbo was also measured. Then the effects of age, eyes, and gender on AF intensity in four quadrants of different macular regions were analyzed. Results There were statistically significant differences in AF intensity among optic disc and four quadrants of macular regions (F=528. 648, P＜0.05). AF distribution was V-type in vertical direction and M-type in horizontal direction. There were statistically significant differences between age groups in foveola, inferior parafovea, temporal parafovea, inferior perifovea,superior perifovea and temporal perifovea (P＜ 0. 01). There were no statistically significant differences between the two eyes (P＞0. 05). Between genders group, there were statistically significant differences in foveola, superior foves, inferior fovea, nasal fovea and temporal perifovea (P ＜ 0.05); no statistically significant differences in the other quadrants (P＞0. 05). Conclusions The distribution of AF intensity is inhomogeneous in macular regions and four quadrants of each region in normal subjects. AF intensity increases with aging. AF distribution is symmetrical in both eyes. There is probably no correlation between gender and AF intensity distribution.     

神经元蜡样质脂褐素沉积病的遗传学和临床表现规律以及诊断策略

神经元蜡样质脂褐素沉积病(neuronal ceroid lipofuscinosis,NCL)为一组儿童最常见的遗传性进行性中枢神经系统变性疾病.目前已经发现10种不同的亚型[1],其基因突变导致细胞内可溶性或膜性蛋白质的结构和功能异常.     

韭子抗衰老作用的实验研究

目的研究韭子水煎剂抗衰老作用。方法以韭子水煎剂灌胃自然衰老小鼠30d,应用放射免疫法测定红细胞膜超氧化物歧化酶（SOD）活性,荧光法测定血清过氧化脂质（LPO）含量,Sohal法测定脑组织脂褐素含量,王本祥法测定肝单胺氧化酶B（MAO-B）活性。结果韭子水煎剂可使衰老小鼠红细胞膜SOD活性增高,血清LPO水平和脑脂褐素显著降低,肝MAO-B活性降低。结论韭子水煎剂可增加衰老小鼠SOD活性,抑制体内脂质过氧化物及终产物生成,抑制MAO-B活性,进而延缓机体衰老过程。     

旋转磁场对老龄小鼠脑、心、肾脂褐素及心、肾、胸腺抗氧化酶含量的影响

目的探讨考查旋转磁场是否会对老龄小鼠脑、心、肾组织脂褐素(LPF)以及心、肾、胸腺组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量产生一定的影响。方法将20只雌性老龄小鼠随机分为实验组(n=10)和对照组(n=10)。用转速2 000 r/min、平均磁感应强度0.09 T的旋转磁场作用于实验组老龄小鼠头部,每日曝磁30 min,连续15 d。结果实验组老龄小白鼠脑组织脂褐素含量〔(0.153±0.025)μg/g〕较对照组〔(0.304±0.061)μg/g〕比较差异有显著性(P0.05);心、肾组织脂褐素含量〔(0.075±0.012)及(0.335±0.028)μg/g〕与对照组〔(0.092±0.011)及(0.382±0.033)μg/g〕比较,没有显著性差异(P0.05)。实验组心、肾及胸腺GSH-Px活性〔(2.07±2.01)、(25.03±3.54)及(119.00±10.87)NU/m〕较对照组〔(7.63±1.48),(24.09±4.49)及(85.68±7.12)NU/m〕明显升高(P0.05及P0.01)。结论在一定的强度以及一定时间的旋转磁场作用下能够对于小鼠器官中脂褐素含量起到降低的作用,同时能够提高抗氧化酶活性以及抵抗自由基。     

大鼠海马神经元突触超微结构的增龄变化

目的 为研究脑老化过程中学习、记忆功能减退的神经结构基础提供实验依据.方法应用透射电子显微镜,观察比较从出生1 d至24月龄(1 d、1月龄、3月龄、6月龄、18月龄、24月龄)的Sprague Dawley大鼠海马神经元突触超微结构的随增龄变化,同时观察与脑老化密切相关的指标脂褐素沉积.结果在大鼠6月龄之前,随着月龄的增加,海马神经元突触超微结构的发育逐渐完善,至6月龄大鼠突触数量明显增多;此后突触数量逐渐减少,至24月龄大鼠神经元突触数量最少.从1月龄开始海马神经元内即可见少量脂褐素颗粒沉积,随着月龄的逐渐增加,至24月龄时脂褐素颗粒沉积显著.结论青年期大鼠的海马神经元突触发育最好,进入老年期后,突触结构受损,老年期损伤最为严重,同时伴有大量的脂褐素颗粒沉积.