柱前衍生化-HPLC法同时测定注射用沙棘籽油中脂肪酸的含量

目的建立沙棘籽油中脂肪酸的HPLC测定法。方法以2,4′-二溴苯乙酮为衍生化试剂,18-冠醚-6为相转移催化剂,采用Kromasil C8反相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),检测波长254 nm,以甲醇-乙腈-水(体积比60∶30∶10)为流动相等度洗脱,柱温为室温,流速为1.0 mL.min-1。十七烷酸为内标,一次基线分离5种脂肪酸,建立注射用沙棘籽油的脂肪酸含量测定的方法。结果α-亚麻酸的线性范围为2.02~20.22 ng,相关系数为0.999 1;亚油酸的线性范围为2.90~20.90 ng,相关系数为0.999 1;棕榈酸的线性范围为1.27~12.67 ng,相关系数为0.999 0;油酸的线性范围为1.92~19.16 ng,相关系数为0.999 0;硬脂酸的线性范围为0.30~3.04 ng,相关系数为0.999 1。α-亚麻酸、亚油酸、棕榈酸、油酸、硬脂酸的平均回收率分别为106.07%、104.13%、100.81%、99.43%、95.62%,RSD分别为2.64%、2.42%、3.14%、1.18%、2.24%(n=9)。结论本方法重现性好,定量准确,可作为注射用沙棘籽油中脂肪酸测定的定量方法 ,用于沙棘籽油的质量控制。     

白藜芦醇影响一氧化氮途径对大鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的研究白藜芦醇（resveratrol,Res）对酒精性肝损伤后肝组织氧化反应和炎性反应的影响及与一氧化氮（NO）、诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）通路的关系。方法大鼠灌胃给予55度红星二锅头复制肝损伤模型。大鼠随机分为正常对照组、肝损伤模型对照组、Res低剂量组（25 mg.kg-1）、Res中剂量组（50 mg.kg-1）、Res高剂量组（100 mg.kg-1）,每日2次,连续7 d。采用试剂盒测定肝脏组织乳酸脱氢酶（LDH）、活性氧（ROS）、还原型谷胱甘肽（GSH）、NO、iNOS和血清IL-10、IFN-γ水平。Western blot测定iNOS表达,RT-PCR测定iNOS mRNA表达。结果与正常对照组相比,酒精性肝损伤模型组肝组织LDH、ROS、NO浓度显著升高（P〈0.01）、GSH显著下降（P〈0.01）,血清IFN-γ水平显著升高、IL-10显著降低（P〈0.01）,肝组织iNOS和iNOS mRNA表达增加（P〈0.01）。与模型组相比,Res显著降低肝脏组织ROS、LDH、NO浓度（P〈0.01）,降低血清IFN-γ水平和升高血清IL-10与肝脏组织GSH含量（P〈0.01）,减少iNOS和iNOS mRNA表达（P〈0.01）。结论 Res可能通过NO通路,消除氧化性应激状态,改变炎性因子水平,对酒精性肝损伤发挥防治作用。     

补肾阳复方激活肾上腺皮质类固醇合成酶的研究

目的研究补肾阳复方升高肾阳虚模型大鼠血浆皮质酮的机制。方法 30只SD大鼠分为3组:对照组、模型组、自拟补肾阳复方组(复方组)。模型组及复方组采用皮质酮10mg/kg皮下注射14d造模;同时复方组采用自拟补肾阳复方按292mg/(kg·d)剂量灌胃;对照组、模型组采用等体积生理盐水灌胃。采用ELISA法检测血浆皮质酮和促肾上腺皮质激素(ACTH)浓度;取肾上腺,进行全基因组表达谱芯片检测及分析,筛选各组差异表达基因;进一步采用Westernblot确认芯片分析结果。结果与模型组比较,复方组血浆皮质酮及ACTH水平显著升高(P<0.05),肾上腺质量显著增加(P<0.05),差异均有统计学意义。基因表达谱分析显示自拟补肾阳复方能提高多种类固醇合成酶如HSD11B1、CYP7A1的表达;Westernblot亦显示HSD11B1蛋白表达升高。结论提高类固醇合成酶的表达可能是补肾阳复方升高肾阳虚证模型血浆皮质酮水平的机制之一。     

应用高速逆流色谱法分离茎点霉属真菌代谢物中脂肪酸成份的研究

利用高速逆流色谱对一株茎点霉属内生真菌的代谢物质脂肪酸部分进行了分离.采用的两相溶剂系统为正庚烷:乙酸乙酯∶甲醇∶水=8.5∶1∶8.5∶1,上相做固定相,下相做流动相.分离得到三个脂肪酸组分A5、A6、A7,经高效液相分析,纯度都在99%以上,其回收率分别为96.3%、93.5%,94.8%.经EI-MS、1H-NMR测定,确定A5为硬脂酸,A6为油酸,A7为亚油酸.     

内源性硫化氢与心血管疾病的研究进展

硫化氢（hydrogensulfide,H2S）是一种具有臭鸡蛋气味的有毒气体,自从1713年第一次对H2S的毒性进行描述后,人们对于其研究就仅限于它的毒性作用,20世纪90年代以来的研究发现,由半胱氨酸代谢生成的内源性H2S存在于哺乳动物的多种组织、器官中,其通过多种调节方式和信号转导形式…参与机体多种生理病理过程,被认为是继NO和CO之后的第三种气体信号分子。其生理学特征、作用及与心血管疾病的关系综述如下。     

条纹斑竹鲨鱼脂肪酸结合蛋白(FABPs)cDNA的克隆与序列分析

脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein,FABP)在调节脂肪酸代谢、信号传导以及细胞的增殖与分化过程中起着重要的作用。为揭示FABP在肝脏再生过程中的作用,研究了从前期构建的条纹斑竹鲨鱼肝cDNA文库中克隆到编码FABP的cDNA全序列,并对其表达产物的理化性质、结构和空间分布特点以及在肝脏再生过程中的表达进行了分析,结果表明:条纹斑竹鲨鱼FABP的cDNA全长为1194bp,编码一个由115个氨基酸残基组成的无跨膜区的胞外蛋白,该蛋白的理论Mr为13065.1,理论等电点(pI)为8.81。生物信息学分析结果显示:该蛋白与来自铰口鲨、鸡、短尾负鼠和人的FABP在氨基酸水平上分别具有74%、56%、55%和52%的同源性,其进化地位与同属于海洋软骨鱼类的铰口鲨接近。进一步的分析发现该蛋白和其它物种来源的脂肪酸结合蛋白的结构域相似,它们均含有3个蛋白激酶C(PKC)磷酸化位点、1个N-酰基化位点和2个酪蛋白激酶II磷酸化位点。同源模建分析结果表明该蛋白与人肌肉FABP的A链一样具有一个高度保守的活性区,该活性区由第1～111氨基酸残基组成。本研究进一步考察了FABP编码基因在鲨鱼肝...     

糖尿病心肌病与过氧化物增殖体激活受体

糖尿病心肌病(DC)是糖尿病的独立并发症,发病过程中心肌出现脂肪酸氧化利用升高和葡萄糖利用率下降等能量代谢紊乱,严重影响DC心脏功能和结构。过氧化物增殖体激活受体(PPARs)属于核受体超家族成员,是机体糖、脂肪酸代谢途径的关键调节基因,在DC心脏能量调节中起重要作用,直接或间接干预DC状态下心脏功能变化。     

MiR-24对3T3-L1脂肪细胞分化及脂肪型脂肪酸结合蛋白表达的调节作用

目的探讨microRNAs对脂肪细胞分化过程的调节作用分子机制及其对脂肪特异性基因——脂肪型脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein,FABP4)表达的影响。方法用microRNAs微阵列分析法筛选和鉴定3T3-L1脂肪细胞分化相关性microRNAs,构建脂肪细胞分化相关性micro-RNAs的高表达质粒,通过脂质体介导转染3T3-L1前体脂肪细胞,观察脂肪相关性microRNAs对脂肪细胞分化过程的影响,Westernblot和RT-PCR分别检测FABP4蛋白及其mR-NA在脂肪细胞分化过程中的表达变化。结果3T3-L1脂肪细胞分化过程中microRNA表达谱发生明显改变,其中35个microRNAs下调,miR-24最明显;17个microRNAs上调,miR-21最明显;用不同脂肪相关性microRNAs转染3T3-L1前体脂肪细胞并高表达后,发现miR-24明显抑制脂肪细胞的分化与成熟,而miR-21则无影响;miR-24明显抑制FABP4蛋白表达,但对其mRNA无影响,miR-21对FABP4的蛋白和mRNA表达都没有影响。结论3T3-L1脂肪细胞分化过程中存在脂肪细胞分化相关性microRNAs;miR-24脂肪细胞分化过程及其脂肪特异蛋白FABP4表达有重要的调节作用。     

左旋肉毒碱用于维持性血液透析患者的疗效观察及护理

左旋肉毒碱最主要的功能是运载长链脂肪酸进入线粒体基质进行B-氧化。健康人不会发生肉毒碱缺乏症,但长期透析的尿毒症患者可在透析过程中丢失大量肉毒碱使血浆肉毒碱浓度显著下降,从而产生一系列的临床症状。我院血液净化中心对15例维持性血液透析患者给予左旋肉毒碱治疗,观察患者微炎症、贫血和营养状况的变化,同时对药物产生的不良反应积极采取有效护理措施,取得了良好效果,现报告如下。