不同时间持续缺氧对3T3-L1脂肪细胞脂肪因子基因表达的影响

目的:探讨不同时间持续缺氧孵育后脂肪细胞脂联素和瘦素表达的变化。方法:将分化成熟的3T3-L1脂肪细胞随机分为6组,即常氧(21%O2)组和缺氧(1%O2)4、12、24、48、72 h组,实时定量PCR(q RT-PCR)法测定各时间点脂肪细胞中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、葡萄糖转运子1(GLUT-1)、脂联素和瘦素基因表达。结果:与常氧组相比,缺氧12、24、48 h组HIF-1α、GLUT-1 m RNA表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。缺氧24 h时HIF-1α、GLUT-1 m RNA达到最高。各缺氧组脂联素m RNA在12、24、48、72 h缺氧组的表达下降,较常氧组有统计学差异(P<0.05)。各缺氧组瘦素m RNA的表达高于常氧组,并在24 h时达到最高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:缺氧使脂肪细胞HIF-1α、GLUT-1、瘦素m RNA表达升高,脂联素m RNA表达下降,各反应在缺氧24 h时达到最大水平。     

人网膜前脂肪细胞原代培养及其生物学特性研究

目的建立人网膜前脂肪细胞原代培养的方法,研究内脏脂肪增生肥大和内分泌功能的生物学特性。方法选取人网膜脂肪组织,采用酶消化细胞原代培养出梭形细胞,对培养细胞进行形态学观察、MTT法测定生长曲线、油红O脂肪染色法进行脂肪细胞鉴定、酶联免疫法测定脂肪细胞因子瘦素和脂联素水平。结果培养出的梭形细胞成分均一。第3天开始增殖,4～9d为指数增长期,倍增时间约为60h。经分化诱导21d约有90％的细胞分化为成熟脂肪细胞。前脂肪细胞可检出低水平瘦素分泌,经诱导分化分泌量持续增多,第17天达峰值（1．6ng·ml^-1·24h^-1）,之后保持高分泌状态至诱导结束;而脂联素直到诱导分化第7天始可检测到低水平分泌,此时光镜下已可见胞质含脂滴的细胞;7～17d分泌逐渐增多,第17天分泌达峰值（99ng·ml^-1·24h^-1）,之后有明显下降趋势。经油红0脂肪染色和瘦素、脂联素分泌检测证实分离培养的细胞为功能活跃的前脂肪细胞。结论成功建立了人网膜前脂肪细胞模型,观察到瘦素和脂联素不同分泌模式。脂联素可作为鉴定前脂肪细胞分化成熟的内分泌功能特异标志物。     

血清脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白和白细胞介素-17水平与2型糖尿病患者下肢动脉粥样硬化病变的相关性研究

目的 探讨 2 型糖尿病下肢动脉粥样硬化病变(LEAD)患者外周血脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白( A-FABP)、白细胞介素-17(IL-17)浓度变化及其临床意义.方法 选取129例2型糖尿病患者,根据踝肱指数( ABI)分为糖尿病无下肢动脉粥样硬化病变组(NLEAD组,n=90)和糖尿病下肢动脉粥样硬化病变组(LEAD组,n=39).另选择40例健康人群作为对照组 ( NC 组),检测各组外周血 A-FABP、IL-17浓度,比较各组间A-FABP、IL-17水平差异.应用Pearson相关分析,探讨影响血清A-FABP、IL-17浓度的相关影响因素;应用Logistic回归分析,了解A-FABP、IL-17 是否为糖尿病周围血管病变的独立影响因素.结果 NLEAD组、LEAD组的A-FABP、IL-17水平较NC组显著升高,LEAD组A-FABP、IL-17 水平较 NLEAD 组显著升高( P ＜0. 05).Pearson相关分析显示,A-FABP与体质量指数( BMI)、糖化血红蛋白(HbA1c)、收缩压(SBP)、胰岛素抵抗(HOMA-IR)、血肌酐(SCr)、白细胞介素-17(IL-17)均呈正相关性(r =0. 224、0. 164、0. 147、0. 183、0. 173、0. 203,P＜0. 05);IL-17与LDL-c、HbA1c、SBP均呈正相关性(r=0. 162、0. 255、0. 152,P＜0. 05). Logistic 逐步回归分析表明,低密度脂蛋白胆固醇、A-FABP、IL-17为LEAD发病的独立危险因素.结论 2型糖尿病合并LEAD患者外周血A-FABP、IL-17水平明显增加,与LEAD发病密切相关.     

脂肪细胞谷氨酰胺合成酶抑制结肠癌细胞的腹腔转移及血管生成

目的 探讨脂肪细胞谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)对结肠癌腹腔转移及血管生成的影响.方法 转基因小鼠的鉴定:Western blot检测野生型(WT)小鼠及脂肪细胞GS转基因(TgGs)小鼠脂肪细胞GS蛋白的表达.体内实验:分别构建WT小鼠及TgGs小鼠的腹腔转移模型,观察结肠癌细胞在腹腔的种植情况;免疫组化检测移植瘤的血管生成情况.体外实验:取WT及TgGS小鼠的脂肪进行无菌培养,收集条件培养基;通过小管形成实验、CCK8实验、Transwell实验观察条件培养基对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)的小管形成、增殖及迁移的影响.结果 Western blot检测结果显示,TgGs小鼠较WT小鼠脂肪细胞GS蛋白水平显著上调(P＜0.05).TgGs小鼠较WT小鼠腹腔移植瘤数量明显减少[(6.33±4.04)vs(16.00±6.56),P＜0.05],体积明显减小[(2.35±1.93)vs(9.37±5.07),P＜0.01].免疫组化结果显示,TgGs小鼠肿瘤血管生成明显少于WT小鼠(P＜0.05).体外小管形成实验显示TgGs组较WT组HUVECs小管形成总长度明显缩短(P ＜0.05);CCK8实验显示TgGs组及WT组HUVECs的增殖差异无统计学意义(P＞0.05);Transwel实验显示TgGs组HUVECs细胞迁移数量明显少于WT组[(15.33±5.50)vs (78.33 ±13.58),P＜0.01].结论 脂肪细胞GS可抑制结肠癌腹腔转移及肿瘤血管生成.     

骨髓诱导成骨成脂分化机制研究进展

骨髓间充质干细胞(MSC)有分化为多种细胞的潜能,在无任何条件干预下可自然分化为成骨细胞系和脂肪细胞系,两者分化存在相互制约的平衡关系。细胞分化方向的调节通过一些复杂信号通路,如骨形态发生蛋白、Wnt蛋白、脂联素以及脂肪细胞、成骨细胞分化转录调节因子PPAR-γ、Runx2等之间相互作用实现,药物、年龄、微重力作用等因素也可影响这些信号通路,调节MSC分化方向。该文就MSC成骨或成脂分化的影响因素研究进展作一综述。     

骨髓诱导成骨成脂分化机制研究进展

骨髓间充质干细胞(MSC)有分化为多种细胞的潜能,在无任何条件干预下可自然分化为成骨细胞系和脂肪细胞系,两者分化存在相互制约的平衡关系.细胞分化方向的调节通过一些复杂信号通路,如骨形态发生蛋白、Wnt蛋白、脂联素以及脂肪细胞、成骨细胞分化转录调节因子PPAR-γ、Runx2等之间相互作用实现,药物、年龄、微重力作用等因...     

脂联素的生物学作用及临床应用

脂联素（adiponectin，APN）是一种脂肪细胞为主分泌的细胞因子，已证实其具有调节代谢、血管内皮保护、抗炎症反应及心肌细胞保护等多种生物学作用，并发现其也可作为潜在的心血管疾病的生物学标志物。本文根据基础医学、转化医学研究的结果及临床流行病学数据，综述了APN的生物学作用及其临床应用前景。     

双(α-呋喃甲酸)氧钒对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞糖摄取的影响

目的探讨新型的有机羧酸氧钒配合物双(α-呋喃甲酸)氧钒(BFOV)对正常及胰岛素抵抗的3T3-L1脂肪细胞糖摄取的影响。方法采用地塞米松诱导3T3-L1脂肪细胞建立胰岛素抵抗的细胞模型,研究双(α-呋喃甲酸)氧钒对正常及胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗的影响。结果双(α-呋喃甲酸)氧钒(2.5μmol·L-1~40μmol·L-1)对正常的3T3-L1脂肪细胞仅有增加葡萄糖消耗量的趋势,与空白对照组比较,差异无显著性;但能明显增加地塞米松诱导的胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖消耗量,改善模型细胞的胰岛素抵抗状态。结论双(α-呋喃甲酸)氧钒能促进胰岛素抵抗脂肪细胞的葡萄糖摄取,改善胰岛素抵抗状态。     

雄激素对人网膜脂肪细胞分泌瘦素的影响

目的通过体外原代培养人大网膜前脂肪细胞,并诱导其分化至成熟,研究雄激素对脂肪细胞分泌瘦素的影响。方法选取择期开腹手术患者的新鲜脂肪组织,采用胶原酶消化的方法分离培养人大网膜前脂肪细胞,诱导分化至成熟后分别用1、10、100nmol/L的睾酮干预24h后收集上清液。用酶联免疫吸附法同批检测所收集细胞上清液中瘦素蛋白含量。结果100nmol/L的睾酮对已分化前脂肪细胞分泌的瘦素有抑制作用。结论成功建立了原代人网膜前脂肪细胞体外培养模型,通过观察雄激素对脂肪细胞分泌瘦素的影响,为研究肥胖及相关代谢异常疾病的性别差异提供一些实验室证据。