甘草甜素对实验性肥胖大鼠减肥作用及机制探讨

目的探讨甘草甜素（glycyrrhizin）的减肥作用及其可能的作用机制。方法高脂饮食诱导肥胖大鼠模型,通过测量体重、Lee＇s指数、腹腔脂肪分布及重量、摄食量、血脂和血糖,检验甘草甜素灌服4周后的减肥效果;体外培养诱导分化3T3-L1前脂肪细胞,观察药物对脂肪细胞增殖,脂质合成和分解的影响。结果甘草甜素能显著降低高脂饮食诱导的肥胖大鼠体重和Lee’s指数,使其腹腔脂肪减少,降低血液中胆固醇（TC）和游离脂肪酸（FFA）含量,抑制前脂肪细胞增殖,促进脂肪分解,减少甘油三酯（TG）堆积。结论甘草甜素有显著的减肥和调血脂作用,其可能的机制是抑制前脂肪细胞增殖和分化,促进细胞内脂肪分解,降低脂肪细胞内TG存储量。     

瘦身汤促进高脂肥胖大鼠白色脂肪棕色化的机制研究

探讨瘦身汤对促进白色脂肪细胞棕色化相关转录因子PRDM16表达的影响。方法 SD大鼠适应性饲养1周后,随机分为正常对照组、高脂模型组、高脂模型(低、中、高剂量中药组),每组10只。正常组喂基础饲料,其他组喂高脂饲料。同时除模型组给予等体积的氯化钠溶液外,其他组大鼠分别给予低剂量、中剂量、高剂量瘦身汤灌胃。给药4周后,测定各组大鼠血清中的游离脂肪酸、甘油三酯、总胆固醇等生化指标,采用WB法检测大鼠肾周脂肪组织中PRDM16蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组PRDM16蛋白表达则显著下降;与模型组相比,模型+高剂量组大鼠血清中的甘油三酯、总胆固醇、游离脂肪酸等生化指标均显著下降,PRDM16蛋白表达显著升高。结论 中药瘦身汤可降低肥胖大鼠血清中甘油三酯、胆固醇等生化指标的含量,提高机体能量代谢,其作用机制可能是瘦身汤可提高促进白色脂肪细胞棕色化相关转录因子PRDM16的表达。     

缺氧对成熟脂肪细胞去分化影响的实验研究

目的 研究缺氧环境下成熟脂肪细胞体外培养的形态学变化,探讨缺氧环境对成熟脂肪细胞去分化的影响.方法 从成人吸脂术后抽吸物提取脂肪组织来源的干细胞,诱导为成熟脂肪细胞,在缺血缺氧的环境下培养.观察各时间段细胞的形态变化.结果 由脂肪组织来源的干细胞诱导而成的成熟脂肪细胞,在缺氧环境培养数日后,细胞从圆形变为可持续分裂的成纤维细胞状细胞.结论 成熟的脂肪细胞在一定条件下可以去分化为成纤维细胞状细胞.     

紫色悬钩子提取物对TNF-α诱导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型的影响

目的 利用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导培养建立及鉴定3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型,探讨紫色悬钩子提取物对胰岛素抵抗的影响。方法 采用3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、地塞米松(Dex)、胰岛素联合诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞,分别与0,2,5,10,15,20 ng·mL^-1 TNF-α共孵育24,48,72,96 h; MTT法检测紫色悬钩子提取物和TNF-α对3T3-L1脂肪细胞活力的影响;油红O染色观察细胞形态的变化;Western Blot检测Akt、p-Akt蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞对2-NBDG的摄取。结果 TNF-α浓度大于等于10 ng·mL^-1,诱导时间大于等于72 h能够显著降低胰岛素刺激后p-Akt的表达(P<0.01),产生胰岛素抵抗;胰岛素刺激后,与模型组相比,紫色悬钩子提取物都能够不同程度提高细胞中p-Akt的表达和对2-NBDG的摄取能力,其中Fr.3作用最显著(P<0.05)。结论 TNF-α诱导培养可以成功建立胰岛素抵抗细胞模型,紫色悬钩子提取物具有改善...     

吡格列酮、TNF-α对3T3-L1细胞Perilipin mRNA表达影响的研究

目的探讨吡格列酮和TNF-α对3T3-L1细胞中perilipin（周脂素）mRNA表达的影响及其时间效应。方法用吡格列酮（100μmol.L-1）和TNF-α（100μg.L-1）分别处理未分化、分化过程中和分化成熟后的3T3-L1细胞,RT-PCR检测不同干预时间perilipin mRNA的表达水平。结果 （1）未分化3T3-L1细胞中perilipin未见表达,分化过程中细胞perilipin mRNA的表达水平随时间递增。（2）在分化过程中和分化成熟的3T3-L1细胞中,吡格列酮都明显增加perilipin mRNA的表达,TNF-α则明显抑制perilipin mRNA的表达。（3）吡格列酮能抵抗TNF-α对成熟3T3-L1脂肪细胞perilipin mRNA表达的抑制作用。结论随着分化成熟,3T3-L1细胞perilipin mRNA表达量逐渐增加;吡格列酮能明显增加3T3-L1细胞的perilipin mRNA表达,TNF-α则明显抑制其表达;吡格列酮能抵抗TNF-α对3T3-L1脂肪细胞perilipin mRNA表达的抑制作用。     

血清补体C1q结合脂联素对急性冠状动脉综合征的影响

<正>动脉粥样硬化斑块的破裂是造成大多数急性冠状动脉综合征(ACS)的主要原因,动脉粥样斑块的形成与血栓有关。斑块的不稳定与炎症程度相关。补体系统在ACS进展中起重要作用~([1])。脂联素是一类脂肪细胞与血红蛋白结合物~([2])。大多出现在受损动脉内~([3,4]),具有抗炎、抗动脉粥样硬化~([5,6])、抗糖尿病~([7,8])的特性。有研究发现,冠心病(CAD)患者有低水平的总脂联素(Total-APN)~([9])。近来报道,脂联素能结合血液中的     

海地瓜硫酸软骨素对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响

目的研究海地瓜硫酸软骨素(Acaudina Molpadioideschondroitin sulfate,AM-CHS)对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响,并探讨其作用机制。方法采用传统的鸡尾酒诱导剂诱导分化3T3-L1前脂肪细胞,以MTT法检测AM-CHS对3T3-L1前脂肪细胞及不同分化阶段3T3-L1细胞增殖活性的影响;分别采用油红O染色和甘油三酯(triglycerides,TG)含量测定法评价其对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响。采用RT-PCR法检测脂肪细胞中过氧化物酶体增殖体激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptors gamma,PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer bind-ing protein alpha,C/EBPα)、固醇调节元件结合蛋白-1c(ste-rol regulatory element binding protein-1c,SREBP-1c)等分化相关基因的mRNA表达水平。结果 AM-CHS能明显抑制3T3-L1前脂肪细胞和成熟脂肪细胞的增殖,抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化过程,以对分化早期的抑制作用最强。RT-PCR结果表明,AM-CHS能明显降低脂肪细胞PPARγ、C/EBPα和SREBP-1c mRNA的表达。结论海地瓜AM-CHS能明显抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖和分化,其作用机制与下调分化相关基因PPARγ、C/EBPα和SREBP-1c的表达有关。     

脂联素的球状结构域对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型AMPK信号通路的影响

目的观察脂联素的球状结构域(gAd)对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)模型AMPK信号通路的影响。方法将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟的脂肪细胞。用软脂酸制备脂肪细胞IR模型,3个浓度的gAd干预已产生IR的3T3-L1脂肪细胞。用葡萄糖氧化酶法,检测培养液中葡萄糖的浓度;用RT-PCR法,检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、脂肪酸分解代谢关键酶肉碱脂酰转移酶I(CPT-I)基因水平的变化;用Western blot法,检测AMPK Thr-172磷酸化水平。结果 gAd可促进3T3-L1脂肪细胞IR模型葡萄糖摄取,可增加3T3-L1脂肪细胞AMPK、CPT-I基因的表达,且与剂量呈正相关(均P=0.000);gAd可增加3T3-L1脂肪细胞AMPK Thr-172磷酸化水平,且与剂量呈正相关(P=0.000)。结论 gAd经AMPK途径,可改善3T3-L1脂肪细胞的IR。     

miR1934，一种脂联素特异性调控的靶microRNA，在肥胖小鼠的脂肪组织中表达降低

目的:脂联素(Adiponectin,Ap N)是脂肪细胞分泌的最主要抗炎细胞因子。利用Ap N过表达(Ap N-Over)和Ap N基因敲除(Ap N-KO)小鼠模型筛选出Ap N的靶micro RNAs(mi RNAs),以探寻脂肪组织新的具抗炎作用的功能性mi RNAs。方法:给予4周龄雄性Ap N-Over小鼠和其野生型对照小鼠高脂饮食6周后,分离提取腹股沟脂肪组织。采用mi RNA微陈列芯片筛选出两组小鼠脂肪组织间表达有差异的mi RNAs;在Ap N-Over,Ap N-KO和高脂(HFD)诱发的肥胖小鼠脂肪组织中用定量PCR验证上述筛选出的差异mi RNAs;采用生物信息学数据库预测mi RNAs的靶基因。结果:Ap N-Over小鼠脂肪组织中有12个mi RNAs的表达与野生对照小鼠显著不同;定量PCR验证结果显示有3个mi RNAs确实受到Ap N的调节:mi R532-5p的表达被Ap N下调,而mi R883b-5p和mi R1934的表达被上调;其中仅有mi R1934在Ap N-KO小鼠的脂肪组织中明显下降,与Ap NOver小鼠脂肪组织呈现相反的表达模式;mi R1934在HFD诱发的肥胖小鼠的内脏脂肪组织中的表达明显低于普通饮食喂养的小鼠(1.00±0.22 vs.0.54±0.13,P=0.04)。生物信息数据库预测出mi R1934有53个靶基因,其中2个靶基因为丝氨酸/苏氨酸激酶3(serine/threonine kinase 3,STK3)和趋化因子(C-C motif)配体[chemokine(C-C motif)ligand,CCL19],二者均为参与JNK信号通路的分子。结论:mi R1934是体内脂肪组织中受脂联素特异性调节的mi RNA。肥胖小鼠内脏脂肪组织中mi R1934的表达显著降低;生物信息学分析初步发现mi R1934可能参与调节JNK信号通路。因此脂联素特异性的靶mi R1934有可能为改善脂肪组织炎症及其相关的代谢异常提供新的治疗前景。     

替米沙坦对脂多糖诱导3T3-L1脂肪细胞炎症通路的影响

目的 研究替米沙坦对脂多糖诱导3T1-L1脂肪细胞炎症通路的影响,探讨替米沙坦的抗炎机制.方法将3T3-L1脂肪细胞诱导至90%成熟,按随机数字表法分为6组:对照组、LPS组、LPS+替米沙坦(0.01、0.1、1和10μg/ml)组(n=18),向对照组细胞中加DMSO,LPS+替米沙坦组细胞中加入不同浓度替米沙坦,孵育2h后,LPS组和LPS+替米沙坦组再加入脂多糖(1 μg/ml),孵育1h,Western免疫印记法比较各组核蛋白NF-κBp65、总蛋白p-IκBα、IκBα、p-ERK1/2、ERK1/2、P-p38MAPK、p38 MAPK的表达水平.结果 脂多糖刺激后IκBα磷酸化蛋白表达增强(P＜0.05),细胞核内NF-κBp65蛋白表达增多(P＜0.05),MAPK通路相关蛋白ERK1/2磷酸化和p38MAPK磷酸化水平明显增强(P＜0.05),替米沙坦可抑制IκBα磷酸化和NF-κBp65核转位,p-IκBα蛋白表达和核蛋白NF-κBp65表达均降低,大剂量替米沙坦(10 μg/ml)作用时该作用明显(P＜0.05).替米沙坦干预后,p-ERK1/2和p-p38MAPK蛋白表达也受到明显抑制(P＜0.05),大剂量(10μg/ml)时作用明显(P＜0.05).结论 在3T3-L1脂肪细胞中,替米沙坦可以抑制NF-κB通路中IκBα蛋白磷酸化、NF-κBp65蛋白核转位以及MAPK通路中ERK1/2蛋白和p38MAPK蛋白的磷酸化,从而发挥抗炎作用.