复方氨基酸脂质体营养敷料联合术优康在糖尿病足溃疡患者中的临床应用效果观察

目的探讨复方氨基酸脂质体营养敷料(创玉舒)和聚氨基葡萄糖羧酸钠生物胶体液(术优康)在糖尿病足溃疡患者中的运用效果。方法选取该院2015年1月—2019年9月收治的104例糖尿病足溃疡患者作为研究对象,基于随机数字表法分成观察组和对照组,每组52例;对照组采取基础治疗加传统创面处理方法,观察组在基础治疗和传统创面处理基础上,采取术优康联合创玉舒处理创面,对比分析两组创面愈合速度和总体临床疗效。结果观察组在第2、4、6、8周溃疡创面愈合速度明显快于对照组(P<0.01);观察组总有效率为92.31%,高于对照组的69.23%。结论复方氨基酸脂质体营养敷料和聚氨基葡萄糖羧酸钠生物胶体液在治疗糖尿病足溃疡患者中效果显著。     

高效液相色谱-串联质谱法测定人胎盘灌流液中奥司他韦和羧酸奥司他韦浓度

目的建立人胎盘灌流液中奥司他韦和羧酸奥司他韦的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定方法。方法以甲硝唑为内标,胎盘灌流液样品经沉淀蛋白处理,色谱柱为Shim-pack XR-ODSⅡ柱(2.0 mm×75 mm,2.2μm);0.1%甲酸-0.1%甲酸乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 m L·min-1;电喷雾电离源,正离子多离子反应监测,奥司他韦和羧酸奥司他韦定量离子对分别为m/z 313.0→166.1和m/z 285.1→197.1。结果奥司他韦和羧酸奥司他韦分别在0.41~100 ng·m L-1、4.1~1 000 ng·m L-1范围内线性关系良好,平均方法回收率89.3%~104.7%,日内及日间RSD均小于15%,稳定性考察结果良好。结论本方法可用于人胎盘灌流液中奥司他韦和羧酸奥司他韦浓度的检测。     

糖尿病酮症酸中毒

酮体是人体新陈代谢过程中脂肪代谢的正常中间产物,酮体由乙酰乙酸、β-羟丁酸和丙酮三种物质组成。酮体在肝脏内生成,在肝外氧化分解,肝外组织如心脏、。肾脏和肌肉等能迅速将酮体转变为乙酰辅酶A,然后再参加三羧酸循环为肌体供应能量。肝外组织氧化酮体的速度非常快,可以及时迅速分解血中酮体,     

单羧酸转运蛋白2遗传变异与男性不育的功能和临床相关性

MCT2负责丙酮酸盐和乳酸盐在精子的转运,主要作为能量来源并发挥调节精子活力的作用。我们研究了MCT2基因遗传变异、男性不育、精子MCT2表达水平的关系。我们对MCT2基因的内含子2（＋28201A〉G,rs10506398）和MCT2的3’UTRSNP（MCT2的3’端非翻译区单核苷酸多态性）（＋2626G〉A,rs10506399）的功能和遗传学意义进行研究。两个MCT2基因多态性与男性不育相关（n=471,P〈0．05）。特别是MCT2的3’UTR中SNP（＋2626G〉A）与少弱畸精子症有很强相关性。＋2626GG型的精子数是＋2626AA型的2．4倍（＋2626GG：66×106VS＋2626AA;27×106,P〈0．0001）。由于位于MCT2的3’端,MCT2的3’UTR中SNP对表达有重要作用。＋2626GG型的MCT2蛋白量是＋2626AA型的大约两倍。结果提示MCT2的遗传变异与男性不育有着功能和临床上的相关性。     

液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中氯沙坦、5-羧酸氯沙坦和氢氯噻嗪的浓度及药动学

目的建立人血浆中氯沙坦钾及其活性代谢物5-羧酸氯沙坦(EXP-3174)和氢氯噻嗪浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定法,研究氯沙坦钾氢氯噻嗪片在健康人体内的药动学。方法 24名男性健康受试者单剂量空腹口服氯沙坦钾氢氯噻嗪片后48 h内间隔采集肘静脉血,分离血浆测定氯沙坦钾,EXP-3174和氢氯噻嗪血药浓度,采用DAS2.0软件计算药动学参数。结果氯沙坦钾、EXP-3174和氢氯噻嗪的主要药动学参数ρmax分别为(276±127)、(463±135)和(63.8±19.2)μg·L-1;tmax分别为(1.43±1.06)、(3.67±1.32)和(2.40±0.79)h;t1/2分别为(1.53±0.44)、(4.72±1.27)和(5.77±1.52)h;AUC0-48分别为(505±120)、(3 305±646)和(415±103)μg·h·L-1。结论建立的LC-MS/MS测定法专属准确、灵敏度高,可用于氯沙坦钾氢氯噻嗪片血药浓度分析及药动学研究。     

金樱子化学成分的研究

目的在金樱子Rosa laevigata Michx.化学成分研究的基础上,配合药理活性筛选,确认金樱子活性成分或指标性成分的化学结构和提取分离方法。方法采用溶剂法和硅胶柱层析法进行提取分离;利用TLC、HPLC分析纯度;利用化学方法和波谱方法(1HNMR、13CNMR、13CNMR-APT、MS、IR、UV)确定其化学结构。结果分离鉴定了4个化合物,分别为2α,3β,19α,23-四羟基乌苏-12-烯-28-羧酸,金樱子皂甙A(2α,3β,19α,23-四羟基乌苏-12-烯-28-β-吡喃葡萄糖甙),野鸦春酸,2α-羟基乌苏酸。结论2α-羟基乌苏酸为首次从金樱子中分离得到。     

单羧酸转运蛋白1、2、4在急性心衰大鼠模型肾上腺的表达变化

目的观察单羧酸转运蛋白(monocarboxylate transporter,MCT)1、2、4在急性心衰大鼠肾上腺的表达变化,以探讨急性心衰肾上腺的能量代谢变化。方法随机将成年健康SD大鼠(雌雄不限,250±20 g)50只,分为3组:正常组(n=10)、假手术组(n=20,2 subgroups,10 in each)和模型组(n=20,2subgroups,10 in each)。用1.5%戊巴比妥钠静脉注射制作大鼠急性心衰模型;注毕,运用BL-420F生物机能实验系统记录左室内压峰值(LVSP)和左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)的变化曲线;用IHC和Western Blot检测模型鼠,肾上腺MCT1,2,4的表达变化。结果在急性心衰发生10 min时,肾上腺皮质和髓质MCT1、2、4的表达均有升高,此时假手术组MCT1、2、4也有升高。与正常对照组相比较,两组的MCT1、2、4的表达升高均具有统计学意义(P<0.05);在20 min时,大鼠肾上腺MCT1、2、4的表达较正常组却有所下降,与正常组相比较,仅MCT1的表达下调具有统计学意义(P<0.05),而MCT2、4则无明显差别(P>0.05)。假手术20 min组与10 min组相比较,MCT1、2、4的表达无明显差别(P<0.05)。结论在急性心衰和创伤性应激状态下,肾上腺MCT1、2、4的表达,在十分钟内呈代偿性增加,但随着心衰时间的延长,其表达反而降低,机体的能量代谢出现失代偿,提示MCT1、2、4参与创伤性应激及急性心衰的能量代谢过程。     

皮肤屏障功能

1 皮肤屏障与皮肤病 皮肤屏障的结构基础主要是角质层以及表皮脂质。天然保湿因子等。表皮脂质包括神经酰胺、游离胆固醇和游离脂肪酸等，这些脂质在基底层细胞向角质层分化过程中，含量逐渐增高，到达角质层时被排出至细胞间隙，形成防止水分丢失的屏障。天然保湿因子是由表皮中的中间丝相关蛋白（filaggrin）分解形成，包含氨基酸、吡咯烷酮羧酸、尿刊酸、乳酸、尿素等多种低分子量物质，在角质层内与水结合而维持皮肤屏障功能。     

基于糖酵解机制的白头翁皂苷多成分协同抑制人肺癌NCI-H460细胞增殖作用研究

目的探讨白头翁皂苷中有效成分抑制人肺癌NCI-H460细胞增殖作用及其有效成分协同对肿瘤糖酵解机制的作用。方法体外培养NCI-H460细胞,以MTT法检测白头翁皂苷中白头翁皂苷A3(A3)、白头翁皂苷D(PSD)、白头翁皂苷B4(B4)、常春藤碱C(HC)、常春藤碱D(HD)、常春藤皂苷元(HY)、白头翁皂苷R13(R13)和白头翁皂苷PSA(PSA)的抗肿瘤活性;通过Calcusyn 3.0软件将筛选出的白头翁有效成分进行配伍及协同抗肿瘤作用研究;采用生物化学检测法和Elisa法检测糖酵解相关代谢产物(丙酮酸、乳酸、葡萄糖)和葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、乳酸脱氢酶(LDHA)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)和己糖激酶(HK)水平;运用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术和Westernblotting技术检测糖酵解相关41个成员基因和关键蛋白细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、Ras、GLUT1、单羧酸转运体4(MCT4)的表达。结果体外抗肿瘤结果显示,白头翁皂苷中以PSD、R13、PSA抑瘤活性最强,其对NCI-H460细胞IC50分别为5.2、4.6、7.9μg/m L;运用Calcusyn 3.0软件确定了白头翁皂苷中3个有效单体成分配伍比例及判定了配伍后具有协同抗肿瘤效应;生化和Elisa结果显示,与对照组比较,白头翁单体组及联合组的丙酮酸、乳酸、葡萄糖、HK、PKM2、LDHA含量均明显降低,且GLUT1含量明显升高(P0.05),与各单体组相比,其联合组的丙酮酸、乳酸、葡萄糖、HK、PKM2、LDHA含量均明显的降低,GLUT1含量明显升高(P0.05);q RT-PCR结果显示,单体联合组在网络图中节点最多,其作用靶点多于各个单体组;Western blotting结果显示,与对照组比较,白头翁单体联合组可显著性降低细胞ERK1/2、Ras、GLUT1、MCT4蛋白表达(P0.05)。结论白头翁皂苷有效成分联用对NCI-H460细胞具有协同抗肿瘤作用,其可能通过调节肿瘤细胞糖酵解发挥抗肿瘤作用。     

硫酸二乙酯作乙基化剂制备-7氯-1-乙基-6-氟1,4-二氢-4-氧喹啉-3-羧酸的工艺改进

本文采用硫酸二乙酯与7-氯-6-氟-4-羟基喹啉-3-羧酸乙酯反应,然后用氢氧化钠液水解得7-氯-1-乙基-6-氟-1,4-二氢-4-氧喹啉-3-羧酸。其总收率为80％,此法降低了原料成本,简化了工艺,适合工业生产。