高效液相色谱法同时测定桑叶中绿原酸及4种黄酮类成分的含量

目的建立同时测定桑叶中绿原酸及4种黄酮类成分芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素含量的方法,为优化《中国药典》中桑叶含量测定项下方法提供依据。方法采用高效液相色谱(HPLC)法,Inertsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)和0.2%磷酸-0.2%三乙胺水溶液(B)为流动相,梯度洗脱;检测波长为360 nm;柱温:30℃;流速:1.0 mL·min-1。结果在50 min内,绿原酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素能达到良好的分离,分别在0.0674~1.3475 mg·mL^-1、0.0045~0.0898 mg·mL^-1、0.0282~0.5640 mg·mL^-1、0.0159~0.3186 mg·mL^-1、0.0006~0.0130 mg·mL^-1范围内呈良好的线性关系(r分别为0.9996、1.0000、1.0000、1.0000、1.0000),平均回收率分别为97.92%、98.74%、98.17%、98.78%、98.6%,相对标准偏差(RSD)分别为1.41%、1.68%、1.69%、1.42%、1.59%。结论所建立的方法准确可靠,可用于桑叶药材的的质量控制,优化了《中国药典》中桑叶药材质量标准。     

UHPLC-Q-Orbitrap HRMS快速鉴定羊红膻药材的化学成分

目的:应用超高液相色谱四级杆-静电场轨道肼高分辨质谱联用(UHPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术,快速识别与鉴定羊红膻药材中主要化学成分。方法:采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2. 1 mm×50 mm,1. 7μm),流动相0. 1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)进行梯度洗脱。质谱采用ESI源,负离子一级全扫描-数据依赖性二级质谱扫描(MS2)模式采集数据。通过高分辨质谱数据解析,并结合对照品数据和相关文献对羊红膻药材中的化学成分进行识别和鉴定。结果:通过精确相对分子质量和二级碎片离子分析,并结合对照品确认、质谱裂解规律和相关文献检索,共鉴定29个化合物,包括绿原酸类化合物19个,黄酮类7个,小分子有机酸3个,其中除木犀草素葡萄糖醛酸苷和芹菜素葡萄糖醛酸苷外,其余27个化合物为首次从该药材中发现。结论:建立的UHPLC-Q-Orbitrap HRMS可快速鉴定羊红膻药材中的化学成分,研究结果为其药效物质基础、质量控制以及临床应用等研究提供了科学的依据。     

HPLC测定湖南不同产地金银花中绿原酸和木犀草素苷的含量

金银花为忍冬科植物忍冬（Lonicera Japonica Thunb．）、红腺忍冬（Lonicera hypoglauca Miq．）、山银花（Lonicera confusa DC．）或毛花柱忍冬（Lonicera Dasystyla Rehd．）的干燥花蕾或带初开的花。又名双花、忍冬花等,为常用中药。主要含有绿原酸、异绿原酸、挥发油、咖啡酸、黄酮、皂苷等。具有清热解毒、散风消肿的功能。主治风热感冒、咽喉肿痛等症。金银花为半常绿性缠绕灌木,适应性很强,耐旱、耐寒,野生于丘陵、山谷、林边,除西北、东北外,其他各省区均有分布。现多为栽培。绿原酸常常作为金银花质量控制的指标成分。为了较全面比较金银花的质量,笔者通过HPLC对来自湖南不同产地的金银花中的绿原酸、木犀草素苷进行了测定,现将其测定方法介绍如下。     

北川引种栽培金银花药材质量评价

目的:通过比较北川3个引种栽培产地金银花和山东原产地金银花中有效成分含量差异,对药材质量进行初步评价。方法:采用高效液相色谱法分别测定各产地金银花中绿原酸和木犀草苷的的含量,采用SPSS 20.0进行统计学分析。结果:北川马槽乡、桃龙乡和永安镇引种金银花中绿原酸含量分别为2.47%、2.63%和2.37%,山东平邑金银花中绿原酸含量为2.53%;北川3个产地金银花木犀草苷的含量分别为0.080%、0.083%和0.084%,山东平邑金银花木犀草苷的含量为0.088%。北川3个产地引种栽培金银花中绿原酸的含量与山东平邑产比较,差异无统计学意义(P0.05),木犀草苷含量明显低于山东平邑(P0.05),但均高于《中国药典》标准。北川引种的金银花药材可用于临床使用。结论:北川3个产地引种栽培金银花中绿质酸、木犀草苷含量均高于《中国药典》标准,可用于临床。     

野菊花药材与菊花药材特征图谱的比较

目的:研究野菊花药材和菊花药材的超高效液相色谱(UPLC)特征图谱,为区分野菊花药材和菊花药材提供参考。方法:采用CORTECS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.6μm);以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相梯度洗脱;进样量1.0μL;检测波长326 nm;体积流量0.3 mL·min~(-1);柱温25℃。结果:在野菊花药材的特征图谱中,绿原酸峰与蒙花苷峰的相对峰面积均小于1.0,而在菊花药材的特征图谱中均大于1.0。结论:该方法简单、高效,可作为野菊花药材和菊花药材的快速鉴别方法。     

新绿原酸的大鼠体内代谢产物的UPLC-Q-TOF MS鉴定

目的:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS)高分辨质谱技术分析鉴定新绿原酸大鼠体内的代谢产物。方法:灌胃给药后,收集正常组和给药组大鼠的血浆、尿液和粪便。以固相萃取法处理生物样品后,采用Waters HSS T3 UPLC色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),0.1%甲酸水溶液(B)-乙腈(A)流动相系统进行梯度洗脱;在负离子模式下对生物样品进行分析。结果:最终根据所获得的精确相对分子质量、色谱保留行为、质谱裂解规律、特征碎片离子、对照品比对以及相关文献报道,共分析鉴定了包括原型药物在内的43个代谢产物。其主要代谢途径为异构化反应、水解反应、甲基化、葡萄糖醛酸化以及其复合反应。结论:应用UHPLC-Q-TOF MS高分辨液质联用技术能较为全面地阐明新绿原酸在大鼠体内的代谢情况,并为进一步的药效学以及绿原酸类物质的开发、利用提供借鉴。     

HPLC法测定消癌平注射液中绿原酸的含量

目的:建立消癌平注射液中绿原酸含量测定的HPLC法。方法:采用HPLC法,色谱条件:Diamonsil C18色谱柱(200mm×4.6mm,5μm);以乙腈-0.4%H3PO4溶液(13:87)为流动相;流速为1.0ml·min-1,用二极管阵列检测器检测,检测波长327nm,柱温30℃。结果:绿原酸在0.00944μg~0.08496μg内呈良好的线性关系(r=0.9996);平均回收率为99.01%,RSD为1.21%(n=5)。结论:本方法快速、简便,结果准确、可靠,可用于消癌平注射液中绿原酸的含量测定。     

绿原酸对小鼠海马一氧化氮合酶神经元的保护作用

目的:探讨绿原酸(CA)对小鼠海马一氧化氮合酶神经元的保护作用及改善学习记忆障碍的机理。方法:在小鼠海马定位注射海人酸(KA)建立动物病理模型,分为KA组、对照组、CA组(术后第二天开始灌胃,CA 8g/kg/d,连续35 d),用Y型迷宫测试小鼠学习记忆能力,免疫组化方法观察脑内海马NOS神经元的变化。结果:KA组比对照组小鼠海马CA1-4区内的NOS神经元明显减少(P<0.05);CA组较KA组小鼠海马CA1-4区内的NOS神经元明显增加(P<0.05);CA组较KA组小鼠在Y型迷宫中的正确次数增多。结论:CA对KA所致海马CA1-4区内的NOS神经元损害有保护作用,并改善KA损伤海马所致的学习记忆障碍。     

HPLC测定通关藤中绿原酸的含量

目的建立测定通关藤中绿原酸含量的方法,并测定不同产地、不同生长年限通关藤中绿原酸的含量。方法采用HPLC法。结果绿原酸的峰面积与其质量在0.08~1.59μg内呈良好的线性关系(r=0.9998),平均加样回收率为101.41%,RSD=1.59%。结论所用方法简单、快速、准确,为通光藤质量评价提供了依据。