黄芩愈伤组织培养及黄芩苷合成调控的研究

目的研究黄芩愈伤组织培养和黄芩苷合成调控的规律。方法采用植物细胞培养技术诱导愈伤组织;HPLC法测定黄芩苷的量。结果黄芩愈伤组织生长和黄芩苷积累的优势培养条件为在基本培养基MS中氮源浓度为60mmol/L(NH4 ∶NO3-为1∶1),KH2PO4浓度0.5~1.5mmol/L,附加80g/L蔗糖,0.3mg/LIAA,2mg/L6-BA和200mg/L蛋白胨,温度(25±1)℃,暗培养。培养40d后收获愈伤组织,生物量达28.7g/L,黄芩苷为167.4mg/g,明显高于野生黄芩的最高量。结论黄芩愈伤组织的生长和黄芩苷的积累并不同步,而是先生长后合成。蔗糖对黄芩苷的合成具有明显的调节作用,在蔗糖质量浓度小于3%时,能有效促进愈伤组织的生长,但对黄芩苷的合成没有刺激作用;当蔗糖质量浓度在3%~8%时,愈伤组织表现出明显的生长和次生代谢功能,黄芩愈伤组织的生长及黄芩苷合成明显增加;当蔗糖质量浓度在8%时,两者均达到最大值。     

新生大鼠上丘脑组织培养研究

目的探讨新生大鼠上丘脑组织培养方法,并对其在培养过程中的变化进行观察.方法取出生4 d的SD乳鼠上丘脑组织,分别在鼠尾胶原玻片、多聚赖氨酸玻片和Biocoat培养小室上进行组织培养,使用相差显微镜动态观察组织块生长情况.48 h后观察组织块贴壁率,在培养5d时使用图像分析仪观察细胞迁移情况,测量最大迁移距离.使用乳酸脱氢酶试剂盒,测量组织培养液中乳酸脱氢酶活性的动态变化.常规HE染色形态学观察,并使用透射电镜观察组织块超微结构.结果与传统的培养载体相比,上丘脑组织在Biocoat培养小室上进行培养可以获得较高的组织贴壁率和细胞迁移距离.上丘脑组织在接种后3～15 d,其培养液中乳酸脱氢酶活性保持在较低水平.培养早期上丘脑组织块边缘出现细胞突起,胶质细胞迁移,随着培养时间延长,细胞出现凋亡,组织结构破坏.结论Biocoat培养小室是进行新生大鼠上丘脑组织培养的理想载体,接种3 d后组织生长趋于旺盛,而在2周后多数组织的生长逐渐衰退.     

石斛属植物组织培养研究进展

综述了石斛组织培养条件、人工种子研制、种质保存、次生产物积累、毛状根诱导、快速繁殖等方面的研究进展,并指出了研究中存在的局限性和今后研究重点,展望了石斛组织培养的应用前景,这对解决石斛自然资源匮乏、扩大药用来源及其资源的合理开发利用有着重要指导意义.     

天山雪莲愈伤组织培养与次生代谢物形成的研究

目的：研究不同培养条件对天山雪莲愈伤组织生长及总黄酮产生的影响，探讨组织培养生产总黄酮的可能性。方法：通过脱分化培养获得天山雪莲愈伤组织，并对该组织含有的总黄酮进行测定。结果：在MS＋NAA＋6-BA培养基上培养10～15d，能获得紫红色愈伤组织，且总黄酮含量较高；温度梯度、NH4NO3浓度、培养基和培养时间对愈伤组织的生长和总黄酮产生均有显著影响。结果：天山雪莲愈伤组织培养条件对总黄酮产生有影响。     

石斛属植物组织培养研究进展

综述了石斛组织培养条件、人工种子研制、种质保存、次生产物积累、毛状根诱导、快速繁殖等方面的研究进展，并指出了研究中存在的局限性和今后研究重点，展望了石斛组织培养的应用前景，这对解决石斛自然资源匮乏、扩大药用来源及其资源的合理开发利用有着重要指导意义。     

薄荷组织培养研究

目的采用组织培养的方法,进行薄荷种苗快速繁殖技术研究,为其种苗生产的现代化提供科学依据。方法用不同浓度和配比的6-BA和NAA以及适当调节铁离子浓度对薄荷茎段进行组织培养。结果以6-BA:NAA为4:0.2ppm配比时芽丛诱导数最多,同一材料粗细差异极其显著的母本茎段接种于不同浓度和配比的6-BA和NAA组合的培养基上培养三代后,其后代无显著粗细差异,但粗茎段母本的后代在生长性状上优于细茎段母本;试验同时表明,铁离子浓度过高会抑制芽的生长。结论适宜的芽增殖培养基:4ppm6-BA+0.2ppmNAA。     

试管地黄形成过程中形态发生的研究

目的 :研究试管地黄形成的形态发生过程 ,比较试管地黄与自然条件下生长的地黄在形态解剖上的异同。方法 :取离体条件下和自然条件下不同阶段形成的地黄块根 ,染色后制成石蜡切片 ,于显微镜下观察。结果与结论 :试管地黄在形态解剖方面与自然条件下生长的地黄具有一致性 ,说明试管地黄在诱导过程中未发生结构上的变化。     

五指毛桃组织培养研究

以五指毛桃茎节为外植体,1/2MS培养基加不同植物生长调节剂的组培实验结果表明:不定芽最适诱导培养基为1/2MS BA1.0 mg/L NAA1.0mg/L和1/2MS BA1.5 mg/L NAA0.5 mg/L,增殖培养基为1/2MS 6-BA0.5 mg/L,生根培养基为1/2MS IBA 1mg/L.本文还对组织培养过程中,导致褐变产生的因素及防止褐变的方法进行了探讨.     

白及幼根组织培养技术研究

目的：为白及组培快繁寻求最佳部位及最佳培养基配比。方法：研究不同激素浓度和配比对白及不同外植体诱导分化、增殖及生根的影响。结果：幼根最容易诱导出丛生芽,其最佳培养基为1/2MS＋1.0 mg·L-16-BA＋2.0 mg·L-1 NAA;丛生芽增殖最佳培养基为MS＋1.0 mg·L-16-BA＋0.05 mg·L-1 NAA;生根培养基以1/2MS＋0.5 mg·L-1 NAA为最佳。结论：建立了白及组培快繁体系。     

转化生长因子β2在小鼠心脏近端流出道隔心肌化过程中的作用

目的利用Cx43基因剔除（KO）小鼠模型,观察TGFβ2在心脏流出道隔的表达,探讨Cx43基因剔除小鼠心脏流出道隔心肌化异常与TGFβ2的关系;采用胚心脏体外培养技术,研究外源性TGFβ2是否促进流出道隔心肌化过程.方法选用胚E12.5～E15.5 d的Cx43基因剔除纯合型（Cx43-/-）、杂合型（Cx43＋/-）及野生型（Cx43＋/＋）C57/BL6小鼠作为研究对象,采用PCR方法鉴定基因型,免疫组织化学法测定TGFβ2;选用野生型E12.5进行胚心脏体外培养至E15.5,同时加用TGβ2不同剂量干预处理,免疫组织化学法测定肌节肌动蛋白α-SCA的表达.结果 Cx43 KO小鼠胚期心脏近端流出道隔心肌细胞明显减少,尤其以E13.5和E14.5的Cx43-/-小鼠为著.与Cx43＋/＋小鼠对照,Cx43-/-小鼠心脏近端流出道隔TGFβ2的表达明显降低,以E14.5较为显著;E14.5的Cx43＋/-小鼠表达也有降低.然而TGFβ2不同剂量干预组均没有见到明显的促进离体心脏心肌化的作用.结论 Cx43 KO小鼠心脏近端流出道隔存在明显的心肌化延迟.TGFβ2表达减少可能参与了Cx43-/-小鼠心肌化异常的发病机制.体外应用TGFβ2可能难以模拟在体的时空表达模式,或者心肌化的进行需要精确的TGFβ2的剂量和严格的培养条件.