快速诊断多房棘球蚴病胶体金免疫层析试条方法的建立与评价

目的建立快速、简便诊断多房棘球蚴病的胶体金免疫层析试条方法。方法提取多房棘球蚴原头节总RNA,通过RT-PCR获得编码Em18基因片段并克隆入pGEX-3X表达载体,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达得到重组蛋白;采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,标记抗人IgG单克隆抗体;将重组Em18抗原包被于硝酸纤维素膜适当位置,制成检测特异抗体的胶体金免疫层析试条。用该试条检测多房棘球蚴病(56份)、细粒棘球蚴病(87份)、囊尾蚴病(30份)、日本血吸虫病(10份)和弓形虫病(10份)患者血清,以及健康人(50份)血清,以评价其检测的敏感性和特异性,同时用ELISA法进行平行检测,以评价该试条的诊断性能。结果以重组蛋白Em18为抗原胶体金免疫层析试条检测多房棘球蚴病患者血清,敏感性为92.9%(52/56)。与细粒棘球蚴病和囊尾蚴病患者血清分别存在9.2%(8/87)和3.3%(1/30)的交叉反应,与健康人血清存在8.0%(4/50)的假阳性率,与日本血吸虫病和弓形虫病患者血清则无交叉反应,特异性为93.0%(174/187)。ELISA法检测的敏感性和特异性分别为94.6%(54/56)和92%(172/187),与试条法比较两者差异均无统计学意义(P>0.05)。kappa分析结果显示,试条法与ELISA法检测多房棘球蚴病患者血清的结果高度一致(κ=0.98)。结论以重组Em18抗原建立的快速诊断胶体金免疫层析试条,检测多房棘球蚴病的敏感性和特异性均较高。     

生物纸在重度慢性阻塞性肺疾病患者电视胸腔镜肺切除术中应用的效果分析

目的 探讨大清生物纸（可吸收止血膜）应用于重度慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者电视胸腔镜肺切除术（VATS）中的疗效.方法 重度COPD患者在VATS使用直线型切割缝合器后,分为使用大清生物纸48例（大清组）和不使用大清生物纸37例（对照组）.比较两组患者术后平均漏气时间、渗血情况及平均住院时间.结果 两组患者术后均未出现需要机械辅助通气现象,无手术死亡病例.大清组术后平均住院时间为（7.8±2.1）d,术后平均漏气时间为（3.3±2.1）d;对照组术后平均住院时间为（9.8±3.4）d,术后平均漏气时间为（5.0±3.2）d.两组患者术后住院时间、术后漏气时间之间差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 应用大清生物纸行肺创面加强修补,可有效预防重度COPD患者肺切除术后肺漏气和渗血等并发症,减少了患者的术后住院时间,大大减轻了患者的痛苦及经济负担.     

不同海拔和光照对黄芩中7种黄酮类有效成分含量的影响

目的分析不同海拔、光照因素对黄芩中7种黄酮类有效成分量的影响,为黄芩种植最佳生长条件的选择提供理论依据。方法采用HPLC法同时测定人工种植的24批黄芩样品中野黄芩苷、黄芩苷、汉黄芩苷、芹菜素、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A7种成分的含量,并采用方差分析法进行不同海拔、光照环境(阴坡、阳坡)与各成分量的相关性分析。结果同一生长年限,在海拔(550±30)、(650±30)m 2个范围,对黄芩中7种成分的量进行比较,其中黄芩苷、汉黄芩苷有极显著性差异(P0.01),野黄芩苷、黄芩素、千层纸素A、汉黄芩素、芹菜素有显著性差异(P0.05);阴坡和阳坡2种不同的光照条件下,黄芩中7种成分的量相比,无显著性差异(P0.05)。结论在同一生长年限,随海拔的升高,黄芩中黄酮类成分的量都呈现明显的上升趋势,有显著性差异。而光照(阴坡、阳坡)不同时,黄芩中黄酮类成分的量无显著性差异,但除汉黄芩苷、黄芩素外,其他黄酮类成分含量的均数阳坡高于阴坡。黄芩人工种植宜选择阳光直接照射的平地或阳坡,同时及海拔偏高有利于提高黄芩中黄酮类化学成分总量的积累。     

高效液相层析法分析糖胺多糖的二糖组成和性质

为了建立用高效液相层析分离糖多糖酶解产物二糖的方法。六种二糖浓度在４－７０ｍｇ／Ｌ范围均与高效液相色谱峰面积成线性关系，ｒ值分别为０．９９或０．９８；回收率在８７．６９％－９２．３１％；批纳变异系数均≤３．９５％；批间变异系数≤４．９２％。该方法简便、快速，灵敏，可广泛用于组织及体液糖胺多糖的结构和性质分析。     

微柱层析检测高分子碱性磷酸酶

本文采用自制小柱Sephacryl S-300凝胶过滤法把血清碱性磷酸酶分为高分子和低分子两个部份,并建立了定量高分子碱性磷酸酶的检测方法。对高分子碱性磷酸酶分离的最适条件、电泳及层析特性、分子量、米氏常数等方面进行了研究。该法检测临床标本发现高分子碱性磷酸酶主要存在于阻塞性黄疸的血清中,该项试验对部份肝病的诊断与鉴别诊断具有较大临床价值。     

食品中违法添加奥沙普嗪的荧光免疫层析方法研究

目的建立一种筛查食品中违法添加的奥沙普嗪荧光微球免疫层析法(FICA)。方法以改良活泼酯法将奥沙普嗪连接到牛血白蛋白和卵清白蛋白,合成免疫抗原和检测抗原,免疫家兔获得针对抗奥沙普嗪抗体;以抗体标记的荧光微球(40 nm),在检测线和质控线发生免疫反应,分别形成荧光检测信号,构建荧光免疫层析方法。结果在ELISA体系检测奥沙普嗪的IC50值为13.2 ng·m L-1,与8种相关药物交叉反应率都小于0.1%,优化FICA试剂条对奥沙普嗪的最低检测限为2.0 ng·m L-1。优化的FICA试剂对50个市售样品的检测结果,与HPLC验证结果吻合。结论本方法灵敏、特异、简便、快速,是筛查食品中违法添加奥沙普嗪的有效工具。     

自拟四味止血片质量标准的改进和完善

目的建立四味止血片的质量标准。方法采用薄层色谱法(TLC法)对四味止血片中益母草、地榆、丹参进行定性鉴别;采用高效液相层析(HPLC)测定丹参中丹参素钠的含量,色谱柱:Agilent SB-C_(18)(4.6×250 mm,5μm),流动相:乙腈-2%冰乙酸溶液(5∶95),流速0.8 ml/min,检测波长281 nm,柱温25℃。结果薄层鉴别中,供试品在与对照药材或对照品相应的位置上显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰;丹参素钠的线性范围0.3980~3.9800μg,r=0.9999(n=7),平均回收率95.31%,RSD为2.17%(n=9)。结论该方法操作简便,结果准确可靠,重复性好,可作为四味止血片的质量控制方法。     

HPLC法测定克白酊中补骨脂素、异补骨脂素和盐酸异丙嗪的含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定克白酊中补骨脂素、异补骨脂素和盐酸异丙嗪的含量测定方法。方法采用HPLC对补骨脂素、异补骨脂素和盐酸异丙嗪的含量进行测定。结果克白酊中补骨脂素含量在10~100μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率99.0%(n=6),精密度RSD=0.13%;异补骨脂素含量在10~100μg/ml范围内线性关系良好(r=1),平均回收率99.6%(n=6),精密度RSD=0.10%;盐酸异丙嗪含量在10~80μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9997),平均回收率101.1%(n=6),精密度RSD=2.04%。结论该方法简单,结果准确、重现性好,可作为该制剂的质量控制方法。     

纸片法和国标法对食品霉菌检验效果比较

目的：比较纸片法和国标法对食品霉菌的检验效果。方法采样标本来自安徽省望江县疾病预防控制中心质管科送检的糕点、饮料等共416份,其中糕点317份,饮料99份。所有样本均同时采用纸片法和国标法进行霉菌检验,比较2种方法的检验效果。结果国标法检测糕点、饮料的合格率[75.7%（240/317）、63.6%（63/99）]与纸片法检测糕点、饮料的合格率[78.9%（250/317）、65.7%（65/99）]比较,差异均无统计学意义（χ^2=0.899、0.088,P＞0.05）。结论2种方法均可准确检验食品中的霉菌,但相对国标法而言,纸片法更快速、简便、有效、实用,可替代国标法。     

临床实用心电图入门 第四十四讲 如何做出一份合格心电图

<正>心电图技术目前已广泛应用于临床,给临床医生诊治心脏病提供了强有力的武器。尤其对于大部分心律失常、心肌损伤、心肌坏死与缺血,具有较高的敏感性。同时,我们知道心电图只是心肌细胞电激动过程的反应,基本不能评估心脏的解剖结构及功能,因此我们要正确应用心电图,充分发挥心电图的优势。要准确分析心电图,首先要做出质量合格的心电图,在此,我们提醒初学者注意以下几点:一、注意定准电压及走纸速度操作心电机时首先要确定正确的定准电压及走纸速度标