杆状病毒介导LacZ基因转染体外培养的人虹膜色素上皮细胞

目的：研究重组杆状病毒(baculovinus)载体介导β—半乳糖苷酶基因(LacZ)对体外培养虹膜色素上皮(IPE)细胞的转染和表达情况。方法：将质粒pCMV—β中的CMV—LacZ表达盒插入杆状病毒表达栽体pFast BacI的Eco RI／Hind Ⅲ位点，构建重组质粒pBac—β，并利用Bac—to—Bac表达系统在Sf9细胞中产生出重组杆状病毒BV—β。将MOI为200的BV—β感染经酶消化加显微法分离培养的IPE细胞，24h后进行X-gal染色。在显微镜下观察IPE中LacZ表达阳性的情况，记录阳性细胞所占的百分比。结果：限制性酶切分析及测序结果表明，我们已成功构建表达质粒pBac—β及重组杆状病毒BV—β。X-gal染色证实杆状病毒介导LacZ在细胞中的表达呈蓝色，弥漫于整个胞浆。感染后24h时表达阳性率达85％。结论：重组杆状病毒可有效介导报告基因在体外培养的IPE细胞中表达，为利用杆状病毒构建可供移植的基因工程化虹膜色素上皮细胞提供了实验依据。     

挫伤性前房出血治疗分析

目的：观察细胞色素C对挫伤性前房出血的治疗效果。探讨恢复重症前房出血患视功能的有效治疗方法。方法：采用细胞色素C15～30mg加入5％葡萄糖静脉点滴．每日一次。眼压高．同时应用20％甘露醇150～250ml静脉点滴。并发虹膜睫状体炎．加用地塞米松．局部或全身用药．同时散瞳。结果：治疗1～9天前房出血全部吸收，平均3．8天。重症前房出血平均396天．无一例发生再出血及角膜血染等并发症。视力大于0．815例．0．4～0.66例．0．1～0.316例．小于0.123例．前房Tyndall氏均为阴性。结论：采用细胞色素C治疗挫伤性前房出血．疗程短．疗效满意．无并发症。     

视网膜下液对培养的人视网膜色素上皮细胞、神经胶质细胞及成纤维细胞生长的刺激作用

目的:研究视网膜下液(subrefinal fluid,SRF)对增殖性玻璃体视网膜病变(proliferativeVitreoretinopathy，PVR)的多种细胞增殖的影响. 方法；采用直接细胞计数和_³H-TdR掺入率测定DNA合成两种方法观察28例孔源性视网膜脱离患者SRF对培养的人视网膜色索上皮(retinal pigment epithelium，RPE)细胞，视网膜神经胶质(retinal glia，RG)细胞及成纤维细胞(flbroblast，FB)生长刺激作用． 结果：所有标本均具有刺激RPE细胞、RG细胞及FB增殖和DNA合成能力，增殖率范围分别在基线上52.5%～233.3%、36.4%～177.8%、55.4%~277.8%之间．SRF促细胞增殖串在三种细胞间比较无显著差异。 结论：SRF具有促多种细胞增殖的能力，推测SRF中含有促细胞增殖的活性物质。 （中华眼底病杂志，1996，12：233-235）     

细胞色素P450 1A1cDNA表达质粒的构建及转基因细胞系的建立

将ＣｙｔＰ４５０１Ａ１ｃＤＮＡ片段亚克隆至哺乳动物细胞高表达型穿梭载体中，酶切图谱显示片段被正向克隆于多克隆位点中。运用电穿孔法将重组质粒转入人羊膜ＦＬ细胞中国仓鼠ＣＨＬ及Ｖ７９细胞中，经Ｇ４１８筛选３周后获得抗性细胞克隆，并扩大成系。     

诃子、甘草与制草乌合用调控心脏代谢酶CYP2J3减毒机制

目的：基于心脏细胞色素P450(CYP450)系统分别考察诃子、甘草与制草乌及有效成分鞣花酸、甘草苷与乌头碱合用的减毒机制。方法：在体内实验方面,大鼠随机分为空白组,制草乌组（0.25 g·kg-1）,诃子组（0.25 g·kg-1）,甘草组（0.25 g·kg-1）和诃子+甘草+制草乌合用组（0.25 g·kg-1+0.25 g·kg-1+0.25 g·kg-1,以制草乌为标准）,给药8 d后测定大鼠肌酸激酶（CK）与乳酸脱氢酶（LDH）,观察大鼠心脏组织的病理学改变,并选择实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞色素P2J3(CYP2J3) mRNA和蛋白表达水平的变化;在体外实验方面,设空白组、乌头碱组、鞣花酸组、甘草苷组与乌头碱+鞣花酸+甘草苷合用组,利用高内涵分析技术检测其对细胞数目、DNA含量、活性氧（ROS）和线粒体膜电位（MMP）的影响,同时检测CYP2J3 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果：体内实验中,与空白组比较,制草乌组大鼠血清中CK、LDH水平均明显升高（P<0.05,P<0.01...     

缺氧对成年和新生大鼠大脑皮质细胞色素氧化酶的影响

目的 :探讨缺氧时成年与新生大鼠大脑皮质神经元超微结构和细胞色素氧化酶的活性变化。方法 :用光学显微镜观察成年与新生大鼠大脑皮质的形态变化 ,用电子显微镜观察其大鼠大脑皮质神经元的超微结构改变。用细胞化学方法显示细胞色素氧化酶反应产物在神经元内的分布。结果 :缺氧导致新生大鼠神经元线粒体损伤与细胞色素氧化酶活性减弱。结论 :缺氧 1 5h ,新生大鼠大脑皮质神经元线粒体的破坏、内质网的扩张和细胞色素氧化酶活性减弱均较成年大鼠明显     

色素绒毛结节性滑膜炎28例报道

目的探讨色素绒毛结节性滑膜炎(PVS)的临床病理特点、治疗和预后的关系。方法本组PVS28例,男13例,女15例,年龄12～53岁。膝关节15例,手指7例,足背4例,颞颌及骶髂关节各1例,多肢体1例。局限型19例,弥漫型9例。伴外伤史3例,骨破坏4例,恶变2例,半月板破裂1例,滑膜血管瘤1例。均行滑膜切除,早期操练,3例加放疗。28例均经病理证实。结果22例随访2～18年,13例功能良好;9例复发5例功能欠佳,2例截指(趾),2例死亡。放疗3例均复发。结论PVS临床病理均有肿瘤的特征,可恶变和转移,易复发,最佳治疗是彻底的滑膜切除而不是放疗。     

红花黄色素对血小板活化因子介导的中性粒细胞功能的影响

为了探讨中药红花中的红花黄色素 (SafflorYellow)对血小板活化因子 (Platelet -Activating -Factor,PAF)介导的人中性粒细胞功能的影响。通过细胞学的方法 ,在细胞松弛素B存在下 ,人的中性粒细胞 (PMN)悬液先与不同浓度的红花黄色素温育 ,然后以PAF刺激 ,以PMN悬液为空白对照。结果显示 :红花黄色素对PAF介导的人中性粒细胞聚集、粘附及超氧化物产生有明显的抑制作用 ,并且在 2～ 2 0g L浓度范围内 ,其抑制作用与药物浓度有一定的剂量依赖关系 ,推测红花黄色素对抗PAF的作用 ,可能是其活血化瘀的重要机制之一     

手术切除和多功能电离子机治疗面颈部色素痣对比观察

面颈部色素痣不仅有碍美观 ,而且部分斑痣尚有恶变倾向[1] ,因此近几年要求祛斑的患者较多。手术切除和多功能电离子机是治疗斑痣的常用方法。我们对 1996年 11月至 1998年 12月期间用这两种方法治疗的 150例面颈部色素痣的患者共 190个皮疹的临床治疗进行了观察比较 ,现总结如下 :1　资料与方法1.1　临床资料150例中男性 59例 ,女性 91例。年龄 7～ 62岁 ,平均 35岁。色素痣均选黄豆至蚕豆大小作为施治对象 ,共治色素痣 190个。分布在面部 12 6个 ,颈部 64个。将其分为手术组及电离子治疗组 ,手术组80例 ,色素痣 10 1个 ;电离子组 70例 ,色…