苜蓿叶蛋白及其酶解物抗氧化活性的比较

通过提取、酶解和超滤从苜蓿叶蛋白中分离得到相对分子质量不同的可溶性苜蓿叶蛋白及其酶解粗肽和精制肽,研究了其氨基酸组成和相对分子质量分布,并对其抗氧化活性进行了比较.结果表明:虽然从苜蓿叶分离的各种蛋白质其氨基酸组成相近,但相对分子质量大的可溶性苜蓿叶蛋白SALPr未发现抗氧化活性,而酶解后的粗肽CALPe以及超滤后的精制肽PALPe均表现出较强的抗氧化活性,并且存在剂量效应关系,而且PALPe抗氧化活性强于CALPe.这可能是由于PALPe中疏水性氨基酸和小分子肽的含量均高于CALPe.     

应用蛋白质组学技术在人肾癌组织中发现2个特异性生物标志物

目的探讨人肾肿瘤组织和正常肾组织之间蛋白质的差异表达，寻找特异性生物标记物。方法应用蛋白质组学（SELDI）技术，检测12例人肾肿瘤和正常肾组织蛋白质谱图表达。结果与正常肾组织比较，在IMAC3蛋白质芯片上人肾肿瘤组织谱图中显示2个特异性蛋白质峰明显增高，相对分子质量依次为5750.4和5861.7，其特异性和敏感性高。结论人肾肿瘤组织中特异性蛋白质的发现，对进一步研究肿瘤发生机理及其临床特异性生物标志物的检测等具有重要意义。     

骨髓基质细胞条件培养液中神经活性物质的提取与纯化

目的分离纯化骨髓基质细胞(bone marrow strolnal cells，BMSCs)条件培养液以获得某些神经活性物质。方法分离培养小鼠骨髓基质细胞并收集其培养液，超滤浓缩后采用Sephadex G-100层析，高效液相色谱分析(HPLC)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳(SDS-PAGE)等技术分离其培养液中的蛋白组分并利用细胞培养技术验证其神经活性作用。结果骨髓基质细胞培养液经Sephadex G-100层析及HPLC分析，证实Ⅲ峰中的A峰和B峰对神经细胞生长有明显的促进作用，其相对分子质量分别为18000和14000。结论骨髓基质细胞条件培养液中相对分子质量为18000和14000两组分对神经元有营养活性。     

鼠抗人纤维蛋白单链抗体-低相对分子质量单链尿激酶融合基因真核分泌表达载体的构建

目的 构建鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低相对单链尿激酶融合基因真核分泌表达载体。方法 应用重组ＤＮＡ技 术,将人工合成的尿激酶原信号肽基因与鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低相对分子质量单链尿激酶融合基因连接,并保 证在同一阅读框架,然后分别插科到pcＤＮＡ３和ＰＭＪＫ３两种真核表达载体中。结果构建成可以在真核细胞中分泌表 达鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低相对分子质量单链尿激酶融合蛋白的重组质粒pcＤＮＡ３－Ｄ１和ｐＭＪＫ３－Ｄ１。结论为建 立稳定分泌表达鼠抗人纤维蛋白单链抗体－低相对分子质量单链尿激酶融合蛋白的细胞工程株奠定了基础。     

PICK1基因敲除小鼠的繁育及子代基因型的鉴定

目的 探讨蛋白激酶Cα相互作用蛋白(PICK1)基因敲除小鼠的优化繁育方法及 PICK1 基因敲除小鼠子代鼠的鉴定方法,为进一步研究 PICK1蛋白的功能奠定基础.方法 用 6 种不同的交配方式观察子代鼠的各表型比率及雌、雄性PICK1 基因突变纯合子小鼠的繁殖能力;从子鼠鼠尾中提取基因组 DNA,用 PCR 方法扩增 PICK1 基因片段,电泳后观察结果.结果 PICK1 / 、PICK1 /-、PICK1-/-各表型小鼠互交繁殖结果基本符合孟德尔遗传规律,且雌性PICK1 基因突变纯合子小鼠有繁殖能力,雄性PICK1 基因突变纯合子小鼠无繁殖能力.琼脂糖凝胶电泳显示PCR 产物分子量大小为 400 bp 和 200 bp,与目的 基因片段相对分子质量大小一致.结论 雌、雄性PICK1 基因突变杂合子小鼠交配是繁育PICK1 基因突变纯合子子鼠的较好方法;实验所用PCR方法能够精确鉴定PICK1 基因突变纯合子子鼠,为PICK1 蛋白功能的实验研究提供了较理想的动物模型.     

肠出血性大肠杆菌O157:H7志贺样毒素2B亚基的表达

目的:克隆肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7 AH07株志贺样毒素2B(Stx2B)亚单位基因,应用原核表达系统制备重组蛋白质.方法:根据靶基因序列设计特异性寡核苷酸引物,采用PCR法克隆EHEC AH07株Stx28的编码基因stx2b,靶基因经TA克隆后连接到表达载体pET-28a构建重组质粒,阳性重组子转化表达宿主菌E. coli BL-21 (DE3)感受态细胞,IPTG诱导目的蛋白表达,应用SDS-PAGE和Western-blot (WB)分析重组蛋白生物活性.结果:PCR扩增stx2b基因约220bp,成功构建重组质粒pET28a-stx2b,并在原核细胞中得到高效表达,目的蛋白质的相对分子质量约为7500,约占蛋白质总量的40%;WB显示目的蛋白质可与特异性抗体发生特异性反应.结论:成功克隆EHEC O157:H7 stx2b基因,在原核系统获得目的蛋白质的高效表达,为O157:H7感染机制及疾病诊断和疫苗研究奠定基础.     

Tricine-SDS-PAGE分析抑肽酶相对分子质量的方法初探

目的:分析小分子多肽抑肽酶的相对分子质量。方法:用Tricine-SDS-PAGE法,采用三羟甲基氨基甘氨酸(Tricine)代替甘氨酸作为尾随离子,用来检测小分子多肽的相对分子质量。结果:根据标准曲线测算抑肽酶分子量分别为6 487.5 Da(1μg)、6 677.6 Da(2μg),接近真实值。结论:本方法能够消除由于多肽分子与标准蛋白质空间构象的不同带来的误差,并克服了普通SDS-PAGE小分子蛋白条带带型弥散的缺点。     

投稿中常见不规范名词

1．名词欠规范（箭头后为正确名词）：一时性脑缺血→一过性脑缺血,血沉→红细胞沉降率,革兰氏阳性细菌→革兰阳性细菌,分子量→相对分子质量,细胞浆→细胞质,机理→机制,光密度→吸光度,细胞系→细胞株,副作用→不良反应,冠脉→冠状动脉,高血压病→原发性高血压,X光片→X线片,哈-格氏早衰综合征→哈-格早衰缩合征,梗塞→梗死,围产期→围生期,雷诺氏现象→雷诺现象,甘油三酯→三酰甘油,体重→体质量,食道炎→食管炎,腰麻→蛛网膜下腔阻滞麻醉,     

超支化聚酯用于负性光致抗蚀剂

采用偏苯三酸酐(TMA),甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)两种单体经一步法反应制备了一系列超支化聚酯负性光致抗蚀剂.采用GPC、FTIR对超支化聚酯的结构进行了初步表征,探讨了GMA用量、投料方式和反应温度对重均分子质量及其分子量分布的影响.结果表明,增加GMA用量和选用滴加原料的方式将使树脂重均分子量增大、分子量分布变宽;反应温度为90℃时,合适.测得优化工艺所制备的光刻胶的T0(初始曝光时间)为10 s,Y gel(反差值)为2.8.     

高效凝胶过滤色谱法测定沙漠嘎多糖的重均相对分子质量

目的:建立以高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)测定沙漠嘎多糖重均相对分子质量的方法。方法:通过将沙漠嘎多糖分离、柱层析纯化,获得沙漠嘎多糖S1,采用HPGFC法测定重均相对分子质量。色谱条件:AsahipakGS色谱柱GS-3207E(250mm×7.5mmID,9μm)与GS-6207G(500mm×7.5mmID,9μm)串联使用;流动相:0.003mol·L^-1乙酸钠;流速:1mL·min^-1;柱温:35℃;示差折光检测器(RID)。结果:沙漠嘎多糖重均相对分子质量的回归方程为:lg(Mw)=10.167-0.287t_R(r=-0.976),线性范围为:10000～500000Da,测得沙漠嘎多糖S1重均相对分子质量约为8.5×10⁴Da。结论:为沙漠嘎多糖重均相对分子质量测定提供了简便、实用的分析方法。