胎儿胰岛中干细胞的分离与鉴定

目的:已证实胰腺来源的干细胞或祖细胞在体内外均能分化为胰岛素分泌细胞,但成人胰腺来源的干细胞增殖潜能较差.实验旨在分离并鉴定胎儿胰岛样细胞团中的干细胞,为糖尿病细胞移植治疗寻找可用的种子细胞.方法:实验于2006-10/2007-07在解放军军事医学科学院输血研究所干细胞与再生医学研究室完成.①对象:所用胰腺标本取自流产胎儿,胎龄14～20周,由解放军总医院妇产科提供,胎儿组织的使用得到孕妇本人的知情同意,实验经医院医学伦理委员会批准.②实验方法:无菌条件下取出胎儿胰腺,37 ℃下用0.5 g/L的V型胶原酶进行消化,分离得到胎儿胰岛样细胞团,悬浮培养,加入含体积分数为0.1胎牛血清、1 mmol/L丙酮酸钠、1 mmol/L谷氨酰胺、71.5 μmol/L β-巯基乙醇、100 U/mL青霉素和100 mg/L链霉素的RPMI1640培养基,每日转皿除去贴壁细胞,72 h后挑选出悬浮生长的胰岛样细胞团予以贴壁培养,待长成上皮样单层细胞克隆时传代.③实验评估:将悬浮培养的胰岛样细胞团行双硫腙染色.另将少部分胰岛样细胞团及第4代细胞种植于24,96孔板中,采用免疫荧光染色检测细胞表面分子标志物增殖细胞核抗原、胰十二指肠同源盒基因1、Nestin、角蛋白19、波形蛋白、胰岛素、胰高血糖素、CD29的表达情况.MTT法分析第6代细胞的生长曲线.结果:①悬浮及贴壁培养的胰岛形态:刚分离出的胰岛呈簇状,边缘不规整,细胞排列较疏松.贴壁后胰岛样细胞团由簇状逐渐展开形成上皮样单层细胞克隆.传代后细胞形态发生改变,呈梭形或分支样,增殖较快.②悬浮培养的胰岛双硫腙染色检测:分离得到的胎儿胰岛样细胞团双硫腙染色呈阳性表达.③细胞表面标志免疫荧光染色检测:贴壁的第1代细胞大部分呈增殖细胞核抗原、胰十二指肠同源盒基因1、Nestin、波形蛋白阳性,极少数细胞呈胰岛素、胰高血糖素阳性,而角蛋白19为阴性.传代后仍呈增殖细胞核抗原、胰十二指肠同源盒基因1、Nestin、波形蛋白阳性,角蛋白19弱阳性,而胰岛素、胰高血糖素为阴性,所有细胞均不表达CD29.④细胞生长曲线:传代第3天细胞进入对数生长期,第6天进入平台期,细胞生长曲线呈"S"形.结论:由胎儿胰岛成功分离并培养出具有自我更新和良好增殖能力的干细胞,稳定表达多种胰腺干细胞特征性标志,而不表达胰岛细胞标志物,提示该细胞可作为候选的胰岛干细胞用于糖尿病细胞移植治疗.     

不同生长期杠柳各部位活性成分的累积变化

目的 考察一年内不同生长期杠柳各部位（根皮、根木质部、茎皮、茎木质部和叶）中主要活性成分杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛的量,研究其动态累积变化规律,确定其最佳采收期。方法 每月平行采样2次,超声提取法制备样品,RP-HPLC法测定杠柳毒苷和4-甲氧基水杨醛的量。结果 杠柳各部位成分累积动态变化曲线呈“双峰”型,其中茎皮中杠柳毒苷的量最高可达1.400%;根皮中4-甲氧基水杨醛累积量最高达0.781%,而其他部位均低于0.2%。结论 整个生长周期杠柳各部位中两种成分的累积变化呈一定的规律性,其变化可能与不同生长阶段及相应的生理代谢活动等密切相关;茎皮和根木质部均可作为提取杠柳毒苷的新药用部位,最佳采收期为生长期。     

不同生长期紫花苜蓿中苜蓿素的测定

目的 测定紫花苜蓿在不同生长期苜蓿素的量,为合理利用资源提供实验依据。方法 采用HPLC法,色谱柱为Zorbax SB C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-水(65∶35)为流动相,体积流量为0.8 mL/min,检测波长为349 nm,进样量为5 μL。结果 在紫花苜蓿不同生长期苜蓿素的量不同,8月份量最高。结论 苜蓿在不同生长期苜蓿素的量不同,如果主要利用紫花苜蓿中的苜蓿素时应在8月中旬采收。     

腹腔镜胆囊切除术致胆管损伤的诊断与处理

自1882年Langenbuch施行首例开放法胆囊切除术以来,胆囊切除术成为治疗胆囊疾病的主要术式而被外科医生长期使用。到了20世纪90年代,腹腔镜胆囊切除术（LC）得到普遍开展,以其＂微创＂、＂损伤小,恢复快＂等特点而迅速被临床外科医生所接受。     

栽培黄芩中黄酮类成分的动态积累研究

目的 对陕西商洛地区栽培黄芩根部黄酮类成分的积累进行了动态分析,从质量和产量兼顾的观点出发确定该药材的最佳采收期.方法 采用反相高效液相色谱法,测定了不同生长年限和同一生长年限不同采收时间栽培黄芩根部3种主要黄酮类成分(黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素)的量.结果 不同生长年限及采收时期黄芩样品的产量及其有效成分的量均在第二年10月下旬达到最高.结论 陕西商洛栽培黄芩的最佳采收时期应为栽培后第二年10月和11月.     

不同生长期当归挥发油中Z-藁本内酯和正丁烯基苯酞含量的动态变化研究

目的:研究不同生长期当归根部生物量及有效成分的动态变化规律。方法:采收不同生长期当归27批,并测定其根部生物量;采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)测定当归挥发油中Z-藁本内酯与正丁烯基苯酞的含量。结果:GC-MS法测得27批不同生长期当归挥发油中正丁烯基苯酞、Z-藁本内酯的平均含量分别占总油的1%和40%以上,其含量在不同生长期中变化较大。结论:当归中Z-藁本内酯与正丁烯基苯酞含量与其生长周期密切相关。     

远志货源见底后市看涨

2005年远志价位上升60％-100％，远志肉由（千克价，下同）20元升为33-35元，小筒由年初的30-35元升为55-60元，中筒由40-45元升为80-90元，大筒由60-70元升为120-150元。通过一年的消化，现在库存日益减少，在地并起挖面积几乎为零。由于远志需要3-4年的生长期，2005年种植的只有到2007底年才能起挖，而现在远志肉库存空虚，涨价实属必然。     

细菌在血培养仪上生长曲线的特点分析

目的 观察血培养生长曲线，协助判断细菌类型。方法 将血培养阳性标本252例，按照细菌的生长曲线的三个阶段——迟缓期、生长期、稳定期进行分析^[1]。结果 肠杆菌科的迟缓期极短，生长期生长迅速，甚至见不到稳定期。葡萄球菌的生长期曲线有一定的倾斜(K值在l左右)。酵母菌的曲线较圆滑，生长期出现较晚。链球菌曲线很象葡萄球菌，但生长期较陡。非发酵菌生长期(△CO2)所对应的纵轴较短，有时还出现两段生长曲线。厌氧菌总有一个具有波峰波谷类似正弦波。结论 观察生长曲线可能推断细菌类型。     

肺癌可在人体内潜伏20余年

<正>美国《科学》杂志上的一项研究结果显示,肺癌在人体内的潜伏期可长达20余年,然后突然发展成为难以治疗的恶性肿瘤。该项研究分析了7例肺癌患者,包括吸烟者、戒烟者和从不吸烟的人,结果发现,初始遗传错误引发的肺部肿瘤细胞就像种子一样能潜伏人体多年,悄悄"生长"而无法检测,然后在条件成熟时被新的遗传错误"触发",公开"现身"并快速长成恶性肿瘤。在肿瘤快速生长期,会有多种形式的遗传错误出现在肿瘤的各个区域,导致每个区域按不同的路