结核分枝杆菌菌悬液光密度值与菌落计数的关联性

目的建立一种基于光密度值计算结核分枝杆菌菌落数的可靠方法。方法利用低频超声和玻璃珠研磨两种方法制备H37Ra菌悬液,菌悬液2倍梯度稀释后,分别测定各个稀释度菌悬液在600 nm处的光密度值（OD600值）,并分析OD600值与稀释倍数曲线,确定最佳的菌悬液制备方法,OD600线性范围,以及OD600值与CFU关联曲线。结果OD600值为0.1～0.6,线性范围内OD600值与稀释倍数线性回归分析结果显示,玻璃珠研磨法和低频超声法相关系数（R2）分别为0.98、1.00,均呈良好的相关性,且低频超声法比玻璃珠研磨法的相关性好,其菌液分散更均匀。OD600值与CFU值线性回归分析结果显示,玻璃珠研磨法和低频超声法回归方程分别是：CFU=2.35×107×OD600+4.42×105、CFU=3.26×107×OD600+6.89×105。结论低频超声法是一种较好的结核分枝杆菌菌悬液制备方法,结合OD600值测定,可成为一种可靠、快速的结核分枝杆菌定量方法。     

简便快速的PCR产物回收方法

目的分析比较几种PCR产物回收方法的回收效果.方法针对PCR DNA的回收效果及回收特点,采用内皮素(Endothelin)基因PCR反应产物,分别利用本室建立的二种新方法--速冻-快速离心法、凝胶浸泡法和传统方法--玻璃珠试剂盒回收法对PCR产物DNA进行回收,用琼脂糖凝胶电泳鉴定3种方法回收PCR产物的效果.结果发现两种新方法回收DNA带的亮度强,与传统方法相比,差异无显著性(P＞0.10).结论说明速冻-快速离心法与凝胶浸泡法不仅具有玻璃珠试剂盒回收PCR 产物的效果,而且经济、方便、可靠,是两种可行的PCR产物回收方法.     

玻璃珠法提取基因组DNA

基因组DNA的分析在科研、临床以及法医界等都得到广泛的应用,以DNA样本为研究对象的PCR、Southern Blot、RFLP等技术手段被广泛采用。因此建立一种经济、快捷高质量的DNA提取方法是非常必要的。我室曾报告过全血[1]、小块组织[2]以及口腔黏膜脱落细胞[3]DNA提取方法。本文利用玻璃珠对细胞的机械破碎作用,建立一种简单、快捷从组织中制备高质量DNA的方法并与目前常用的蛋白酶K组织DNA提取方法进行了比较。1材料与方法1.1材料样品为胃镜下剪取的病人胃黏膜(病例来自天津医科大学总医院,30例,男15例,女15例,均为慢性胃炎病人),玻…     

两种微柱法直接抗人球测定结果比较

目的：比较微柱玻璃珠法和微柱凝胶法直接抗人球蛋白（DAT）测定结果及在新生儿溶血病（HDN）中的临床意义。方法：采用微柱玻璃珠法和微柱凝胶法对392例临床疑为HDN的高胆红素血症新生儿标本进行DAT检测,并比较分析检测结果。结果：392例标本用微柱玻璃珠法DAT检测阳性为168例,阳性率为42．95％（168／392）,微柱凝胶法DAT检测阳性为91例,阳性率为23．2％（91／392）,两种方法比较差异有统计学意义（X2=75．1,P〈O．01九阳性样本中,DAT结果在0,5＋-2＋水平上,微柱玻璃珠法检测阳性的140例中,微柱凝胶法检测阳性的只有63例;DAT结果（3＋-4＋）水平上,微柱玻璃珠法与微柱凝胶法检测的阳性样本及阳性水平无差异。结论：微柱玻璃珠法与微柱凝胶法相比较,敏感度更高,在HDN的诊断和治疗中值得推广。     

双向电泳法比较两种蛋白质组样品制备方法

目的：比较两种破碎方法提取的蛋白质样品在双向电泳（2-DE）中的分离效果。方法用超声破碎和玻璃珠振荡破碎方法分别制备革兰阴性菌、革兰阳性菌、动物组织的蛋白抽提样品,通过2-DE比较两种制样方法的实际效果。结果获得了革兰阴性菌、革兰阳性菌、动物组织在两种制样条件下的2-DE图。结论通过对比不同样品的电泳结果发现,玻璃珠振荡破碎法制样背景更低,更有利于后续的图像分析。     

拥抱时尚真天空

秋季又到了,添衣的时候也来了,让我们看看时尚圈里的先锋焦点都有些什么。把准时尚的脉搏,才能一步不拉地踩准节拍!不是吗?