汉滩病毒G1蛋白胞质区ITAM样基序与Syk细胞内相互作用

目的：研究汉滩病毒（HTNV）G1蛋白胞质区ITAM样基序与Syk的细胞内相互作用。方法：构建用于研究Syk和G1ITAM样基序之间相互作用的哺乳动物细胞双杂交系统，验证G1ITAM样基序与Syk之间是否存在细胞内相互作用。结果：哺乳动物细胞双杂交分析证实G1ITAM样基序在哺乳动物细胞内可以与Syk相互作用；而突变体分析表明，这种相互作用依赖于该基序中两个高度保守的酪氨酸残基的存在。结论：HTNVG1蛋白胞质区高度保守ITAM样基序在体外和哺乳动物细胞内可以与Syk相互作用，为进一步探讨G1蛋白ITAM样基序在HFRS免疫信号传递中的作用及其与血管内皮损伤的关系奠定了基础。     

CⅡTA M1-RNA对MHCⅡ类分子表达的抑制作用

目的探讨MHCⅡ类分子转录激活因子（CⅡTA）的M1-RNA对细胞表面MHCⅡ类分子表达的抑制。方法M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性单位，设计并克隆针对CⅡTA第452、629位点的M1-RNA（分别为M1-452-GS、M1-629-GS）及其相应的CⅡTA靶基因，分别插入pUC19、pGEM-7zf（＋）载体，进行细胞外切割活性筛选。将细胞外切割作甩明显的M1-629-GS亚克隆入psNAV载体（psNAV-M1-629-GS，pA629）并稳定转染ECV304细胞株，流式细胞术检测经典的MHCⅡ（HLA-DR、-DP、-DQ）类抗原表达，RT-PCR检测CⅡTA的mRNA水平。结果pA629阳性ECV304细胞株与对照组比较，HLA-DR、-DP抗原表达分别降低了89．21％及92．31％；同时CⅡTA的mRNA含量降低（P〈0．05）。结论CⅡTA的M1-RNA（M1-629-GS）降低了自身mRNA含量，从而阻止其调控的MHCⅡ类分子的表达。     

FCM算法在脑肿瘤MRI图像分割中的应用

聚类算法已广泛用于图像分割，根据模糊C－均值聚类算法（FCM）的磁共振颅脑图像的特点，我们利用FCM算法对磁共颅脑图像进行了分割。结果表明，聚类算法在脑肿瘤的MRI图像分割中能够得到比较理想的结果，优于边缘检测、域值分割等方法。     

胰高血糖素衍生物在大肠杆菌的克隆表达和纯化

 目的 通过基因工程途径获得胰高血糖素衍生物。 方法 根据胰高血糖素基因及凝血酶酶切位点序列，分段合成引物行 PCR 扩增，以 PCR 扩增得到的胰高血糖素-甘氨酸基因序列和 pET-30a 质粒转化 E.coli DH5α，获得重组质粒 pET-G。将重组质粒 pET-G 转化至 E.coli BL21(DE3)，重组菌株命名为 E.coli BL21[pET-G]。以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达，对表达产物进行SDS-Tricine- PAGE[十二烷基硫酸钠-三（羟甲基）甲基甘氨酸-聚丙烯酰胺凝胶电泳]分析和蛋白质印迹分析。对表达产物行Ni2+-NTA亲和层析纯化、凝血酶酶切和高效液相色谱（HPLC）纯化后，行 SDS-Tricine-PAGE分析和飞行质谱分析，并以 ELISA 方法检测其免疫活性。 结果 PCR 扩增获得的条带与预期的DNA表达片段大小一致，重组质粒 pET-G 测序结果与预期完全一致。SDS- Tricine-PAGE 和蛋白质印迹分析显示 E.coli BL21（DE3）的表达产物相对分子质量与预期相符。经亲和层析纯化、凝血酶酶切和 HPLC 纯化后得到了完整的重组胰高血糖素-甘氨酸衍生物，SDS-Tricine-PAGE 分析显示其相对分子质量约为 3500，飞行质谱分析相对分子质量为 3531，二者基本一致。ELISA 检测表明重组胰高血糖素-甘氨酸衍生物具有胰高血糖素免疫活性。 结论 采用基因工程技术在大肠杆菌中成功表达了胰高血糖素-甘氨酸衍生物，为通过体外酰胺化途径研制酰胺化胰高血糖素奠定了基础。     

标记免疫分析技术在TSH检测中的应用及其进展

促甲状腺激素(TSH)是垂体前叶分泌的一种糖蛋白激素, 含α、β两个亚基单位, 由211个氨基酸组成, 分子量为25000-28000, 参与垂体甲状腺轴反馈调节机制, 因此血清TSH的检测成为评价甲状腺功能的临床首选指标之一[1].随着酶免、化学发光免疫分析和时间分辨荧光免疫技术等迅猛发展, TSH的测定已越来越趋向超灵敏和自动化快速分析, 传统的RIA和IRMA由于受灵敏度、同位素污染和难以开展自动化分析等因素的制约, 已不能满足临床快速准确检测的要求[2].     

绵羊肥大细胞中类胰蛋白酶的证实

用甲苯胺蓝和阿尔辛蓝常规组织化学方法及特异性酶底物鉴定人肥大细胞类胰蛋白酶的酶组织化学技术，采用小鼠抗人肥大细胞类胰蛋白酶单克隆抗体，（ＡＡ１、ＡＡ３和ＡＡ５）通过间接免疫过的经物酶技术对绵羊肥大细胞的组织化学特性进行研究，酶组织化学技术及免疫组织化学技术均首次证实了绵羊肥大细胞颗粒中含有类胰蛋白酶，且该酶可作为绵羊肥大细胞的特异性标志，对于绵羊肥大细胞的常规组织化学染色，Ｃａｒｎｏｙ液及中性缓门     

一株携带三种β内酰胺酶基因铜绿假单胞菌的发现

近年来铜绿假单胞菌（Pa）耐药率不断增加，已经出现对三代头孢菌素和亚胺培南耐受的Pa菌，给临床治疗带来极大困难。我们从一例脑外伤合并严重肺部感染患者的气管分泌物中分离出1株多重耐药忍菌，并对其进行了12种β内酰胺类耐药相关基因的检测与分析。     

棘球蚴内容物导致肺损害的研究

目的 :观察棘球蚴囊内容物攻击兔所至肺功能和形态的损害。建立囊型包虫肺栓塞的动物模型。方法 :取囊型包虫内容物 ,分离出囊砂 ,与囊液配成 5 %的悬浊液。 2 1只家兔 ,分 3组 :Ⅰ :生理盐水组 ,Ⅱ :澄清囊液组 ,Ⅲ :囊砂悬浊液组。每只家兔都置入股动脉导管及股静脉导管。依照上述分组按 2mL/kg体重分别自静脉导管注射生理盐水、澄清囊液或含囊砂的悬浊液。于注射后 ( 5、30、6 0min)动态监测MAP、血气指标及血清血管活性物质(ET - 1、TXB2 、6 -keto -PGF1α)水平的变化。指标测定后 ,行肺部ECT检查。最后取出动物肺脏行光镜病检。结果 :Ⅲ组和Ⅱ组在注射后均出现MAP、血气指标的明显降低 (P <0 .0 5 )和血清TXB2 、6 -keto -PGF1α的升高 (P <0 .0 5 ) ,尤以Ⅲ组最明显 (P <0 .0 5 )。各组动物血清ET - 1水平在注射前后无明显变化 (P >0 .0 1)。ECT显示Ⅲ组动物肺部放射性缺损 ,Ⅱ组动物肺部放射性减弱。Ⅲ组肺脏病检见头节广泛栓塞于肺小动脉、微小动脉中 ,肺脏呈“急性呼吸窘迫综合症样”改变。Ⅱ组肺组织出现淤血、水肿及炎细胞浸润。结论 :Ⅲ组动物基本能够模拟出囊型包虫病肺栓塞的临床表现。囊液中有形成分在肺损害中起着重要的作用。TXB2 、6 -keto -PGF1α参与了肺损伤病理过程。     

多重耐药鲍曼不动杆菌相关耐药基因检测分析

目的为了解多重耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶（BLA）基因、氨基糖苷类修饰酶（AMFs）基因、消毒剂与磺胺类耐药基因（qacE△1-sul1）和1类整合子酶基因（intl1）存在情况。方法对2005年1—6月份临床分离的31株多重耐药菌株（耐哌拉西林、第三代头孢菌素、环丙沙星和阿米卡星），应用聚合酶链反应及序列分析方法分析其BLA、AMEs、qacE△1．sull和intl1基因类型。结果31株多重耐药鲍曼不动杆菌对多黏菌素B敏感，有3株（9．7％）对受试的其他18种抗菌药物均耐药。19株（61．3％）检出了β-内酰胺酶基因，其中TEM、PER、DHA阳性率分别为61．3％、19．4％、3．2％，未检出SHV、OXA-23、OXA-24、GES、IMP和VIM等基因。25株（80．6％）检出氨基糖苷类修饰酶基因，其中aac（3）-I、aac（6’）-I、ant（3”）-I、ant（2”）-I、aac（3）-Ⅱ、aac（6’）-Ⅱ阳性率分别为67．7％、45．2％、29．0％、22．6％、9．7％、3．2％。qacE△A1-sul1、intl1阳性率分别为80．6％、58．1％。分离株常见的基因组合是TEM＋qacE△1-sul1＋intl1和TEM＋PER＋qacE△1-sull＋intl1，分别占25．8％和19．4％。分离株AMEs的常见的基因组合是aac（3）-I＋aac（6’）-I和nnc（3）-I＋aac（6’）-I＋ant（2”）-I，分别占19．4％和12．9％。结论临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌TEM、nnc（3）-I、nnc（6’）-I、ant（3”）-I、ant（2”）-I、qacE△1-sul1和intl1基因携带率高。     

纤维/颗粒增强聚乳酸骨折内固定复合材料

现将骨折内固定材料的发展史，传统骨折内固定材料的不足之处，以及开发可吸收骨折内固定材料的意义作一综述。介绍了聚乳酸作为可吸收内固定材料的优异性能，及其复合材料的特点，并比较了以聚乳酸为基体的各种内固定复合材料的成型工艺和机械力学强度。