深黄被孢霉△^6-脂肪酸脱氢酶基因的原核表达和转基因植株再生研究

目的通过农杆菌介导法将来源于深黄被孢霉的△^6-脂肪酸脱氢酶（IND）基因导入到东北大豆绥农10和吉林47中,最终获得转基因植株。方法利用子叶节外植体诱导出丛生芽和再生植株,利用卡那霉素的抗性筛选培养基连续筛选以及PCR方法、DNA分子杂交分析和GC分析检测转基因植株中的△^6-脂肪酸脱氢酶基因表达状况。结果经过含50mg／L卡那霉素的抗性筛选培养基连续筛选,获得了一批转基因植株。经PCR检测和DNA分子杂交分析,初步证明△^6-脂肪酸脱氢酶基因已导入并整合到大豆基因组中。将转基因大豆T1代和T2代种子进行脂肪酸GC分析,结果在大豆种子中检测到△^6-脂肪酸脱氢酶基因的产物GLA,证明该基因在大豆中得到了表达。     

北柴胡移植试管植株与种子植株植物学性状分析

目的 通过对移植试管植株与种子植株植物学性状的对比分析,为优质北柴胡快速繁育方法的建立和推广提供科学依据。方法 选取有效药用成分高、遗传稳定性好的北柴胡栽培类型进行快速繁殖,比较移植试管植株与种子植株的植物学性状。结果 北柴胡移植试管植株在分蘖数、分枝数、有效花序数以及根质量等方面明显优于种子植株。结论 通过快速繁殖和试管苗的规模化种植,在保持北柴胡优良性状的同时,可以收获多于种子植株的根器官和种子。     

栝楼组织培养和植株再生研究

采用植物组织培养技术进行栝楼试管苗快速繁殖,以药用植物栝楼的腋芽为外植体.在改良的MS培养基上进行丛生芽诱导、继代扩增和无根试管苗生根,可获得大量再生植株。     

甘草耐盐性愈伤组织的诱导及植株再生研究

目的通过对耐盐性甘草愈伤组织再生植株研究,促进在盐碱滩人工栽培甘草技术的发展。方法诱导乌拉尔甘草G ly cy rrh iza ura lensis无菌苗子叶块和胚轴段在含盐培养基上脱分化均成功。逐步提高盐质量浓度诱导愈伤组织扩增,继之诱生不定芽,芽经扶壮后诱根,得到大量试管苗。结果子叶块和胚轴段在M S BA1.5 m g/L 2.4-D 1.2 m g/L N aC l 100 m g/L中脱分化效果好,愈伤多为淡黄色,稍透明。N aC l质量浓度增至250m g/L后愈伤组织长势很快下降,色暗,有些死亡。愈伤组织经无盐培养继代两轮后,转入M S BA 0.5 m g/L KT1.0 m g/L NAA 1.0 m g/L N aC l 200 m g/L上分化出大量不定芽,说明不定芽的耐盐性是遗传所致。降温(18~22℃)、自然光照、并添加适量的GA3有利于壮芽形成,在诱导生根的83个芽中的55个生根,其中1/2M S IAA1.0 m g/L NAA 1.0 m g/L N aC l 200 m g/L最适宜生根,生根率达66.26%。结论通过对耐盐性甘草愈伤组织的诱导可得到耐盐性甘草的再生植株。     

贯叶连翘组织培养及植株再生研究

在国内首次研究了贯叶连翘胚轴和子叶的培养方法,分别通过器官型和器官发生型途径获得了大量再生植株,部分可移栽成活,实验表明,在ＢＡ和２,４－Ｄ不同组合的ＭＳ培养基上,愈伤组织易于诱导,繁殖速度快,并且通过初步检测证明了愈伤组织中金丝桃素存在的可能性,再生植株产生极容易,繁殖系数高。     

半夏的组织培养和植株再生

采用单因素比较的方法,考察了半夏愈伤组织生长的影响因素,结果表明激水平、光照与否、氮素以及天然附加物均能直接影响基生长。此外,还就激素对半夏植株再生的影响做了研究,较低浓度的６－ＢＡ和ＮＡＡ对半夏的植株再生有利。     

根癌农杆菌介导深黄被孢霉△6-脂肪酸脱氢酶基因转化大豆及其转基因植株再生

采用农杆菌介导的大豆子叶节转化系统成功的将深黄被孢霉△^6-脂肪酸脱氢酶基因导入大豆。从发芽5～7d的大豆无菌苗切取子叶节外植体，经农杆菌浸染和共培养后，在含50mg/L卡那霉素的选择培养基上培养2～4周后，从子叶节处诱导出抗性不定芽。将不定芽转移到伸长培养基上，4～6周后长至2～3cm高的再生苗。再将再生苗切下转入生根培养基，2～6周生根。生根后的再生植株经逐步锻炼移入花盆中，部分移栽成活的T0植株能正常开花结荚。从T0植株上收获T1种子，按株系种植。T0和Tl代经PCR检测和DNA分子杂交分析，证明外源基因已导入并整合到大豆的基因组内并能遗传给后代。     

安徽药菊花瓣组织培养技术的研究

目的 :研究安徽药菊花瓣组织培养技术 ,为安徽药菊新品种选育建立最佳条件。方法 :取安徽药菊(滁菊、亳菊、贡菊 )幼蕾花瓣及开放花瓣为外植体 ,按不同方式接种到同种培养基上和按同种方式接种到不同培养基上进行培养 ,诱导其成为完整植株。结果与结论 :所有培养基均能诱导愈伤组织产生 ,但愈伤组织形成和再分化结果有明显差别。愈伤组织诱导花瓣正接优于反接 ,愈伤组织诱导培养基以MS +KT 2mg·L^-1+NAA 0 .2mg·L^-1为宜 ;愈伤分化均以培养基MS +KT 2mg·L^-1+NAA 0 .2mg·L^-1+AgNO3 5mg·L^-1为宜幼蕾花瓣诱导植株再生频率高于开放花瓣 ;所得植株在叶形、及株形等方面发生了变异。     

安徽药菊叶片愈伤组织诱导及植株再生技术的研究

目的 :研究安徽药菊叶片组织培养技术 ,为药菊新品种选育建立最佳培养条件。方法 :取药菊叶片为外植体 ,按不同接种方式接种到同种培养基上和按同种接种方式接种到不同培养基上进行培养 ,诱导其成为完整植株。结果与结论 :所用培养基均能诱导愈伤组织产生 ,但愈伤组织形成后的再分化结果却有明显差别。愈伤组织诱导叶片背接优于正接 ,培养基以MS +NAA 0.1mg·L^-1+6-BA 0.1～ 1.0mg·L^-1为宜 ;分化培养基以MS +6 BA 2.0mg·L^-1+NAA 0.5mg·L^-1较适宜 ;所得再生植株在叶形等方面发生了变异。     

四倍体菘蓝转抗虫基因研究Ⅰ.根癌农杆菌介导的转基因菘蓝

目的：将外源半夏凝集素基因（PTA）转入四倍体菘蓝以获得鳞翅目昆虫抗性。方法：构建了以CaMV 35S为启动子，新霉素磷酸转移酶（Npt-Ⅱ）为选择标记，带有半夏凝集素基因PTA的pCAMB I A2200植物双元表达载体，应用根癌农杆菌EHA 105遗传转化四倍体菘蓝。结果：菘 外植体植株再生率达到95％以上，转化率有10％。结论：建立了以6－BA和NAA为主要激素组合的四倍体菘蓝离体分化再生系统和农杆菌介导的转化系统。