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目的;克隆TNF相关的诱导凋亡配体胞膜外段基因(the extracellular region of the human TRAIL cDNA,TPAILex),构建表达载体并在大肠杆菌DH5α中高效表达有生物学活性的TRAIL蛋白胞膜外段。方法:抗CD3McAb刺激正常人外周血淋巴细胞,用RT-PCR、巢式-PCR方法从活化的淋巴细胞中获得人TRAIL基因及其胞膜外段cDNA,并克隆到pGEM-T Easy载体中,DNA测序鉴定,将TRAIL的胞膜外段基因插入表达载体pGEX-2T,构建重组表达质粒pGEX/TRAILex,用IPTG诱导表达TRAIL蛋白的胞膜外段,GST-Agarose 4B层析柱纯化GST-TRAILex融合蛋白,Western-blot鉴定纯化产物。结果:抗CD3 McAb能诱导正常人外周血核细胞TRAIL的高表达,成功地克隆了TRAIL胞膜外段基因,构建了重组表达载体pGEX/TRAILex,IPTG诱导后得到高效表达的TRAIL蛋白胞膜外段,经12%SDS-PAGE分析,可观察到一分子量和理论值相符(约54kD)的诱导表达。Kodak软件分析表达GST-TRAIL胞膜外段融合蛋白的表达量占菌体蛋白总量的28%,进一步分析证实TRAIL蛋白的胞膜外段主要以可溶性的形式表达,用GST-Agarose 4B层析柱纯化超声破菌后的上清,每升细菌培养液可得到9.8mg纯度的95%以上的GST-Tex。Western-blot结果证实54kD的表达带可与鼠抗TRAIL McAb起特异性反应。结论:成功地克隆了人TRAIL基因,并应用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达人TRAIL蛋白的胞膜外段,为进一步研究TRAIL的功能及其在肿瘤生物治疗中的应用奠定了基础。 相似文献
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123.
沈莉 《中华现代医学与临床》2007,6(2):83
术后尿潴留是术后常见的护理问题。一般临床以应用药物:如新斯的明;或采取诱导排尿的方法来帮助患者自行排尿。前者于临床应用中收效尚可,但仍有一定比例的患者对药物敏感性不高,收不到疗效:后者在临床应用中更是收效甚微。在此种情况下,常予以重新留置导尿,从而增加了患者的痛苦。为了降低导尿率,我科对因拔除导尿管后出现尿潴留的患者采用中医针刺腧穴的方法,以提高患者术后的舒适度,收到效果明显。现将结果报告如下: 相似文献
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125.
有些记忆是挥之不去的,特别是少年时代的那种难以言说的伤痛。不管日后我们的境遇如何,最初的伤害却都如影随形,无法泯灭。[编者按] 相似文献
126.
我今年66岁,三年前老伴因重病去世。去年,经人介绍,我与离异的王姓女子相识并共同生活。经过将近一年时间的同居,我觉得两人性格不合,难以继续在一起,遂提出分手,却遭到王某反对。王某要我补偿她5万元才同意分手,可我不愿拿出这笔钱。 相似文献
128.
为寻找高效低毒的8-氨基喹啉类抗疟新药,用1-[(3-氯丙基)-4-(氨基烷基)]哌嗪在三乙胺存在下与环上取代的8-氨基喹啉缩合,合成了一系列 N-哌嗪基烷基取代的8-氨基喹啉类化合物(1~20)。其中多数对鼠伯氏疟原虫感染的抑制性治疗均具一定的活性,在20mg/kg×4d 的剂量下,化合物1,6,10和19的原虫抑制率为100%。在病因性预防筛选中,化合物1,18和19可使感染约氏疟原虫子孢子的实验鼠全部得到保护。化合物1在10mg/kg×3d 的剂量下仍有4/5的实验鼠保持阴性,仍比伯喹为优。 相似文献
129.
三联疗法治疗幽门螺杆菌消化性溃疡的临床分析 总被引:3,自引:0,他引:3
消化性溃疡(PU)是多发常见病,幽门螺杆菌(Helicobacter,Hp)与PU之间的密切相关性已被大量的研究证实,70%~90%的GU和95%~100%的十二指肠溃疡(DU)患者胃内存在Hp感染。过去“无酸、无溃疡”的理论虽是治疗PU的基本模式,但是一些学者提出了“无Hp、无溃疡”的新观点,虽未得到公认,但它将为PU特别DU的治疗提供更加完善的理论依据[1]。近年来的研究证明,以铋剂为主的三联疗法,疗效肯定。 相似文献
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