TRAIL胸外段基因克隆及其表达与纯化

目的；克隆TNF相关的诱导凋亡配体胞膜外段基因（the extracellular region of the human TRAIL cDNA,TPAILex），构建表达载体并在大肠杆菌DH5α中高效表达有生物学活性的TRAIL蛋白胞膜外段。方法：抗CD3McAb刺激正常人外周血淋巴细胞，用RT－PCR、巢式－PCR方法从活化的淋巴细胞中获得人TRAIL基因及其胞膜外段cDNA，并克隆到pGEM-T Easy载体中，DNA测序鉴定，将TRAIL的胞膜外段基因插入表达载体pGEX-2T，构建重组表达质粒pGEX/TRAILex，用IPTG诱导表达TRAIL蛋白的胞膜外段，GST－Agarose 4B层析柱纯化GST－TRAILex融合蛋白，Western-blot鉴定纯化产物。结果：抗CD3 McAb能诱导正常人外周血核细胞TRAIL的高表达，成功地克隆了TRAIL胞膜外段基因，构建了重组表达载体pGEX/TRAILex，IPTG诱导后得到高效表达的TRAIL蛋白胞膜外段，经12％SDS－PAGE分析，可观察到一分子量和理论值相符（约54kD）的诱导表达。Kodak软件分析表达GST－TRAIL胞膜外段融合蛋白的表达量占菌体蛋白总量的28％，进一步分析证实TRAIL蛋白的胞膜外段主要以可溶性的形式表达，用GST－Agarose 4B层析柱纯化超声破菌后的上清，每升细菌培养液可得到9.8mg纯度的95％以上的GST－Tex。Western-blot结果证实54kD的表达带可与鼠抗TRAIL McAb起特异性反应。结论：成功地克隆了人TRAIL基因，并应用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达人TRAIL蛋白的胞膜外段，为进一步研究TRAIL的功能及其在肿瘤生物治疗中的应用奠定了基础。     

中年人的怕

颈椎病这种原本老年人多发的退行性疾病，如今越来越成为一种社会流行病。调查显示，中国大约有7％～10％的人患有颈椎病，且发病率还在逐年提高，病人年龄呈低龄化趋势。     

针刺腧穴解除术后尿潴留的护理

术后尿潴留是术后常见的护理问题。一般临床以应用药物：如新斯的明；或采取诱导排尿的方法来帮助患者自行排尿。前者于临床应用中收效尚可，但仍有一定比例的患者对药物敏感性不高，收不到疗效：后者在临床应用中更是收效甚微。在此种情况下，常予以重新留置导尿，从而增加了患者的痛苦。为了降低导尿率，我科对因拔除导尿管后出现尿潴留的患者采用中医针刺腧穴的方法，以提高患者术后的舒适度，收到效果明显。现将结果报告如下：     

急救的光荣与梦想

在历次重大突发公共卫生事件中，急救人冲锋陷阵，挽救了数以万计的生命。目前，我国的急救在人才培养和引进，急救分级，流程控制等方面还有待完善，成熟急救的梦想不知何时能够实现……[编者按]     

别碰,那是我的黑色疼痛

有些记忆是挥之不去的，特别是少年时代的那种难以言说的伤痛。不管日后我们的境遇如何，最初的伤害却都如影随形，无法泯灭。[编者按]     

我是否可以到法院解除同居关系

我今年66岁，三年前老伴因重病去世。去年，经人介绍，我与离异的王姓女子相识并共同生活。经过将近一年时间的同居，我觉得两人性格不合，难以继续在一起，遂提出分手，却遭到王某反对。王某要我补偿她5万元才同意分手，可我不愿拿出这笔钱。     

书籍

《释梦：理论与实践》，《心灵的年轮》，《我是谁》，《你有几个灵魂》,《意象对话心理治疗》，[第一段]     

N-哌嗪基烷基取代的8-氨基喹啉类的合成及其抗疟作用

为寻找高效低毒的8-氨基喹啉类抗疟新药,用1-[(3-氯丙基)-4-(氨基烷基)]哌嗪在三乙胺存在下与环上取代的8-氨基喹啉缩合,合成了一系列 N-哌嗪基烷基取代的8-氨基喹啉类化合物(1～20)。其中多数对鼠伯氏疟原虫感染的抑制性治疗均具一定的活性,在20mg/kg×4d 的剂量下,化合物1,6,10和19的原虫抑制率为100%。在病因性预防筛选中,化合物1,18和19可使感染约氏疟原虫子孢子的实验鼠全部得到保护。化合物1在10mg/kg×3d 的剂量下仍有4/5的实验鼠保持阴性,仍比伯喹为优。     

三联疗法治疗幽门螺杆菌消化性溃疡的临床分析

消化性溃疡(PU)是多发常见病,幽门螺杆菌(Helicobacter,Hp)与PU之间的密切相关性已被大量的研究证实,70%～90%的GU和95%～100%的十二指肠溃疡(DU)患者胃内存在Hp感染。过去“无酸、无溃疡”的理论虽是治疗PU的基本模式,但是一些学者提出了“无Hp、无溃疡”的新观点,虽未得到公认,但它将为PU特别DU的治疗提供更加完善的理论依据[1]。近年来的研究证明,以铋剂为主的三联疗法,疗效肯定。     

感情田园的稻草人

她还记得男人给她讲稻草人的故事。稻草人穿着色彩艳丽的衣裙，忠心耿耿地守护着金灿灿的乡间田园。那时他们还读大学，校园的草坪上，她依着那个男生的肩膀，想着稻草人虚张声势地驱赶馋嘴的麻雀，偷偷地笑。