金银花提取物的质量分析方法评价

目的:探索金银花提取物质量控制的专属性方法,为相关制剂的质量控制提供参考。方法:采用HPLC,流动相乙腈(A)-0.4%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0~15 min,5%~20%A;15~30 min,20%~30%A;30~40 min,30%A),检测波长327 nm。比较金银花提取物与山银花、杜仲叶原药材及其提取物中绿原酸含量和特征图谱,分析银黄制剂中金银花提取物的质量。结果:原药材、提取物中均是山银花所含的绿原酸含量最高,质量分数分别为3.56%~5.09%,4.62%~6.12%;金银花提取物与杜仲叶提取物无明显差异,绿原酸质量分数约4%;金银花、山银花、杜仲叶提取物酸化后绿原酸含量均提高,分别为6.90%,7.35%,6.47%。山银花、杜仲叶提取物及其酸化提取物的特征谱图与金银花提取物标准图谱相同,部分银黄制剂中检测出了杜仲叶的主要成分京尼平苷酸和山银花的主要成分灰毡毛忍冬皂苷乙。结论:金银花提取物中可能存在添加山银花和杜仲叶的情况,需加强质量控制,为金银花提取物质量标准的提高及检测方法的选择提供了重要依据。     

杜仲叶茶功效成分对小鼠免疫功能影响

目的研究以杜仲叶为原料制成的绿茶对小鼠免疫功能的影响。方法杜仲叶茶中绿原酸和总黄酮含量分别用高效液相色谱法和分光光度法测定。小鼠细胞免疫功能测定：迟发型变态反应（DTH）实验采用绵羊红细胞（SRBC）诱导小鼠DTH（足跖增厚法）,刀豆蛋白A（ConA）诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTT法）。小鼠体液免疫功能的测定;用血凝法测定血清溶血素,Jerne改良玻片法检测抗体生成细胞。小鼠碳廓清试验法测定单核-巨噬细胞功能：用半体内法进行小鼠腹腔巨噬细胞噬鸡红细胞试验。用乳酸脱氢酶（LDH）测定法进行天然杀伤细胞（NK细胞）活性测定。结果杜仲叶茶中绿原酸含量为1.20g/100g,总黄酮含量（以芦丁计）为465mg/100g,经口给予小鼠不同剂量的杜仲叶茶30d后,与对照组比较,杜仲叶茶能增加小鼠的足跖肿胀度,提高小鼠的淋巴细胞增殖能力,增强小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力和小鼠碳廓清吞噬指数（P〈0.05）;各剂量组小鼠的胸腺/体重比值、脾脏/体重比值、小鼠血清溶血素和NK细胞活性转换值的测定结果与对照组比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论杜仲叶茶对小鼠的细胞免疫功能和单核-巨噬细胞功能均具有明显的增强作用,而对小鼠的体液免疫功能未见明显影响。     

杜仲叶对去势骨质疏松大鼠骨代谢的影响

目的 探讨通过建立去卵巢大鼠模型,研究杜仲叶调节骨代谢防治骨质疏松。方法 80只 200g雌性SD大鼠,随即分为模型对照组、假手术对照组、杜仲叶治疗组（10 g/kg?d)、雌激素治 疗组（50 μg/kg?d )。造模4周后连续治疗16周。结果 模型组大鼠机械力学检查使用显微CT (μCT )分析表明骨密度降低,骨关节面塌陷;组织学检查病理组织切片显示骨小梁减少;生化检查骨型碱性磷酸酶、尿钙尿磷反应骨代谢水平的下降,而采用杜仲叶醇提取物及雌激素治疗后,μCT分析表明骨密度相对增多,骨关节面平整,病理组织切片示骨小梁数量正常,生化检查示骨型碱性磷酸酶、血钙血磷、尿钙尿磷均与正常对照组无明显差异。结论 杜仲叶可以维持骨代谢平衡防治去势大鼠骨质疏松症。相对模型组其主要能增高骨密度、增加骨小梁数量、以及改善骨代谢平衡。     

杜仲叶通过激活ERK及AKT磷酸化促进 大鼠成骨细胞增殖的研究

目的研究杜仲叶提取物对大鼠成骨细胞的增殖作用及其分子机制。方法选取新生SD大 鼠的乳鼠颅骨通过消化法分离出乳鼠成骨细胞,并用碱性磷酸酶染色进行细胞鉴定;先用杜仲叶提取 物分别以0 mg/ml,5 mg/ml,20 mg/ml,40 mg/ml,60 mg/ml五种不同浓度梯度对大鼠成骨细胞干预,2 d后用MTT方法检测细胞增殖情况;用无血清无酚红的培养基饥饿大鼠成骨细胞2 h后,分别以0 mg/ml,5 mg/ml,20 mg/ml,40 mg/ml,60 mg/ml五种不同浓度杜仲叶提取物干预大鼠成骨细胞,2 h后 Western blot检测ERK和AKT的活化情况。结果碱性磷酸酶染色后的成骨细胞呈紫红色（特异性 染色）,MTT法结果显示杜仲叶提取物促进大鼠成骨细胞的增殖,并具有浓度依赖性;Western blot结 果显示杜仲叶提取物可使ERK及AKT磷酸化水平提高,并具有浓度依赖性。结论杜仲叶提取物 通过ERK通路及AKT通路促进大鼠成骨细胞的增殖。     

GC-MS/SIM法测定不同产地杜仲叶中的氨基酸

目的 建立杜仲叶中氨基酸含量测定的GC-MS/SIM方法,并用此方法测定不同产地杜仲叶中氨基酸含量.方法 杜仲叶采用6 mol·L-1盐酸提取,提取液经BSTFA+ 1％ TMCS衍生化后进样,全扫描定性,选择离子监测内标法定量.色谱柱为HP-5MS石英毛细管柱(30 m×0.25 μm×0.25 mm),初始柱温为100℃,保持3 min,程序升温8℃·min-1至300℃,保持6 min,分流比为10∶ 1.结果 各氨基酸在相应的范围内线性关系良好(r＞0.999),平均回收率在89.6％～106.3％ (n=5),RSD在1.7％～6.0％.采用该法对4个不同产地的杜仲叶进行氨基酸的含量测定,结果表明杜仲叶中含有氨基酸15种,湖北恩施产杜仲叶氨基酸含量较高,为9.95％;重庆长寿产杜仲叶氨基酸含量较低,为5.80％.结论 本法简便灵敏、重现性好、准确度高,适用于杜仲叶中氨基酸的分离检测.     

降血糖:杜仲叶桑叶复方配伍增效互补

中医在糖尿病治疗方面积累了丰富的经验,在长期的医疗实践中逐步形成了独具特色的药物疗法,在我国古代就已采用中药材来治疗消渴病(即现代医学的糖尿病)。从现代科学观点来看,实际上就是利用药用植物次     

杜仲叶降血糖的两大特色

近几年来科学家研究发现,杜仲叶次生代谢物有降低血糖的作用,即杜仲叶中的绿原酸、槲皮素、(+)-丁香脂素等次生代谢物能阻碍或延缓葡萄糖的生成与吸收。绿原酸和槲皮素除了具有显著的降糖     

四种不同杜仲叶渣中绿原酸含量的比较

目的：本研究基于中国药典中对含有杜仲的中成药的处理方法以及绿原酸含量测定方法,测定四种不同杜仲叶渣中绿原酸的含量,为杜仲叶渣的合理利用提供理论依据。方法：通过醇提取法、水提取法、醇水双提取法以及提取杜仲胶四种方法对杜仲叶干燥品进行预处理,并采用高效液相色谱法测定其中绿原酸含量。结果：醇提取法后的杜仲叶药渣所含绿原酸的质量分数为0.04559%,水提取法后的杜仲叶药渣中绿原酸的质量分数为0.0159%,醇水双提处理之后的杜仲叶药渣所含绿原酸的质量分数为0.01439%,提取杜仲胶后的杜仲叶渣滓不含绿原酸。结论：醇提、水提取之后的杜仲叶药渣中绿原酸含量较为丰富,可回收利用率高。     

杜仲叶药效成分酶法提取工艺研究

目的研究酶法提取杜仲叶中的药效成分。方法选取桃叶珊瑚甙(AUC)和绿原酸(CHA)为指标,研究酶法提取杜仲叶药效成分提取的因素。结果最佳提取工艺为杜仲叶为12g,加入2000U/mL纤维素酶10mL和1200U/mL果胶酶10mL,酶解温度为50℃,酶解时间为60min。     

成骨样细胞体外培养法筛选杜仲叶防治骨质疏松症的药效成份

目的 探讨杜仲叶提取成份对体外培养的成骨样细胞代谢功能的影响,筛选杜仲叶防治骨质疏松的药效成份。方法 从杜仲叶提取分离出4个化合物,以不同浓度(10-4g/L、10-6g/L、10-8g/L)加入体外培养的MG-63成骨细胞株中,并设空白组和对照组。培养4 d后,MTT比色法测定细胞增殖,对硝基磷酸盐法测定培养基中ALP活性。结果 细胞增殖数量与对照组比较,成份I 10-6g/L浓度组、Ⅱ、Ⅲ10-8g/L浓度组和成份Ⅳ10-4g/L、Ⅲ10-8g/L浓度组显著提高(P<0.05);成份Ⅱ、Ⅲ的10-4g/L、10-6g/L浓度组和成份Ⅳ10-6g/L浓度组极显著提高(P<0.01)。ALP活性与对照组比较,成份I 10-6g/L浓度组、成份Ⅱ10-4g/L、10-8g/L浓度组、成份Ⅲ10-8g/L浓度组和成份Ⅳ的10-4g/L、10-8g/L浓度组有显著性增强;成份Ⅱ10-6g/L浓度组和成份Ⅲ的10-4g/L、10-6g/L浓度组均极显著增强(P<0.01)。结论 4个成份均有一定的促进成骨细胞增殖、调节成骨细胞代谢的作用,以Ⅱ和Ⅲ效果明显。