丹参二萜醌类活性成分通过PKCδ/PKD1μ信号通路抗胰腺癌的作用研究

摘要 目的 验证丹参二萜醌类活性成分对胰腺癌和多发性骨髓瘤的抑制效应，阐明其诱导胰腺癌和多发性骨髓瘤凋亡的作用机制。方法 胰腺癌细胞AsPC-1、BxPC-3用含10% gibco胎牛血清的RPMI1640培养液培养，按隐丹参酮组（30μM）、丹参新酮组（15μM）、去氢丹参新酮组（15μM）分别加药处理。cell-counting-kit-8（CCK8）法检测细胞存活率；AnnexinⅤ-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡；Western Blot检测相关PKC同工酶磷酸化水平；对AsPC-1和BxPC-3细胞进行siRNA转染，Western Blot检测相关PKC同工酶磷酸化水平。结果 隐丹参酮组AsPC-1、BxPC-3细胞存活率分别为40.1%±5.0%、36.2%±5.4%；丹参新酮组AsPC-1、BxPC-3细胞存活率分别为52.1%±5.1%、47.2%±5.7%；去氢丹参新组AsPC-1、BxPC-3细胞存活率分别为46.1%±5.0%、42.2%±5.4%(P<0.01)。流式细胞术结果显示：AsPC-1组内空白对照组、隐丹参酮组、丹参新酮组、去氢丹参新酮组细胞的凋亡率分别为4.71%、30.10%、52.26%、42.30%；BxPC-3组内空白对照组、隐丹参酮组、丹参新酮组、去氢丹参新酮组细胞的凋亡率分别为5.10%、30.66%、33.76%、51.76%（P<0.01）。Western Blot检测显示隐丹参酮组、丹参新酮组、去氢丹参新酮组较空白对照组，胰腺癌AsPC-1、BxPC-3细胞p-PKD/PKCμ ser916、p-PKCδ thr505、p-PKD/PKCμ ser744/748的水平降低。Western Blot检测显示，siRNA沉默胰腺癌AsPC-1、BxPC-3细胞PKCδ，胰腺癌AsPC-1、BxPC-3细胞PKD/PKCμ ser744/748的磷酸化水平下调。结论 隐丹参酮、丹参新酮、去氢丹参新酮通过抑制PKCδthr505的磷酸化水平，继而PKD1μser744/748磷酸化水平下调，从而显著促进胰腺癌AsPC-1和BxPC-3细胞凋亡发生。     

鼠巨细胞病毒感染C57BL/6小鼠急性肝炎动物模型的建立与鉴定

目的：建立鼠巨细胞病毒（MCMV）感染C57BL/6小鼠急性肝炎模型并对其感染特点进行分析及鉴定。方法：将24 只C57BL/6小鼠随机分为阴性对照组（n =12）及病毒感染组（n =12），病毒感染组腹腔注射1.0×106 PFU（200 μL）MCMV悬液，阴性对照组注射等体积小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）悬液。于感染后第3天和第7天取外周血分离血清检测谷丙转氨酶（ALT）及谷草转氨酶（AST）。同时进行肝组织病毒分离、组织病理学及MCMV IE和M55基因、细胞因子白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的检测。结果：病毒感染组肝组织匀浆病毒分离均为阳性，肝炎发生率为100%。在感染后第3天即发生肝炎病理改变，病毒感染组血清ALT及AST较阴性对照组明显升高（P ＜0.01）；病毒感染组肝脏HE染色第3天可见局灶性炎性细胞浸润及肝脏点灶状坏死，持续至第7天，Ishak评分较阴性对照组明显升高（P ＜0.01）；在感染后第3天病毒感染组肝组织内可检测到MCMV IE及M55基因，且在感染后第7天仍可测得IE基因；感染后第3天及第7天病毒感染组炎性细胞因子IL-6、TNF-α及IL-1β mRNA表达水平明显升高（P ＜0.05）。 结论：成功建立MCMV感染C57BL/6小鼠急性动物肝炎模型，其感染表现主要集中在急性感染前期。     

枸地氯雷他定片联合布地奈德鼻喷雾剂治疗变异性鼻炎的临床效果观察

目的观察枸地氯雷他定片联合布地奈德鼻喷雾剂治疗变异性鼻炎的临床效果。方法218例变异性鼻炎患者,根据随机数字表法分成对照组和实验组,每组109例。对照组给予枸地氯雷他定片治疗,实验组予枸地氯雷他定片联合布地奈德鼻喷雾剂治疗。比较两组患者治疗前后临床症状(喷嚏、流涕、鼻塞、鼻痒)积分以及炎症指标[白细胞介素(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞计数(WBC)]水平、症状消失时间、治疗效果、随访1年期间复发情况。结果治疗后,两组喷嚏、流涕、鼻塞、鼻痒积分均低于本组治疗前,且实验组低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组IL-6、CRP、TNF-α、WBC水平较本组治疗前均有所改善,且实验组改善程度优于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。实验组喷嚏症状消失时间(3.08±0.31)d、流涕症状消失时间(3.03±0.30)d、鼻塞症状消失时间(3.52±0.36)d、鼻痒症状消失时间(3.63±0.37)d均短于对照组的(3.94±0.40)、(3.62±0.35)、(4.23±0.41)、(4.92±0.48)d,差异均具有统计学意义(P<0.05)。实验组治疗总有效率96.33%高于对照组的83.49%,差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组随访1年复发率0.92%低于对照组的9.17%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在变异性鼻炎患者的治疗中,采取枸地氯雷他定片联合布地奈德鼻喷雾剂治疗,可明显降低患者症状积分及血清炎症因子水平,缩短临床症状消失时间,提高临床效果,降低复发率,效果理想。     

不同剂量舒芬太尼联合右美托咪定和地佐辛对直肠癌患者术后镇痛效果及血小板活化指标的影响

目的探讨不同剂量舒芬太尼联合右美托咪定和地佐辛对直肠癌患者术后镇痛效果及血小板活化指标的影响。方法将河南大学第一附属医院2015年6月至2017年12月收治的择期行直肠癌根治术的138例患者分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,每组46例。患者术中均予以全身麻醉,术后予以静脉镇痛泵镇痛,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组患者术后镇痛药物分别为1. 0μg·kg~(-1)舒芬太尼+1. 5μg·kg~(-1)右美托咪定+0. 3 mg·kg~(-1)地佐辛、1. 5μg·kg~(-1)舒芬太尼+1. 5μg·kg~(-1)右美托咪定+0. 3 mg·kg~(-1)地佐辛、2. 0μg·kg~(-1)舒芬太尼+1. 5μg·kg~(-1)右美托咪定+0. 3 mg·kg~(-1)地佐辛。比较3组患者术后1 h(T0)、3 h(T1)、6 h(T2)、12 h(T3)、24 h(T4)疼痛视觉模拟评分(VAS)、Ramsay镇静评分、舒适度评分(BCS);并比较3组患者手术前后氧化损伤、应激反应、血小板活化指标及术后不良反应发生情况。结果 T0、T1、T2、T3、T4时Ⅱ、Ⅲ组患者的VAS评分均显著低于Ⅰ组(P <0. 05),BCS评分高于Ⅰ组(P <0. 05)。T0、T1、T2、T3、T4时Ⅱ、Ⅲ组患者VAS评分及BCS评分比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。T0、T1、T2、T3、T4时3组患者Ramsay镇静评分比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。术前3组患者血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、脂质过氧化物(LPO)、肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、皮质醇(Cor)、血栓素A2(TXA2)及血小板颗粒膜蛋白140(GMP140)水平比较差异均无统计学意义(P> 0. 05)。3组患者术后血清GSH-Px水平显著低于术前,LPO、E、NE、Cor、TXA2、GMP140水平显著高于术前(P <0. 05);术后Ⅱ、Ⅲ组患者血清GSH-Px水平显著高于Ⅰ组,LPO、E、NE、Cor、TXA2、GMP140水平显著低于Ⅰ组(P <0. 05);术后Ⅱ、Ⅲ组患者血清GSH-Px、LPO、E、NE、Cor、TXA2、GMP140水平比较差异无统计学意义(P>0. 05)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组患者不良反应发生率分别为8. 7%(4/46)、13. 0%(6/46)、28. 3%(13/46),Ⅰ、Ⅱ组患者不良反应发生率显著低于Ⅲ组(χ~2=6. 915、4. 092,P <0. 05),Ⅰ、Ⅱ组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义(χ~2=0. 453,P> 0. 05)。结论 1. 5μg·kg~(-1)舒芬太尼联合右美托咪定和地佐辛用于直肠癌根治术后镇静、镇痛效果显著,能够减少术后机体的氧化损伤,降低应激反应,抑制血小板活化,且不良反应发生率低。     

糖尿病患者胰岛素、C肽释放、糖耐量和糖化血红蛋白联合测定分析

目的探讨糖尿病病人胰岛素、C肽释放、糖耐量和糖化血红蛋白联合测定价值。方法选取我院2013年9月至2015年9月收治的64例糖尿病患者,按疾病类型不同分为Ⅰ型糖尿病组和Ⅱ型糖尿病组各32例。另取同期健康体检者32例作为对照组。检测并对比三组的胰岛素和C肽释放量、糖耐量、糖化血红蛋白水平。结果Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病组T_0、T_1、T_2、T_3时C肽释放量及糖化血红蛋白水平显著高于对照组,Ⅱ型糖尿病组T_0、T_1、T_2、T_3时的胰岛素释放量均高于Ⅰ型糖尿病组、对照组,Ⅰ型糖尿病组T_0、T_1、T_2、T_3时的糖耐量水平均高于Ⅱ型糖尿病组、对照组;差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论胰岛素、C肽释放、糖耐量、糖化血红蛋白联合测定可全面反映糖尿病患者病情,有利于临床诊断和指导治疗,应用价值较高。     

白芍总苷对糖尿病合并冠心病患者血清脂联素和hs-CRP水平的影响

目的探讨白芍总苷治疗糖尿病合并冠心病的临床效果及机制。方法将166例糖尿病合并冠心病患者随机分为观察组和对照组各83例。两组均采用常规治疗,观察组在此基础上加用白芍总苷,共治疗2个月。比较两组治疗前后空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h FBG)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及血清脂联素和超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平变化。结果与治疗前比较,两组治疗后FBG、2h FBG和Hb A1c均降低(P均<0.05),两组治疗后相比差异无统计学意义;治疗后HOMA-IR均明显降低(P均<0.05),但观察组降低更明显(P<0.05);两组治疗后血清脂联素水平均升高,但观察组升高更明显(P<0.05);两组治疗后血清hs-CRP水平均降低,但观察组降低更明显(P<0.05)。结论白芍总苷治疗糖尿病合并冠心病有一定效果,其机制可能为升高血清脂联素水平和降低hs-CRP水平。     

缺血性脑卒中患者血清IL-6和hs-CRP水平动态监测及其临床意义分析

目的研究缺血性脑卒中患者血清白介素-6(IL-6)和高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平的动态变化趋势及其临床意义。方法将本院2012年12月至2015年12月收治的118例缺血性脑卒中患者纳入脑卒中组,根据患者入院时美国国立卫生研究院卒中量表(National Institute of Health Stroke Scale,NIHSS)评分将其分为轻度组(55例)、中度组(42例)及重度组(21例)。同时,根据患者治疗过程中是否出现进展性脑卒中将其分为进展组(31例)和非进展组(87例)。分别于入院后第1、3、7、14天采集上述患者肘静脉血检测IL-6和hs-CRP水平。选取同期于本院查体健康者48例纳入对照组。对照组患者仅于体检当日清晨采集血液检测IL-6和hs-CRP水平。结果入院后第1、3、7、14天,脑卒中组患者血清IL-6和hs-CRP水平均明显高于对照组(P<0.01);脑卒中组患者血清IL-6和hsCRP水平于入院后第1天达到峰值,后呈下降趋势,其中,重度组患者血清IL-6和hs-CRP峰值水平均明显高于中度组和轻度组(P<0.01),中度组患者血清IL-6和hs-CRP峰值水平均明显高于轻度组(P<0.01)。非进展组患者血清IL-6和hs-CRP水平于入院后第1天达到峰值,后呈下降趋势,进展组患者IL-6和hs-CRP水平随时间变化呈先升后降的趋势,且均于入院后第7天达到峰值。在不同时间点,进展组患者血清IL-6和hs-CRP水平均明显高于非进展组(P<0.01)。结论 IL-6和hs-CRP可用于判断缺血性脑卒中的严重程度,预测脑卒中进展,可为脑卒中的防控提供线索。     

儿童肾病综合征患者血清胱抑素C水平的临床应用

目的评价血清胱抑素C在儿童肾病综合征中的临床应用效果。方法回顾分析60例儿童肾病综合征患者的临床资料,根据肾功能不同分成4组,各15例,分别为肾功能正常组、肾功能不全期组、肾功能不全失代偿期组、肾功能衰竭期组;另15例体检健康儿童作为对照组观察对象。统一测定本次观察对象的血清胱抑素C含量、血肌酐含量、血尿素氮含量,并进行组间比较。结果患有肾病综合征的儿童上述指标水平明显高于对照组(P0.05);此外随着患儿肾功能不全程度的不同,各组间血肌酐、尿素氮以及血清胱抑素C水平差异有统计学意义,肾损伤程度越大,该指标水平越高,同时各组间比较P0.05;不同指标判断患儿肾功能的灵敏度不同,其中血肌酐为50%,尿素氮为48.33%,血清胱抑素C为75%,差异有统计学意义(P0.05)。结论血清胱抑素C在儿童肾病综合征临床诊断中具有重要价值,客观性及准确性均较强,值得临床大力推广。