ABCB1、CYP2C19、CES1基因多态性与缺血性脑卒中患者氯吡格雷抵抗及疗效的关系

目的 探讨ABCB1、CYP2C19、CES1基因多态性与缺血性脑卒中患者氯吡格雷抵抗的关系及其对临床疗效的影响.方法 选取2016年10月至2017年12月期间被诊断为缺血性脑卒中的患者90例,均给予氯吡格雷及阿司匹林双抗治疗.通过流式细胞仪检测血小板聚集率,采用焦磷酸测序法进行ABCB1 C3435T、CYP2C1...     

水生生态毒理学方法在环境卫生研究中的应用

水生生态毒理(aquatic ecotoxicology)系采用水生生物为试验对象进行毒理学研究，是水生毒理学、环境毒理学及环境生物学的重要组成部分，可为水质、生物毒素评价及制订各种水质标准(包括渔业水质标准、排放标准等)提供科学依据，在环境卫生研究中起着重要作用。在国内外，对水生生态毒理学的一些方法进行标准化，如ISO(国际标准组织)已向各国推荐了一些标准方法，国家环境保护局也相应的制定了标准，及国家标准。生态毒理其范围包括水体中主要生物类群中代表性生物的毒性试验，如游泳性生物代表鱼类毒性试验：浮游动物代表水蚤类毒性试验：浮游植物代表藻类毒性试验；原生动物代表梨形四膜虫毒性试验；甲壳动物代表虾毒性试验；贝类代表贻贝及毛蚶毒性试验；以及这些代表性生物的富集试验、致突变试验、长效应试验和各级水生食物链生物对毒物的迁移转化等。     

RNAi技术抑制乳腺癌细胞表皮生长因子受体表达的在体实验研究

目的 探讨采用体外化学合成的小干扰RNA(siRNA)结合阳离子脂质体是否能有效在体转染乳腺癌细胞,以期为RNAi的在体实验研究提供实验数据和理论依据.方法 (1)建立裸鼠肿瘤动物模型,计算成瘤率.(2)体外转染乳腺癌细胞,常规动物接种,测量肿瘤体积和动物重量,计算肿瘤抑制率.(3)采用免疫组化和Western blotting技术测定肿瘤组织的表皮生长因子受体蛋白水平,采用Real-time PCR检测表皮生长因子受体基因水平,采用ELISA检测动物血清及肿瘤抽提蛋白中EGF含量.结果 MDA-MB-231、ZR-75细胞成瘤率依次为30.00%、88.89%,MDA-MB-231细胞的成瘤能力明显弱于ZR-75细胞.ELISA检测结果证实dsRNA-表皮生长因子受体可将血清及肿瘤组织抽提蛋白中的EGF含量分别降低16.77%、12.59%.Real-time PCR结果表明dsRNA-表皮生长因子受体可将表皮生长因子受体基因表达下调21.05%.结论 (1)采用体外化学合成的siRNA结合阳离子脂质体可有效在体转染乳腺癌细胞.(2)在体实验中RNAi效应持续的时间明显长于体外实验.(3)针对表皮生长因子受体基因序列设计的siRNA可作为极具开发前途的抗肿瘤新药,其在体实验中触发RNAi可能的作用机制尚需进一步深入探讨.     

槲皮素联合顺铂对HepG2细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨槲皮素联合顺铂对HepG2细胞生长抑制及凋亡的影响.方法:采用MTT检测槲皮素及槲皮素联合顺铂对HepG2细胞增殖影响;用Annexin-v-FITC联合PI及流式细胞仪检测槲皮素及槲皮素联合顺铂处理后HepG2细胞的凋亡变化.结果:槲皮素能抑制HepG2细胞增殖,且有剂量效应关系;在其他条件相同情况下,槲皮素联合顺铂与相同浓度顺铂单用处理HepG2细胞相比,前者对HepG2细胞的抑制作用更显著(P＜0.05);不同浓度槲皮素与顺铂联合处理HepG2细胞与顺铂单用相比,前者显著提高了HepG2细胞的凋亡率(P＜0.05).结论:槲皮素能促进顺铂对HepG2细胞的生长抑制及凋亡诱导.     

赤芍、白芍凉血作用比较研究(Ⅰ)-LPS刺激大鼠肺泡巨噬细胞的作用研究

目的观察赤芍、白芍各醇提物对脂多糖(LPS)致大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)不同时间段活性的影响,比较赤芍、白芍各醇提物的凉血作用的异同。方法采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法检测LPS(1μg/mL)对NR8383细胞不同时间点的抑制率及赤芍、白芍(10μg/mL)对LPS诱导NR8383活性的调节作用。结果 1μg/mLLPS刺激NR8383 6h之前抑制率为负值之后逐渐转为正值,即先诱导其过度激活后促进其凋亡;观察到川赤芍、赤芍、白芍给药组能够在3h时显著抑制NR8383的过度活化,与LPS对照组比较具有显著差异(P<0.05);24h时各药物组均能够显著抑制NR8383的异常凋亡,与LPS对照组比较具有显著差异(P<0.05);24h时川赤芍、赤芍组与白芍组之间有显著差异(P<0.05)。结论赤芍、白芍是在共同具有凉血功效的前提下有所偏重。     

蓖麻根提取物抑制肝癌细胞的作用探讨

目的探讨蓖麻根提取物对肝癌细胞的作用。方法用（3-c4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）实验法,检测蓖麻根提取物对肝癌细胞的表达程度。结果蓖麻根提取物中蓖麻石油醚成分对肝癌表达抑制作用最强。结论蓖麻根提取物在体外有较强的抗肝癌细胞作用。     

两种RGD模拟肽抗兔血小板聚集活性研究

目的研究两种RGD模拟肽(NB05和NB06)的抗兔血小板聚集活性.方法体外检测RGD肽抑制家兔ADP诱导血小板聚集率,计算RGD肽对血小板聚集的抑制率.体内颈动静脉旁路血栓模型检测两种RGD肽对形成血栓湿重的影响.结果NB05和NB06体外抗家兔血小板聚集的IC50值分别为(33.34±3.58)和(8.69±1.34)μmol·L-1;NB05和NB06均使血栓湿重显著减小(P＜0.01),NB06的抗血栓活性较NB05高(P＜0.05).结论NB05和NB06均具有较强的抗血小板聚集和抗血栓形成活性.     

丝裂霉素联合塞来昔布对膀胱癌T24细胞增殖的影响研究

目的:研究体外丝裂霉素(MMC)联合塞来昔布对浅表性膀胱癌T24细胞增殖的影响及其可能机制。方法:体外培养浅表性膀胱癌T24细胞,分为MMC[0(对照组)、2、5、10、25、50μmol/L]组及其与塞来昔布(50μmol/L)混合组,每个浓度5个复孔,采用MTT法检测作用24h后细胞的增殖抑制率。采用免疫组化法、实时定量聚合酶链式反应法、酶联免疫吸附测定法检测对照组、MMC(50μmol/L)组和混合[塞来昔布+MMC(50μmol/L)]组作用48h细胞中Bcl-2蛋白、作用24h细胞血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达及作用96h内VEGF蛋白浓度。结果:MMC能明显抑制细胞增殖(P<0.05),且呈浓度依赖性;塞来昔布能明显增强MMC对细胞的增殖抑制作用(P<0.05);与对照组比较,MMC组和塞来昔布+MMC组细胞中Bcl-2蛋白、VEGF mRNA表达均明显降低(P<0.05),且后2组组间比较有统计学差异(P<0.05);塞来昔布+MMC组细胞中VEGF蛋白浓度随作用时间延长明显降低(P<0.01)。结论:塞来昔布可协同增强MMC抑制T24细胞增殖的作用,其机制可能与降低Bcl-2、VEGFmRNA表达水平和抑制细胞分泌VEGF蛋白作用有关。     

基于炮制减毒思想的何首乌肝毒性物质基础初步研究

目的基于何首乌炮制前后的谱-毒相关分析,筛选何首乌肝毒性物质基础,为提高何首乌药材质量控制方法,确保临床用药安全提供参考。方法以何首乌生品及黑豆汁蒸制不同时间的炮制品为研究对象,采用UPLC-Q/TOF-MS技术表征各样品的化学信息,并结合文献初步指认其主要成分;再以正常人肝细胞(Lo2细胞系)为模型,细胞抑制率为评价指标,采用简单相关分析及多元线性相关分析方法,筛选何首乌致肝毒性的主要成分。结果共指认出何首乌生品及炮制品中的7种主要共有成分反式二苯乙烯苷、没食子酸、大黄素、大黄素甲醚、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、顺式二苯乙烯苷、儿茶素,并基于谱-效简单相关分析发现反式二苯乙烯苷、大黄素甲醚、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、顺式二苯乙烯苷、儿茶素5个成分与何首乌毒性相关性较强。进一步主成分回归分析发现大黄素甲醚与顺式二苯乙烯苷对何首乌毒性贡献度较大,提示这2个成分可能是何首乌主要毒性成分。何首乌高压黑豆汁蒸至36 h后才能达到减毒的效果。结论该研究可为何首乌的合理利用和毒性研究提供参考和依据。     

羚贝止咳糖浆对豚鼠离体气管螺旋条平滑肌收缩的抑制作用

目的考察羚贝止咳糖浆对豚鼠离体气管螺旋条平滑肌收缩的抑制作用,并探讨其作用机制。方法制备豚鼠离体气管平滑肌螺旋条,随机分为羚贝止咳糖浆组、川贝雪梨糖浆组和异丙肾上腺素组,每组各3例。加入0.167μg/m L氯化乙酰胆碱制备豚鼠离体气管螺旋条平滑肌收缩模型。当气管平滑肌张力达到最高点时,观察羚贝止咳糖浆最大有效浓度对豚鼠离体气管螺旋条收缩作用的影响,计算抑制率。采用RT-PCR法检测豚鼠离体气管条肌球蛋白轻链激酶(MLCK)m RNA表达,采用疫蛋白印迹法(Western blotting)法检测豚鼠离体气管条MLCK蛋白表达情况。结果羚贝止咳糖浆能够显著抑制氯化乙酰胆碱引起的豚鼠气道平滑肌过度收缩,松弛气道平滑肌,作用强度强于川贝雪梨糖浆(P0.05),但弱于异丙肾上腺素(P0.01)。羚贝止咳糖浆能够显著降低由氯化乙酰胆碱引起的过度收缩的豚鼠气道平滑肌中MLCK m RNA表达、MLCK的蛋白表达量(P0.01)。结论羚贝止咳糖浆可能通过减少处于过度收缩状态的平滑肌MLCK m RNA、MLCK蛋白的表达量,起到松弛气道平滑肌、解除气道痉挛的作用,从而发挥其止咳平喘的作用。