肿瘤坏死因子受体相关因子6与骨代谢的研究进展

TRAF6是肿瘤坏死因子受体相关因子家族(TRAFs)中既可与肿瘤坏死因子受体(TNFR)超家族结合,又可与白细胞介素-1受体/Toll样受体(IL-1R/TLR)超家族相互作用来传递细胞外信号的一种细胞内接头蛋白,在炎症反应、免疫应答、骨代谢中发挥着重要作用。本文现就TRAF6在骨代谢中的研究进展作一综述。     

肿瘤坏死因子-α调控骨质疏松症作用机制研究

成骨细胞(osteoblast, OB)与破骨细胞(osteoclast, OC)动态平衡调控着骨重塑稳态,其平衡被打破将介导系列骨疾病发生与发展,如骨质疏松症(osteoporosis, OP)、类风湿关节炎(RA)和骨硬化症等。肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)是一种由活化的巨噬细胞/单核细胞产生的炎性细胞因子,是骨吸收增强剂和骨形成抑制剂,可调控骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stemcells, BMSCs)、OB和OC相关信号通路、蛋白及基因表达而减弱BMSCs成骨分化、抑制OB矿化和促进OC活化、增殖与成熟,导致骨形成和吸收之间动态失衡扰乱骨重建而促进OP的进展。因此,笔者通过查阅国内外相关文献资料总结TNF-α在OP中的相关作用机制以期为进一步临床研究提供一定理论依据。     

脂代谢紊乱与骨质疏松症的关系及中医药干预研究进展

骨质疏松症（osteoporosis,OP）是一种常见的全身代谢性疾病,是造成骨折的主要原因之一,其发病机制较为复杂,不同原因引起的OP涉及了体内多种代谢途径的紊乱,近年来随着代谢组学在中医药治疗OP过程中的不断研究,发现脂代谢紊乱会抑制骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stemcells,BMSCs）向成骨细胞（osteoblast,OB）增殖分化,促进造血干细胞（stem cell,SC）向破骨细胞（osteoporosis,OC）的分化。其中,脂质异常聚集、炎症反应、氧化应激、氧化脂质、对氧磷酶（paraoxonase,PON）等因素对OB的增殖及分化具有负向调控作用,同时,脂代谢紊乱会使白细胞介素-1（Interleukin-1,IL-1）、白细胞介素-6（interleukin- 6,IL-6）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）等炎症因子的表达上调,产生氧化应激与炎症反应,导致OC分化及增殖和骨吸收加剧。近年来,中医药在预防和治疗OP方面的研究也逐渐增多,其疗效也得到了普遍认可,有诸多研究发现中药有效成分和中药复方可以通过靶向信号分子调控脂代谢的过程来影响OB和OC的分化,在纠正骨代谢失衡方面潜力巨大。因此,通过调控脂代谢相关靶点通路来预防和治疗OP已成为了当下研究热点,现通过对中医药防治OP的作用机制及相关靶点方面的研究进行整理,总结了中医药通过调控脂代谢关键因子来治疗OP的部分机制,旨在为中医药防治OP的深入研究提供参考依据。     

Ｈ 型血管在骨发育及骨疾病中作用研究进展

骨髓中的Ｈ 型血管是与成骨活动高度耦联的骨髓血管亚型,特点是ＥＭＣＮ 和ＣＤ３１ 的高表达。Ｈ 型血管在长骨发育的 过程中在松质骨区形成,为生长板附近的细胞提供充足的营养支持,并通过旁分泌的方式影响前成骨细胞及破骨细胞的增殖 及分化,提供适宜的微环境从而有利于新生骨的形成。由于Ｈ 型血管与成骨活动有十分密切的关系,在骨折愈合、骨质疏松、 骨关节炎、骨坏死以及肿瘤骨转移等骨疾病生理和病理过程中均有Ｈ 型血管的参与,而针对Ｈ 型血管的治疗可以改善上述疾 病的进程。本文对Ｈ 型血管与其耦联的成骨活动的机制进行了综述,有利于进一步了解Ｈ 型血管在骨代谢中的作用,为从血 管的角度理解骨疾病提供理论基础和思路。     

骨碎补-续断药对对成骨/破骨代谢的双向调控作用及其对Hif1ɑ基因的影响

目的 分析骨碎补-续断药对对成骨/破骨代谢的调控作用并初步探讨其机制。方法 分别制备空白、低剂量、中剂量及高剂量的骨碎补-续断含药血清。采用CCK-8法、ALP染色法和茜素红染色法,分别观察含药血清对MC3T3-E1细胞增殖、成骨和矿化能力的影响;采用CCK-8法和TRAP染色法观察含药血清对RAW264.7细胞增殖和破骨分化能力的影响。采用系统药理学的方法分析药物的可能作用靶点,并结合RT-PCR和Western-blot的方法验证。结果 中剂量和高剂量骨碎补-续断含药血清可促进MC3T3-E1细胞的增殖,抑制RAW264.7细胞的增殖,中剂量组和高剂量组间没有明显差异;同时,中、高剂量含药血清可促进MC3T3-E1细胞的ALP活性和钙化能力,抑制RAW264.7细胞的TRAP活性,中剂量和高剂量间没有显著性差异。骨碎补-续断药对的可能作用靶点涉及HIF1ɑ,RT-PCR和Western-blot结果证实中剂量含药血清可提高MC3T3-1细胞Hif1ɑ基因的mRNA和蛋白水平及RAW264.7细胞的HIF1ɑ蛋白水平。结论 骨碎补-续断药对具有促进成骨代谢,抑制破骨代谢的作用,HIF...     

腺病毒介导的BMP-2基因诱导脂肪间充质干细胞向成骨细胞定向分化

目的探讨人骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因通过腺病毒转染青山羊脂肪间充质干细胞(ADSCs)的可行性及其向成骨细胞定向分化的能力。方法取麻醉状态下青山羊腹股沟脂肪组织,经体外分离培养获得ADSCs,转染以腺病毒介导的人BMP-2基因。倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测ADSCs生长增殖情况,免疫细胞化学法对ADSCs细胞进行碱性磷酸酶(ALP)活性测定,SABC法检测ADSCsⅠ型胶原的表达,通过RT-PCR、Western blot法检测BMP-2基因的表达水平。结果转染人BMP-2基因的ADSCs形态规则;细胞生长速度快,且随培养时间的延长逐渐增多(P0.05);成骨诱导后,转染组细胞ALP活性和Ⅰ型胶原表达强度明显高于未转染组(P0.05);转染组ADSCs BMP-2基因m RNA水平和蛋白含量均明显强于未转染组(P0.05)。结论经腺病毒介导的人BMP-2基因转染的青山羊ADSCs在体外诱导培养中可以向成骨细胞定向分化,并保持较强的增殖能力;转染后细胞BMP-2目的基因表达增高。     

细胞焦亡与骨质疏松症关系研究

骨质疏松症(osteoporosis, OP) 是一种以骨组织微结构退化、骨密度和骨量降低为特征的骨代谢疾病。近年来国内外相关实验研究总结OP以及骨细胞病理进程发现,细胞焦亡（pyroptosis）机制对该病有着重要介导作用。细胞焦亡属于机体的天然免疫反应,多种炎症小体介导的细胞焦亡在OP中发挥重要作用,但细胞焦亡介导OP的发生机制尚未明确。因此,阐明细胞焦亡的信号机制和与OP的联系,从而采取针对性的靶向治疗,对于防治OP有着重要意义。此外,近年来随着中医药分子水平的研究逐渐深入,中医药抑制细胞焦亡改善OP骨细胞代谢的研究逐渐增多,中医药参与靶向治疗有望成为临床上治疗该病的突破方向。本文将综述细胞焦亡机制与OP的相关性研究,分析细胞焦亡途径影响骨质疏松的病理机制,阐述细胞焦亡调控OP中骨细胞代谢和平衡的具体机理,为细胞焦亡介导骨质疏松症的发病机制研究提供科学依据,并且为寻找潜在的靶点提供思路。     

kisspeptin抗骨质疏松症机制的研究进展

骨质疏松症是最常见的代谢性骨疾病,虽然骨质疏松症的发生发展大多是静悄悄的,但其最终后果,即导致的脆性骨折,对患者和社会构成了巨大的医疗和经济挑战,因此,对其进行防治具有重要意义。生殖激素在哺乳动物骨骼的生长和骨量的维持中起着至关重要的作用。研究发现,生殖激素kisspeptin可刺激成骨细胞分化以及抑制破骨细胞,因此可能具有骨质疏松症的临床治疗潜力。该文对该领域的重要研究发现与进展进行综述,以期为后续研究提供一定的参考。     

长时间力学载荷抑制体外培养成骨细胞的增殖和分化

目的:观测长时间生理强度力学载荷对体外培养小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1增殖和成骨分化的影响,探讨长时间生理载荷影响骨组织的细胞生物学机理。方法:采用四点弯曲加载装置,向成骨前体细胞MC3T3-E1施加2000微应变(με)、0.5 Hz的周期性张应变,持续时间为0~24 h。然后采用MTT法检测细胞增殖活性;Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡;比色法检测碱性磷酸酶(ALP)和乳酸脱氢酶(LDH)活性;RT-PCR检测ALP、骨钙蛋白(OCN)、I型胶原(Col I)的m RNA表达;免疫印迹法检测OCN和Col I蛋白,以及骨形成蛋白表达。结果:短时间的力学载荷(12 h以内)对成骨前体细胞的增殖无影响,24 h的力学载荷抑制成骨细胞增殖活性,但效果不显著;0~24 h的力学载荷均对成骨细胞的凋亡率无明显影响。短时间力学载荷可提高ALP活性和ALP m RNA表达,12 h后开始下降;短时间的力学载荷可提高OCN和Col I的m RNA和蛋白水平,但载荷作用24 h后,OCN和Col I的蛋白表达开始降低。0~8 h的载荷促进骨形成蛋白2和4的表达,12 h载荷后,蛋白表达降低。另外,长时间载荷可提高细胞培养上清的LDH活性。结论:长时间的生理力学载荷对细胞增殖的抑制作用不显著,对细胞凋亡也没有明显影响,但可显著促进细胞坏死,并抑制细胞成骨分化。     

骨质疏松性椎体骨折

椎体骨折是最常见的骨质疏松性骨折。一次椎体骨折的出现常预示有更多椎体或身体其它部位骨折的发生。高分辨率HRCT及μC能清楚显示椎骨结构特征。骨质疏松性骨折的治疗目的除一般外科措施外，在于减少骨吸收，改善微构筑及正常力学功能。应根据个体情况采用抗骨吸收或促进骨形成制剂治疗。对围经期或绝经后妇女可选用雌激素或选择性雌激素受体拮抗剂（SERM）。鲑鱼降钙素有降低骨吸收、改善骨质量和缓解止痛作用，新的椎体骨折发生率明显减少。服用阿仑膦酸盐增加的BMD能大大减少骨折风险。间断给予小剂量胛H1—34能明显增加特别是脊柱BMD，并降低脊柱骨折发生率。OPG／RANKL／RANK对破骨细胞分化与活化的作用可用作开发骨代谢病的治疗途径。遗憾的是，到目前为止，对骨质疏松性骨折的药物治疗远未引起骨科医师的注意。目前采用的椎体成形术的填充物PMMA及CPC等，如能适当复合骨髓或一些生长因子如BMP或bFGF等，不仅促进成骨细胞增殖、分化，还有利于血管化，加速新骨形成。后凸成形术通过沿导管放人可膨胀性球囊，但膨胀定向性差。新近推出的Sky可扩张器具有可控定向扩张特点，骨水泥渗透率减少，比较安全。