用抑制消减杂交技术研究惊恐致肾虚小鼠差异表达基因

目的用抑制消减杂交技术研究惊恐致肾虚及中药金匮肾气丸治疗后小鼠的差异表达基因.方法实验分模型组、治疗组和对照组,通过"猫吓鼠"法与"水面悬吊应激"法相结合建立小鼠肾虚证动物模型,对治疗组小鼠进行中药金匮肾气丸的治疗.应用SMART(Switch Mechanism At 5 end of RNA Template)技术逆转录并扩增以获取造模及治疗前后小鼠血液的全长总cDNA;运用正向和反向抑制消减杂交技术获得正反2个方向、3种状态下(肾虚、治疗后以及正常生理状态)的6组差异表达cDNA片段,进而获得了6个cDNA文库.结果获得6个cDNA文库,为大规模鉴定、筛选靶基因奠定了基础.结论惊恐所致肾虚与一些基因的差异表达相关,而中药金匮肾气丸能影响这种改变,使其差异表达基因谱趋近于正常生理状态.     

恐伤肾小鼠模型综述

中医在几千年前就把“恐”这一情志列入到了致病因素中。近年来,随着医学心理的研究的日趋深入和扩展,探索心理障碍的产生机制,寻求有效的药物治疗途径已经成为迫切需要解决的课题。在调查研究之后发现,压力恐惧是当前人类致病的一个重要的发病因素,对人体神经、内分泌等多个系统,多脏器都有一定的影响,因此,也越来越引起人们的关注。所以研究惊恐这一心理应激对人体的影响的相关性研究离不开对其模型的制备,所以如何制作出接近人体对恐惧的心理应激模型就显得尤为重要。而且,理想的动物模型能够很好的模拟人类心理行为问题,能够进行整体、细胞、分子和基因各水平的干预。因此,动物模型已经成为心理、精神和神经科学工作者科研中不可缺少的工具。本文拟对医学心理学研究中常用的实验动物模型作一简要概述。     

恐伤母研究子代肾虚的行为遗传

用猫吓孕鼠方法制造母代“恐伤肾”模型 ,然后对子代鼠的自由活动、攀登爬行、趋食、逃离电击区等8种遗传行为进行测试 ,结果发现 :先天肾虚子代鼠可有多种本能行为降低     

中医“恐伤肾”模型血浆中分子物质与巯基含量的变化

探讨了“恐伤肾”模型动物血浆中分子物质与巯基含量的变化,结果表明,“恐伤肾”组小鼠血浆中分子物质升高、巯基降低,与正常对照组的差异有统计学意义,提示中分子物质和巯基均参与了“恐伤肾”的发病机理,且二者一的改变可作为“恐伤肾”所致肾虚亏损的敏感之一。     

恐伤孕鼠对其仔鼠生长发育的影响

目的:观察恐伤孕鼠对其仔鼠生长发育的影响。方法:受孕后的雌鼠用随机取数法分为正常对照组、模型组、补肾组。采用猫恐吓孕鼠的方法造模,造模时间为整个妊娠期间。孕鼠妊娠20天时每组随机抽取1只,取出胎鼠2只断头取脑固定,行光镜观察;仔鼠出生当天每组随机抽取10只测其平均体重,在饲养期间,观察其出牙、开眼、张耳、被毛生长的情况,生后14天再测其平均体重后灌流固定仔鼠脑组织,行光镜观察。结果:出生当天,模型组仔鼠平均体重与正常对照组和补肾组比较,有显著性差异(P<0.05);生后14天,模型组仔鼠平均体重与正常对照组和补肾组比较,有极显著性差异(P<0.01)。模型组仔鼠出牙时间略晚于正常对照组及补肾组(P<0.05),其被毛生长时间明显晚于正常对照组及补肾组(P<0.01)。胎鼠和生后14天仔鼠脑组织光镜观察可见散在片状水肿,神经细胞减少,部分切片可见海马组织层次结构模糊。结论:恐伤孕鼠可造成其仔鼠生长发育迟缓,脑发育障碍,补肾治疗可阻断此损伤的发生。     

学会做自己的心理“医生”

被誉为中国国宝之一的中医学，一开始就将精神心理因素列入致病原因，一方面强调外邪入侵体内而致病，另一方面也不忽视“七情致伤”、“病从心生”。中医学认为，“怒伤肝”、“思伤脾”、“忧伤肺”、“恐伤肾”。又因为心脏为五脏之腑之首，所以喜、怒、忧、思、悲、恐、惊七情中任何情志失调，都可伤及心脏，而心伤则会引起其他脏腑功能的失调。     

好心情是治疗癌症的灵丹妙药

“暴怒伤肝火上头，肺病最怕添忧愁。思虑过度伤脾胃，惊恐伤肾尿自流，过喜气缓心无主，真心剧痛命自休。”     

补肾法临床应用举隅

高冬来老师善于将补肾法可用于呼吸系统、消化系统、血液系统、神经系统、泌尿系统、生殖系统、骨骼系统等多系统疑难杂症的治疗,笔者有幸跟师学习,受益匪浅.现举临床验案于下,供同道参考.     

孕鼠“恐伤肾”对子代胸腺核酸含量的影响

根据中医“恐伤肾”原理,恐吓孕鼠造成子鼠先天肾气亏虚的动物模型,然后检测子鼠胸腺核酸含量。结果表明;恐吓各组ＤＮＡ,ＲＮＡ含量及ＲＮＡ／ＤＮＡ值无有所降低,且恐吓程度越重降低越明显,而在恐吓的同时采用补肾药治疗可以预防这一改变。