凹凸棒对中药中连翘苷吸附作用考察

目的：考察凹凸棒作为吸附澄清剂，对连翘药材、银翘解毒颗粒水煎提取液中连翘苷的吸附作用和对无效成分的吸附清除作用。方法：以水煎提取液中浸出物含量和连翘苷的含量作为评价指标，分别用不同量的普通凹凸棒和酸化凹凸棒处理，连翘药材及银翘解毒颗粒水煎提取液，评价其吸附澄清效果，并与自然静置沉淀法进行比较。结果：普通凹凸棒对无效成分具有较明显的吸附清除作用，对连翘苷含量没有明显吸附影响。酸化凹凸棒对连翘苷含量有较明显的吸附作用，对无效成分也有一定的吸附清除作用。结论：凹凸棒可作为银翘解毒颗粒水煎提取液的吸附澄清剂，尤其是酸化凹凸棒值得作进一步的表面结构修饰研究，以优化其吸附澄清效果。     

微波法与传统法煎煮葛根芩连汤有效成分含量的比较

目的：研究微波法与传统法煎煮中药效果。方法：用微波法与传统法分别制取供试汤剂，用紫外分光光度法测定葛根芩连汤中有效成分盐酸小檗碱、总黄酮含量，以此含量及总固体量为考察指标，比较两种方法煎煮中药效果。结果：微波法与传统法煎煮效果相同（P〉0．05），但微波法与传统法相比有高效、节能、省时的优势。结论：微波煎煮法可代替传统煎煮法煎煮中药。     

胰岛素注射液输注过程中浓度变化规律的探讨

目的:考察胰岛素注射液在输液过程中的浓度变化情况,测定输液瓶对胰岛素的吸附量,以指导临床合理操作.方法:模拟临床胰岛素配液以及输注操作过程,实验分为18组:5%葡萄糖组(玻璃瓶组和塑料瓶组)、10%葡萄糖组(玻璃瓶组和塑料瓶组)和氯化钠组(玻璃瓶组和塑料瓶组),各组又按操作的不同分为振摇组、非振摇组和吸附组,采用紫外分光光度法测定胰岛素浓度.振摇组、非振摇组流速为50滴/min.每输注50mL液体取样测定胰岛素浓度.吸附组每隔10 min轻轻振摇1次,并取液测定浓度.结果:在不同材质输液瓶之间、不同浓度的葡萄糖之间胰岛素浓度变化比较,差异无显著性;在不同种类溶媒中变化趋势不同:在氯化钠注射液中,胰岛素浓度在滴注50mL左右出现极大值,而后逐渐降低达到平稳状态;在葡萄糖注射液中,胰岛素浓度先升高,随后胰岛素浓度降低,在滴注350 mL左右浓度又出现极大值.非振摇组在输注期间普遍出现胰岛素浓度骤然升高现象,而振摇组胰岛素浓度变化较为平稳;不同材质和装有不同溶媒的输液瓶对胰岛素的吸附趋势类似,但塑料瓶对胰岛素的吸附量大于玻璃瓶,装有氯化钠的输液瓶大于葡萄糖输液瓶,10%葡萄糖输液瓶大于5%葡萄糖输液瓶.结论:在胰岛素输液过程中,可通过对输液瓶每隔10 min振摇一次,以有效避免在输液期间出现的胰岛素浓度升高现象,防止其引起的低血糖现象的出现;临床操作时还应考虑到药物的吸附损失.     

复方荜茇胶囊药材提取工艺的研究

目的:优选维吾尔药复方荜茇胶囊中荜茇等药材的醇取工艺.方法:选择乙醇浓度、乙醇用量、提取时间,采用L9(34)正交表,以总黄酮含量、胡椒碱含量、醇浸出物量为指标,进行正交试验.结果:醇提工艺以8倍量70%乙醇提取2次,1.5h/次.结论:可作为该制剂的制备工艺依据.     

正交设计优选痛经丸提取工艺条件的研究

痛经丸由当归、白芍、川芎、熟地黄、丹参等中药制备而成，具有温经活血，调经止痛的功效。用于下焦寒凝血瘀所致的痛经、月经不调，症见经行错后、经量少有血块、行经小腹冷痛、喜暖。丹参的水溶性成分主要以丹参素、原儿茶醛为代表的酚酸类成分，是丹参药材中的有效成分。     

灯盏细辛有效组分对体外培养大鼠大脑皮层神经细胞的影响

目的：研究灯盏细辛有效组分对体外培养鼠大脑皮层神经细胞存活的影响。方法：取出生1d内的乳鼠大脑皮层制成细胞悬液,接种于经多聚赖氨酸包被的96孔板中。于培养6d后,分别加入培养液及不同浓度的灯盏细辛提取物和灯盏乙素继续培养1d,采用MTT比色法测量其存活细胞的吸收值,同时行NSE检查。结果：NSE检查结果表明,培养6 d的存活细胞大部分均为神经元。与空白对照组比较,提取物浓度在0.1~1.6mg/ml,灯盏乙素高浓度时,存活细胞数均明显增加,且有一定的量效关系。结论：灯盏细辛两组分均能促进体外培养的大脑皮层神经细胞存活,且提取物活性较强。     

小归芍超临界提取物对人胃癌BGC-823细胞Bcl-2、PCNA基因表达的影响

目的：研究小归芍超临界提取物对人胃癌BGC-823细胞Bcl-2、PCNA基因表达的影响。方法：通过培养人胃癌BGC-823细胞方法,采用Western Blotting分别检测Bcl-2和PCNA基因蛋白的表达量。结果：小归芍超临界提取物单用体外作用48h能够明显抑制人胃癌细胞BGC-823细胞Bcl-2及PCNA的表达,可能是其抑制肿瘤细胞增殖的机制之一。     

小鼠分泌型内皮抑素原核表达载体pNZ44-ssEndostatin的构建及表达

目的：构建带有小鼠分泌型内皮抑素（ssEndostatin）的原核表达载体pNZ44-ssEndostatin并在双歧杆菌中表达Endostatin蛋白方法：利用引物设计软件oligo6．0设计引物，从pcDNA3.1-Egr1-ssEndostatin质粒上PCR扩增得到ssEndostatin基因。经测序证实获得的ssEndostatin基因序列正确后，进行粘端连接，将ssEndostatin基因链接到pNZ44原核表达载体上，构建成pNZ44-ssEndostatin重组载体，PCR、酶切鉴定正确后电转化到双歧杆菌中然后利用ELISA法检测Endostatin表达。结果：测序结果证实ssEndostatin基因序列与Genebank中所公布的一致，说明ssEndostatin基因扩增正确而且构建的质粒pNZ44-ssEndostatin的PCR、酶切鉴定结果与预测的一致，说明重组质粒pNZ44-ssEndostatin构建成功转化后挑取阳性克隆进行菌落PCR证实重组质粒pNZ44-ssEndostatin已戍功转入双歧杆菌中ELISA法检测到转化有重组质粒pNZ44-ssEndostatin的双歧杆菌的菌体内有较高水平的Endostatin表达，且培养48h的表达量较20h的高，有氧条件下表达较缺氧条件下高，但上清中未捡测到。结论：成功地构建了带有分泌信号的小鼠内皮抑素表达载体pNZ44－ssEndostalin，成功转入双歧杆菌中并在菌体中表达，为后续利用双歧杆菌作为工具进行Endostatin基因治疗奠定了实验基础。     

AKT2通过调控p27表达逆转卵巢癌顺铂耐药

目的：探讨上皮性卵巢癌中蛋白激酶B beta（v-akt murine thymoma viral oncogene homolog2，AKT2）与p27在卵巢癌多细胞球体顺铂耐药中的作用。方法：三维培养获得人卵巢癌多细胞球体（multi—cellular spheroids，MCS）；Western印迹法分析p27及AKT2表达；构建AKT2干扰载体，脂质体法转染A2780细胞后三维培养形成多细胞球体，不同浓度顺铂处理后通过FCM法检测细胞凋亡，MTT法比较细胞对顺铂的敏感性。结果：Western印迹法结果提示，MCS中AKT2及p27的表达高于单层细胞；转染AKT2干扰载体（shRNA—AKT2）的MCS中AKT2、p27表达量较未转染MCS及转染空载体的MCS明显降低。流式细胞仪分解结果表示，不同浓度顺铂作用后，MCS凋亡率明显低于单层细胞；转染shRNA—AKT2的细胞球凋亡率较未转染MCS及转染空载体的MCS升高。MTT法示瞬时转染shRNA—AKT2的细胞球顺铂对细胞抑制率较未转染MCS及转染空载体的MCS升高。结论：干扰AKT2可降低p27的表达，从而逆转卵巢癌对顺铂的化疗耐药。     

牛黄益金片中黄柏质量控制方法的研究

目的:建立牛黄益金片的控制方法,确保药品的质量.方法:用HPLC法测定制剂中盐酸小檗碱的含量.Kromasil Tm C18(200 mm×4.6 mm,5μm)柱;乙腈-江0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH为3.00.05)-0.025 mol/L十二烷基磺酸钠溶液(90:55:55)为流动相;检测波长348 am.结果:盐酸小檗碱0.094 32～0.660 21xg范围内,进样量与色谱峰面积之间呈良好线性关系,r=0.999 3.平均加样回收率为100.29%,RSD为0.58%(n=6).结论:本法专属性强,准确度高,重现性好,可作为该产品质量控制的方法.