地黄饮子对AD细胞模型抗氧能力影响的实验研究

目的:观察地黄饮子对AD细胞模型抗氧能力影响。方法:通过建立β淀粉样蛋白诱导PC12细胞损伤的AD细胞模型,采用脑脊液药理学方法,观察地黄饮子对PC12细胞培养液中CAT、GSH-Px、SOD、MDA含量的影响,探讨地黄饮子对AD细胞模型抗氧能力的作用。结果:地黄饮子能提高PC12细胞培养液中SOD、CAT、GSH-Px的活性,降低培养液中MDA的含量。结论:地黄饮子通过提高AD细胞模型的抗氧化能力,对Aβ所致PC12细胞损伤起到较好的保护作用。     

地黄中松果菊苷对皮质酮诱导PC-12细胞凋亡的抑制作用及机制研究北大核心CSCD

目的观察松果菊苷对于皮质酮诱导的PC-12细胞损伤的保护作用及机制。方法将PC-12细胞分为6组:正常组,模型组(皮质酮500μmol·L^(-1)),阳性对照组(氟西汀0.3μmol·L^(-1))和低、中、高3个剂量实验组(松果菊苷:5,10,20μmol·L^(-1))。24 h后,用噻唑蓝法检测细胞存活率,用流式细胞术检测细胞凋亡率和线粒体膜电位水平,用蛋白质印迹法检测细胞内胱天蛋白酶3(Caspase-3)、剪切的胱天蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和B细胞淋巴瘤-2蛋白相关X蛋白(Bax)的蛋白表达水平。结果正常组、模型组、阳性对照组和低、中、高3个剂量实验组的细胞存活率分别为(100.0±3.1)%,(88.7±1.9)%,(94.3±3.4)%,(101.3±3.1)%,(102.1±1.9)%和(104.3±1.6)%。选择松果菊苷中剂量进行后续实验研究。正常组、模型组、阳性对照组和中剂量实验组的凋亡水平分别为(10.7±0.9)%,(25.5±1.3)%,(17.7±1.7)%和(19.7±0.8)%;这4组的JC-1单体比例分别为(18.7±0.6)%,(52.1±1.4)%,(25.6±0.9)%和(22.6±1.0)%;这4组的Cleaved caspase 3/Caspase 3比值分别为1.01±0.17,1.98±0.29,1.43±0.29和1.34±0.12;这4组的Bax/Bcl-2比值分别为1.23±0.21,3.01±0.81,1.64±0.39和0.91±0.29。上述指标:模型组与正常组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);阳性对照组和中剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论松果菊苷可能是通过抑制线粒体凋亡信号通路降低凋亡水平来改善皮质酮诱导的PC-12细胞损伤。松果菊苷可能是地黄发挥抗抑郁作用的物质基础之一。     

地黄饮子联合舌三针治疗假性球麻痹患者吞咽困难的临床疗效观察

目的：观察用地黄饮子联合舌三针治疗假性球麻痹患者吞咽困难的临床效果。方法：将2013年2月～2014年9月我院收治的假性球麻痹伴有吞咽困难患者68例,随机分为对照组和治疗组各34例。两组患者均给予吞咽康复训练,对照组患者联合给予舌三针治疗,治疗组患者则给予地黄饮子联合舌三针治疗,连续治疗45d。采用洼田氏饮水试验法对吞咽功能进行评估,计算临床有效率。结果：对照组治疗有效率为58.8%,与治疗组有效率85.3%相比明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）;两组患者吞咽功能与治疗前比较改善明显,饮水试验中吞咽等级明显改善,治疗组改善更明显,评分降低,治疗组降低较对照组明显,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：地黄饮子联合舌三针能显著提高假性球麻痹患者的吞咽功能,疗效满意,值得临床深入研究。     

中药提取物对阿尔茨海默病模型大鼠神经细胞凋亡的干预作用

目的 观察β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)大鼠海马双侧注射后大脑组织Caspase-3表达和海马神经细胞超微结构的变化及加减地黄饮子的干预作用.方法 采用大鼠海马立体定向注射凝聚态Aβ1-40诱导阿尔茨海默病(AD)动物模型.采用免疫印迹方法检测大脑组织Caspase-3的表达,通过透射电子显微镜观察海马组织神经细胞超微结构的变化.结果 模型组大鼠大脑组织Caspase-3蛋白表达相对值(2.647±0.603 6)较假手术组(0.901±0.102)明显升高(P<0.05),而加减地黄饮子(1.331±0.105 3)可下调Caspase-3的表达(P<0.05).Aβ1-40可致模型组大鼠海马神经元的胞体质膜下出现大量的脂褐素.游离核蛋白体减少,加减地黄饮子对损伤有不同程度的恢复.结论 加减地黄饮子通过上调Caspase-3蛋白的表达而发挥保护AB对大鼠脑神经细胞的损伤.     

不同方法炮制下熟地黄补血效果比较

目的:对比不同方法炮制下熟地黄的补血效果。方法:将某院共86例贫血患者纳入研究,随机分为观察组和对照组各43例,观察组通过产地加工饮片炮制一体化熟地黄进行治疗,对照组通过传统酒制熟地黄进行治疗,对比两组补血效果。结果:治疗前,两组各项临床指标对比无明显差异(P0.05);治疗后,两组各项临床指标和治疗前相比均有明显差异(P0.05),且组间对比差异明显(P0.05)。结论:产地加工饮片炮制一体化与传统酒制熟地黄治疗贫血均有良好的临床疗效,相比之下,产地加工饮片炮制一体化熟地黄补血效果更好,值得在临床中推广应用。     

不同炮制方法对熟地黄中7种化学成分含量的影响

目的通过建立熟地黄中梓醇、益母草苷、地黄苷A、地黄苷D、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷和5-羟甲基糠醛（5-HMF）7种化学成分同时分析的方法,测定清蒸熟地黄、酒炖熟地黄、九蒸九晒熟地黄3种不同炮制品中7种化学成分的含量,探讨不同炮制方法对熟地黄中化学成分的影响。方法采用超声提取法处理熟地黄3种不同炮制品,赛默飞C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相:0.1%磷酸（A）-乙腈（B）,梯度洗脱,程序为:0~8 min,1% B;8~9 min,1%~4% B;9~25 min,4% B;25~35 min,4%~20% B;35~50 min,20% B;50~50.01 min,20%~1% B;50.01~55 min,1% B。柱温:30℃,检测波长:203 nm、332 nm,测定3种样品中7种化学成分的含量。结果生地黄中未检出5-HMF。清蒸熟地黄和酒炖熟地黄中,环烯醚萜单糖苷梓醇和益母草苷几乎全部降解;环烯醚萜双糖苷地黄苷A、地黄苷D和苯丙素苷毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷的含量较生地黄中含量降低;可以检测到5-HMF。九蒸九晒熟地黄中环烯醚萜单糖苷梓醇和益母草苷、环烯醚萜双糖苷地黄苷A、地黄苷D和苯丙素苷毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷几乎全部降解;可以检测到5-HMF。结论不同炮制方法对熟地黄成分的影响较大,该方法可用于熟地黄不同炮制品的质量控制。     

地黄饮子通过SIRT1-AMPK-mTOR/eNOS通路减轻老龄大鼠脑缺血再灌注损伤

[目的] 探究地黄饮子(Dihuang Yinzi,DY)减轻老龄大鼠脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)的作用机制。[方法] 30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、DY低剂量组(6 g·kg-1)、DY高剂量组(12 g·kg-1)、尼莫地平组(10 mg·kg-1)。建立CIRI模型,进行神经功能评分,血小板聚集实验,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazole chloride,TTC)、苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)和尼氏染色检测脑梗死率及病理改变,流式细胞术测定血小板α颗粒膜糖蛋白140(CD62P)表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)检测沉默信息调节因子2同系物1-腺苷酸活化蛋白激酶-雷帕霉素靶蛋白/内皮型-氧化氮合酶(silent information regulator 2 homolog 1-adenylate activated protein kinase-mammalian target of rapamycin/endothelial nitric oxide synthase,SIRT1-AMPK-mTOR/eNOS)通路相关mRNA表达,免疫印迹法检测各相关蛋白表达情况。[结果] 与假手术组比较,模型组神经功能评分、脑梗死率、血小板聚集率、CD62P表达、腺苷酸活化蛋白激酶(adenylate activated protein kinase,AMPK)mRNA,磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phosphorylation-adenylate activated protein kinase,p-AMPK)和磷酸化一氧化氮合酶(phosphorylation-nitric oxide synthase,p-eNOS)蛋白表达显著上升(P＜0.01),SIRT1、mTOR的mRNA及SIRT1和磷酸化-雷帕霉素靶蛋白(phosphorylation-mammalian target of rapamycin,p-mTOR)蛋白表达显著降低(P＜0.05,P＜0.01),病理染色显示脑组织损伤严重,细胞核固缩。与模型组比较,DY高剂量组神经功能评分、脑梗死率、CD62P表达量、AMPK的mRNA及p-AMPK和p-eNOS蛋白表达显著降低(P＜0.05,P＜0.01),SIRT1、mTOR的mRNA及SIRT1、p-mTOR蛋白表达显著升高(P＜0.05,P＜0.01),病理染色结果显示脑组织损伤情况减轻;尼莫地平组与DY高剂量组相似。[结论] DY能够减轻CIRI引起的脑组织损伤,并起到神经保护作用,其作用机制可能与影响SIRT1-AMPK-mTOR/eNOS通路相关蛋白的表达有关。     

地黄化学成分及其药理作用研究进展

地黄Rehmannia glutinosa为玄参科地黄属植物, 其块根为常用中药。该植物块根和叶中含有大量的环烯醚萜类成分, 同时还存在紫罗兰酮、二苯乙烯、三萜、黄酮、酚酸、木脂素、含氮类、糖及其他类化合物;药理研究表明梓醇等多个成分具有抗心脑血管疾病、神经保护、抗糖尿病及其并发症、抗骨质疏松、增强免疫等多种药理作用。由于中药地黄显著的滋补作用, 历来是研究的热点。对最近5年有关地黄的化学成分和药理研究进行综述, 为进一步研究提供参考。     

HPLC法测定三才封髓丸中地黄苷A、地黄苷D、黄柏碱和木兰花碱

目的 建立HPLC法同时测定三才封髓丸中地黄苷A、地黄苷D、黄柏碱和木兰花碱的方法。方法 采用Phenomenex RP C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;0～28 min地黄苷A和地黄苷D检测波长为203 nm,28～60 min黄柏碱和木兰花碱的检测波长为225 nm;体积流量为1.0 mL/min;柱温为30 ℃;进样量20 μL。结果 地黄苷A、地黄苷D、黄柏碱和木兰花碱在4.52～90.40、4.10～82.00、5.35～107.00、5.28～105.60 μg/mL线性关系良好;平均回收率分别为98.86%、96.95%、99.15%、96.98%,RSD值分别为1.38%、1.24%、1.28%、0.85%。结论 建立的方法简便、准确、灵敏度高、重复性好,可用于三才封髓丸的质量控制。