大肠埃希菌表达的含PTD穿膜序列的融合蛋白3种复性方法比较

目的:探索融合蛋白PTD-NFATminiDBD-eGFP纯化以及复性的条件,以提高其复性效率,为后续融合蛋白生物学功能的研究做准备。方法:表达、提取并纯化包涵体形式的融合蛋白PTD-NFATminiDBD-eGFP,分别用稀释复性、透析复性、柱上复性的方法,对融合蛋白进行复性,分析不同方法的特点及包涵体复性率,采用流式细胞术检测融合蛋白的穿膜活性。结果:3种复性方法得到的融合蛋白复性率依次为:柱上复性得率最高,其次是透析复性,稀释复性得率最低。柱上复性后蛋白的穿膜效率最高,相对较低的是稀释复性,而未复性的融合蛋白穿膜效率极低。结论:3种复性方法均能对PTD穿膜蛋白复性,但以柱上复性最佳。     

准分子激光原位角膜磨镶术治疗复性近视散光的疗效观察

目的探讨准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)治疗复性近视散光的有效性和预测性。方法采用LASIK手术对50例(90只眼)复性近视散光进行治疗。根据散光度大小分为二组:A组-2.25~-3.00 D,B组-3.25~-6.00 D。观察手术前后的视力和屈光度。结果A组术后平均散光度从术前(-2.51±0.68)D下降为(-0.51±0.22)D,B组术后的平均散光度从术前(-3.85±0.46)D下降为(-0.53±0.29)D,术后12个月时两组残留散光度差异无统计学意义(P>0.05)。两组术后的平均裸眼视力均好于术前矫正视力。结论LASIK手术治疗治疗复性近视散光,效果明显。     

重组人白细胞介素—2／粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子融合蛋白的纯化及复性研究

目的：研究重组人白细胞介素-2/粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（IL-2/GM-CSF)融合蛋白纯化及复性的最佳条件。方法：常规方法提取包涵体,用本室专利技术提纯,复性后样品经DEAE-Sepharose FF离子交换层析,获得副合蛋。结果：获得具有生物活性的融合蛋白,其纯度达到95%。结论：此工艺操作简便,纯化效果好,获得率高。     

基因重组蛋白L243诱导表达包涵体的变性、复性与纯化

目的 对来自于日本七鳃鳗的基因重组蛋白L243包涵体进行变性、复性与纯化,以获得成分均一的活性蛋白.方法 以6 mol/L尿素为变性剂,以0.1 mol/L氧化型谷胱甘肽及0.9 mol/L还原型谷胱甘肽为复性剂,对构建于pET23b的日本七鳃鳗L243基因在大肠杆菌Rosetta中表达的包涵体进行了的变性、复性与组氨酸亲和层析纯化.结果 经变性、复性后,获得了均质的L243纯化蛋白,该蛋白的复性率达80%.结论 成功对上述重组蛋白包涵体进行了变性、复性及纯化,为后续与此蛋白相关的生物活性测定奠定了物质基础.     

rhBMP-2m在高浓度条件下的复性

目的:优化高浓度的人骨形成蛋白2成熟肽(rh-BMP-2m)的复性条件.方法: 将工程菌株进行高密度发酵、温度诱导表达,裂菌收集包涵体后经离子交换色谱分离纯化.纯化后的蛋白在不同的温度、复性液pH,氧化交换系统浓度、盐浓度等条件下进行透析复性.透析复性后进行非还原的SDS-PAGE,检测rhBMP-2m活性形式二聚体的含量,同时找出相对较优的复性方法对复性产物进行0.22 μm微孔滤膜除菌并计算其损失率.结果: 经透析复性后rhBMP-2m完全可溶,而且其活性形式二聚体的含量达到30%左右,即复性后二聚体的rhBMP-2m可以达到每升发酵液800 mg,并且经微孔滤膜除菌后rhBMP-2m活性形式二聚体的含量基本没有损失,同时蛋白定量也表明过滤除菌后蛋白损失不超过10%.结论: 高pH有利于rhBMP-2m的复性,除变性剂尿素时采用低pH可以保持高浓度rhBMP-2m复性后仍保持可溶.蛋白质的浓度、pH和温度对蛋白复性的结果影响很大,但盐浓度、氧化交换系统的浓度和透析外液体积对蛋白复性影响不是很大.     

对可复性牙髓炎转变为不可复性牙髓炎的临床分析

从1997年-2006年近10年间，本人陆续治疗了10例可复性牙髓炎经牙体窝洞保髓充填治疗后，转变为有症状不可复性牙髓炎，现介绍如下。[第一段]     

恒磨牙不可复性牙髓炎根管治疗术一次法与失活法临床疗效的对照研究

目的比较恒磨牙不可复性牙髓炎根管治疗术一次法和失活法的疗效差异。方法选择门诊接诊的由于深龋引起不可复性牙髓炎的共计169颗患牙,进行根管治疗术。将患牙随机分为二组：对照纽使用一次法,试验组采用失活法治疗．比较治疗1周后反应和2年后的疗效。结果根管治疗一次法在术后1周内出现不适的有7例;失活法术后1周有3例出现不适。2年后复查．根管治疗一次法成功率90．32％;根管治疗失活法成功率94．12％。经统计学处理和分析,P〉0.05,一次法和失活法的疗效差异无统计学意义。结论虽然恒磨牙不可复性牙髓炎根管治疗术一次法与失活法在疗效上差异无统计学意义,但从2年成功率来看．失活法高于一次法。     

3D打印辅助难复性髌骨脱位外翻膝关节表面置换病例报告

报道1例难复性髌骨脱位外翻膝合并重度骨性关节炎病例,该类病例较罕见,本文根据该病例的特点,采取了膝关节外侧入路及Z型松解外侧支持韧带膝关节表面置换术,疗效满意。     

体外表达人重组肝细胞增强因子rhALR的分离纯化

目的：对大肠杆菌表达的人源重组肝细胞生长肽进行分离纯化获得目的蛋白rhALR。方法：其表达产物在大肠杆菌中以不溶性包含体形式存在，经过超声破菌、包含体抽提、洗涤处理、使包含体纯度达75％以上，用8mol/L尿素变性溶解包含体沉淀后上清直接稀释复性，再经浓缩、透析、离子交换凝胶过滤等系列纯化步骤。结果：纯化后目的蛋白纯度达95％以上。回收率达20％。     

稳定牙合垫治疗颞下颌关节不可复性盘前移位临床分析

目的:分析稳定牙合垫治疗颞下颌关节不可复性盘前移位的疗效。方法:使用稳定牙合垫治疗不可复性盘前移位患者36例,疗程3个月,分别记录治疗前后患者疼痛值(VAS)和开口度变化,进行统计学分析。 结果:患者VAS由治疗前的5.66±1.28减小到1.46±1.14;开口度由(26.93±2.64) mm增大到(38.35±2.04) mm, 具有显著性差异(P＜0.001),但治疗后MRI显示关节盘并未复位。结论:稳定牙合垫治疗颞下颌关节不可复性盘前移位有良好的临床效果,但并非恢复关节盘的位置,而是通过促进关节盘双板区的适应性改建来实现的。