携EGFP的STAT3载体构建、表达及其对HEP-2细胞的增殖抑制作用

目的 构建携EGFP的信号转导与转录激活因子(STAT)3 mRNA的小RNA干扰(siRNA)表达载体,并检测STAT3表达及其对HEP-2细胞增殖的抑制作用.方法 合成用于产生针对STAT3的小发卡状RNA(shRNA)寡核苷酸,克隆到PGPU6/EGFP/Neo载体中,BbsⅠ和BamHⅠ双酶切及测序鉴定重组体,并转染HEP-2细胞.流式细胞仪、RT-PCR、免疫印迹、MTT法检测HEP-2细胞中STAT3的表达及该细胞的增殖情况.结果 成功构建STAT3-siRNA表达载体,转染HEP-2后可显著抑制细胞STAT3 mRNA及蛋白的表达,细胞增殖活性显著降低(P<0.05). 结论 用pGPU6/EGFP/Neo载体,针对不同靶位点构建的STAT3-siRNA表达载体可有效抑制喉癌细胞增殖及其STAT3的表达.     

几种体外培养条件下间日疟原虫红内期裂体增殖

在培养液成分基本不变的情况下,观察几种体外培养条件的间日疟原虫红内裂体增殖.实验组为:烛缸静止培养,重复点烛烛缸静止培养,低氧静止培养,两种试管深层悬浮培养。引种用了两个虫株,起始培养采用冷冻虫血复苏和现症疟疾病人新鲜虫血直接引种。除棉塞试管深层悬浮组不能支持裂体增殖外,其他组均至少不同程度地完成两个裂殖周期;在低氧下,原虫发育更正常。观察发现,间日疟原虫分离株在体外培养中是重要的。     

VEGF对体外培养的脐静脉内皮细胞增殖和迁移能力的影响

目的探讨血管内皮细胞生长因子（VEGF）对体外培养的脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖和迁移能力的影响。方法以VEGF基因转染HUVECs和在培养液中加入VEGF蛋白后培养HUVEC,用RT-PCR法检测VEGF mRNA的表达鉴定转染的效果,用3H-TdR掺入法检测VEGF对HUVECs增殖的影响,用划痕实验观察VEGF对HUVECs迁移能力的影响。结果转染VEGF基因的HUVECs中VEGFmRNA的表达高于对照组,表明转染成功。3H-TdR掺入法和划痕实验显示,转染VEGF基因和在培养液中加入VEGF蛋白,都可促进体外培养的HUVECs增殖和迁移。结论VEGF能够促进体外培养的HUVECs增殖和迁移;将VEGF基因导入细胞与直接在培养基中加入VEGF蛋白具有相同的效果。     

黄芪、莪术配伍对胃癌细胞COX-2表达的调节作用

目的:观察黄芪、莪术配伍对MKN-45细胞COX-2、PPlAR-Y、NF-KB的影响.方法:以黄芪、莪术配伍作用于MKN-45细胞,并设塞莱希布组、罗格列酮组、黄芪组、莪术组和空白组相对照.用MTT法观察各组药物对胃癌细胞的抑制率,用RT-PCR以及Western blot方法检测给药后人胃癌细胞COX-2、PPARy、NF-KB基因及COX-2蛋白表达的变化.结果:各组对COX-2和NF-KB的mRNA表达均有抑制作用,除莪术外对PPARy mRNA均有促表达作用,其中以塞莱希布组和配伍组对COX-2 mRNA表达的抑制作用最为明显,且配伍组作用明显强于黄芪组和莪术组,以罗格列酮组和配伍组对NF-KB mRNA的表达抑制作用和对PPARy表达的促表达作用都是最明显.结论:黄芪、莪术配伍能起到增效作用,对细胞的抑制效应明显,对COX-2的抑制作用大于黄芪、莪术的单独效应,与塞莱希布相近,其对COX-2的抑制作用可能是通过PPARy/NFKB信号途径发挥作用的.     

胰腺癌组织Survivin的表达与细胞凋亡、增殖的关系

目的:观察胰腺癌组织Survivin的表达与细胞凋亡、增殖的关系.方法:采用TUNEL法和免疫组化法检测64例胰腺癌及癌旁组织的细胞凋亡指数(AI)与增殖指数(PI)及Survivin表达,分析AI、PI与Survivin表达和临床病理因素的相关性.结果:Survivin蛋白在癌旁组织无表达,在胰腺癌组织阳性率为87.9%,两者比较差异显著(P<0.001).AI与年龄、性别及肿瘤部位无关,随胰腺癌组织分化程度的增加而增加,癌旁组织显著高于胰腺癌组织(30.47% vs 1.64%,P<0.001):PI与年龄、性别、肿瘤部位及淋巴结转移无关,而与癌组织的分化程度相关,随着胰腺癌分化程度的降低而增加.从分化程度观察,胰腺癌组织AI与Survivin表达水平呈负相关(r=-0.85),PI与Survivin表达水平呈正相关(r=0.87);从有无转移来看,胰腺癌AI与Survivin表达水平呈负相关(r=-0.81).结论:Survivin凋亡抑制基因在胰腺癌发生和发展中起重要作用.     

凋亡相关基因caspase-9,Bax在大肠腺瘤和大肠癌中的表达及意义

目的 探讨细胞凋亡相关基因caspase-9、Bax在大肠癌发生、发展中的可能作用及相互关系。方法 采用免疫组织化学S-P法和TUNEL技术分别检测20例正常大肠黏膜,48例大肠腺瘤,56例大肠癌中caspase-9,Bax蛋白的表达水平及细胞凋亡。结果 Caspase-9在正常大肠黏膜,腺瘤,癌组织中的表达率分别为5.00％、33.33％、64.29％,三者间有明显差异(P<0.01),在腺瘤和癌组织中其表达均高于正常黏膜;Bax在三者间的表达率分别为5.00％、27.08％、57.14％,三者间亦有明显差异(P<0.01)。大肠癌及大肠腺瘤中的细胞凋亡率显著高于正常黏膜(P<0.01),随着癌组织分化程度的下降,凋亡率逐渐降低。caspase-9,Bax的阳性表达与凋亡指数呈密切相关(P<0.01);Caspase-9,Bax的表达均与癌组织的分化程度有关,与病理因素无关。结论 在大肠癌细胞的凋亡过程中,caspase-9可能参与了大肠癌的凋亡,caspase-9和Bax在细胞凋亡的调节中可能存在密切关系。     

p27蛋白在肺腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨p27蛋白在肺腺癌的表达及临床意义.方法 应用免疫组化技术检测44例肺腺癌患者的p27蛋白表达,分析p27蛋白表达与性别、年龄、肿瘤大小、临床分期、分化程度和淋巴结转移以及预后的关系.结果 p27蛋白水平与肺腺癌的分化程度相关,与患者的年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移、TMN分期无关.p27蛋白低表达者的平均生存期（18.6个月）明显低于p27蛋白高表达者（34.5个月）.结论 p27蛋白表达可以作为评价肺腺癌恶性程度和预后的一个重要指标.     

氧化苦参碱对大鼠肝星状细胞增殖的影响

目的:研究氧化苦参碱对大鼠肝星状细胞增殖的影响,探讨其抗肝纤维化的机理。方法:用链霉蛋白酶和胶原酶原位灌流,Nycodenz密度梯度离心分离大鼠肝星状细胞,并以MTT比色法观察氧化苦参碱对肝星状细胞增殖的效应。结果:氧化苦参碱可影响肝星状细胞的增殖,氧化苦参碱浓度在0.5～16μg/ml时对肝星状细胞增殖有抑制作用(P<0.01)。结论:氧化苦参碱可抑制肝星状细胞增殖,有抗肝纤维化的作用。     

直肠癌内分泌样癌细胞分化与P^53蛋白表达关系的研究

目的：研究直肠癌内分泌样癌细胞分化与Ｐ＾５３蛋白表达的关系及意义。方法：采用免疫组织化学ＡＢＣ法检测４４例福尔马林固定、石蜡包埋的直肠癌手术切除及活检组织中的嗜铬蛋白Ａ（ＣＧＡ）及Ｐ＾５３蛋白的表达。结果：Ｐ＾５３、ＣＧＡ阳性表达率分别为６８．２％和３８．６％：ＣＧＡ阳性及阴性直肠癌Ｐ＾５３表达率分别为８８．２％和５５．６％，两者比较Ｐ〈０．０２５Ｘ＾２检测；Ｐ＾５３ＣＧＡ在分化差的直肠癌中的表达     

中药氧气雾化对非增殖期糖尿病视网膜病变临床疗效观察

目的观察中药氧气雾化熏眼对于非增殖期糖尿病视网膜病变的临床疗效。方法 2017年10月-2018年5月将该院符合纳入标准的68例患者随机分为两组:试验组33例,对照组35例。对照组采取常规中西医治疗和护理控制血糖基础上对患者使用聚乙烯醇眼药水滴眼,试验组在对照组的基础上对患者进行中药氧气雾化熏眼,7 d为1个疗程,所有患者均干预2个疗程,观察比较两组干预前后视力、眼底改变、中医临床症候、视觉诱发电位的变化情况。结果试验组治疗总体有效率大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),试验组通过中药氧气雾化熏眼治疗之后中医证候积分优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),试验组在干预后提高视觉诱发电位疗效方面优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论中药氧气雾化对治疗非增殖期糖尿病视网膜病变临床疗效确切且显著。