HPLC法测定齿囊耙齿菌固体发酵产物中麦角甾醇含量

目的建立齿囊耙齿菌固体发酵产物中麦角甾醇含量的测定方法。方法采用高效液相色谱方法,汉邦ODS-C18色谱分析柱(250×4.6mm,5μm),流动相为100%甲醇,流速1.0m L/min,检测波长282nm;柱温30℃。结果麦角甾醇进样量在0.20~1.40μg之间与吸收峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999;平均加样回收率为100.07%,RSD(%)=1.91%。方法具有较高的专属性、准确性、重现性和可行性。结论该方法简便、准确、灵敏度好,为齿囊耙齿菌固体发酵产物质量评价提供了可靠依据。     

含硫化合物对头孢菌素发酵的影响

本文报道D-、L-、DL-蛋氨酸、硫酸钠、硫代硫酸钠等对头孢菌素摇瓶发酵的影响。添加D-蛋氨酸,后效价最高。硫酸盐和蛋氮酸分别促进发酵前期和后期效价的增长。菌体内蛋氨酸的累积表明胞内蛋氨酸对头孢菌素的生物合成有特殊作用。这些结果对头孢菌素生产的代谢调控具有重要参考价值。     

下呼吸道非发酵菌感染的临床特点及耐药性分析

目的：了解下呼吸道多重耐药非发酵菌临床分布及耐药情况,为合理应用抗菌药物提供依据。方法菌株来自2012年1月~2014年1月本院呼吸科送检的590例下呼吸道标本进行细菌学培养,菌种采用法国生物梅里埃公司API系统进行细菌鉴定,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,使用WHONET 5.5软件作统计分析。结果本院呼吸科送检的590例下呼吸道标本中共分离出病原菌160株（同一患者的多次分离株只做1次分离）,其中铜绿假单胞菌107株,占66.88%,鲍曼不动杆菌18株,占11.25%,嗜麦芽窄食单胞菌11株,占6.88%。铜绿假单胞菌抗生素耐药率从高到低依次为氨苄西林/舒巴坦100.0%、四环素90.0%、氯霉素83.0%、头孢噻肟71.4%、氨曲南50.0%、哌拉西林47.2%、庆大霉素42.2%、头孢他定38.6%、头孢哌酮36.4%、左氧氟沙星32.6%、头孢吡肟29.4%、阿米卡星28.9%、哌拉西林/他唑巴坦6.2%、亚胺培南0%、多黏菌素E 0%。鲍曼不动杆菌属耐药率从高到低依次为头孢哌酮100.0%、头孢噻肟100.0%、头孢吡肟100.0%、头孢他定87.5%、哌拉西林87.5%、庆大霉素83.5%、四环素80.0%、氨曲南75.0%、氯霉素71.4%、左氧氟沙星66.7%、阿米卡星28.6%。嗜麦芽窄食单胞菌耐药率从高到低依次为氨苄西林/舒巴坦100.0%、四环素100.0%、氯霉素100.0%、头孢噻肟100.0%、氨曲南100.0%、哌拉西林100.0%、庆大霉素100.0%、阿米卡星100.0%、哌拉西林/他唑巴坦100.0%、头孢他定75.0%、亚胺培南66.6%、头孢吡肟60.0%、多黏菌素E 33.3%、左氧氟沙星25.0%、复方磺胺甲恶唑0%。结论下呼吸道多重耐药非发酵菌以铜绿假单胞菌为主,对抗菌药物呈多重耐药,临床应及时采集标本,作病原学检测及药敏试验,并根据药敏试验结果合理选用抗菌药物,以提高诊疗效果。     

aveD基因失活提高阿维菌素工业菌株B组分产量

目的 破坏除虫链霉菌aveD基因,提高阿维菌素B1a的发酵单位.方法 将aveD基因内部364bp的SmaⅠ-SmaⅠ片段以相反的方向插入到原位置,构建重组质粒pUAmT-D7,并转化到阿维菌素工业生产菌Streptinomyces avermitilis G-8,筛选得到ave基因失活的基因工程菌G8-17.结果 发酵结果表明,G8-17不产维菌素A组分,而B组分的发酵单位则有相应的提高,其中有效组分B1a的发酵单位提高了33.6％.结论 aveD基因内部片段倒位没有影响下游与之共转录的基因aveF的表达,同时能有效阻断阿维菌素A组分的产生,提高B组分的发酵单位.     

重组人白介素18的发酵、纯化及功能鉴定

目的:利用构建的重组菌株Pichia pastoris X-33/hlL-18,在3.7L发酵罐中表达重组人自介素18(hIL-18),探讨其大规模发酵及纯化工艺.方法:复苏工程菌X-33/hIL-18于BMGY培养基,在其A600鲫达到6左右时转入发酵罐进行高密度发酵.发酵液经过滤浓缩柱、疏水层析和阴离子交换层析分离纯化.结果:工程菌在3.7 L发酵罐采用甲醇诱导补料批式发酵,在pH 6.0,溶氧值(DO)20%～30%,温度28℃,甲醇诱导48 h重组hIL-18的表达产量为202 mg/L,发酵液经纯化后纯度可达97%以上,并初步证明重组hIL-18能协同IL-2诱导PBMCs分泌IFN-γ和协同IL-2增强NK细胞的杀伤活性.结论:利用Pichia pastoris分泌型表达系统和建立的分离纯化方法,能获得大量较高纯度的重组hIL-18,为进一步研究其活性和功能奠定基础.     

Phyton发酵产品多西他赛获欧洲药典合格证

近日,Phyton Biotech生物技术公司（以下简称＂Phyton＂）的多西他赛药物活性成分成功获得了欧洲药品质量管理局（EDQM）颁发的欧洲药典合格证（CEP）。Phyton是优质紫杉醇和多西他赛药物活性成分的全球供应商,也是首家获得多西他赛欧洲药典合格证的北美及欧洲区域原料药供应商。     

钴60与紫外线复合诱变选育L-鸟氨酸高产菌株

目的 诱变选育L-鸟氨酸高产菌株.方法 以谷氨酸棒杆菌S9114为出发菌株,经60Co γ射线和紫外线复合诱变处理,选育出L-鸟氨酸的高产菌株,研究其最佳发酵条件.结果 选育出一株L-鸟氨酸的高产菌株HG106-25,遗传标记为精氨酸营养缺陷型 磺胺胍抗性(Arg- SGr).结论 突变株HG106-25在优化发酵条件后,摇瓶发酵4-5 d,L-鸟氨酸平均产量为14.7 g·L-1,达较高水平,可进行放大试验.     

海洋真菌Penicillium sp.产抗肿瘤天然产物brefeldin A的发酵优化研究

目的 对海洋来源真菌Penicillium sp.产抗肿瘤天然产物brefeldin A的发酵优化,以期获得高产率目标化合物。方法 运用单因素实验设计,重点考察了培养方式、发酵培养基组成 (如碳源、氮源、盐度等)以及培养条件 (温度、摇床转速)等因素。结果 最佳发酵条件为：马铃薯200 g/L,麦芽糖10 g/L,淀粉20 g/L,海盐15 g/L,28 ℃, 摇床转速160 r/min,培养14天。结论 在该发酵条件下,brefeldin A的实际产量达到40 mg/L,较优化前提高了近10倍。     

角质细胞生长因子-2的发酵及纯化工艺研究

目的研究重组人角质细胞生长因子 2 (rhKGF 2 )工程菌的高密度发酵和提纯工艺。方法通过增加培养基营养成分 ,发酵过程补加葡萄糖 ,获得高产率菌体。细菌裂解液经硫酸铵沉淀、分子筛、肝素亲和色谱和离子交换色谱等方法进行纯化 ,电泳分析结果。结果每 1L发酵液可获得菌体 12 .2g ,表达率达 2 8.7%。纯化后rhKGF 2纯度达 97%。结论rhKGF 2工程菌可获得高密度发酵。纯化工艺适用于rhKGF 2的大量制备     

刺五加复合果醋的制作工艺研究

目的 研制开发刺五加复合果醋.方法 以刺五加、五味子、苹果为原材料,经过酒精发酵和醋酸发酵酿造复合果醋.采用单因素实验、正交实验与感官评价实验获得色泽、口感最佳的复合果醋.结果 正交实验确定酒精发酵最佳工艺条件:发酵温度28℃,初始糖度20％,酵母接种量0.6％,初始pH为3.醋酸发酵的最佳工艺条件:醋酸菌接种量0.0...