转化生长因子-α和myc癌基因蛋白在卵泡发育与黄体形成及退化中的表达

目的：探讨转化生长因子（ＴＧＦ）－α和ｍｙｃ癌基因蛋白（ｍｙｃ蛋白）对人卵巢卵泡发育的局部调控机理。方法：收集３６例月经规则、因不同妇科情况切除的子宫及卵巢标本，采用免疫组织化学方法，研究ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白在卵巢组织中的表达。结果：卵母细胞在始基卵泡阶段，ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白的表达呈强阳性，随着卵泡的发育与成熟表达逐渐减弱。在颗粒细胞中，ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白表达均出现在窦前卵泡阶段，随卵泡的增大与成熟，ＴＧＦ－α表达逐渐增强。闭锁卵泡中ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白表达仅限于卵泡膜细胞。在晚期退化的黄体中，ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白表达均局限于黄体中央瘢痕周围的黄体膜细胞。结论：ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白作为卵巢内局部的调节因子，通过自分泌和旁分泌途径，协同参与人卵母细胞最初的生长、卵泡细胞的增殖分化和黄体细胞凋亡的过程。     

Apoptin-肿瘤基因治疗的新选择

人类肿瘤是在各种致瘤因子的作用下，局部组织的细胞在基因水平上对其生长失去正常调控，导致克隆性异常增生而来。其机制，一般认为是由于细胞原癌基因的激活和／或抑癌基因的失活造成的。当上述基因非正常表达的时候，细胞的正常增殖、分化和凋亡等一系列生命过程出现异常，既表现为细胞的无限增殖、分化不良与凋亡减少。结果新生细胞不断产生、细胞的生存期延长。凋亡率下降使细胞数目不断增加导致局部生长优势，形成肿瘤。除了肿瘤细胞自身过度增殖以外，凋亡的异常在肿瘤发生、发展、结局等过程中起重要作用。     

高三尖杉酯碱对Jurkat细胞端粒酶活性的影响及机制研究

目的 探讨高三尖杉酯碱（HHT）对人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞端粒酶活性的影响及其机制.方法 采用改良的Krupp荧光素标记的端粒重复扩增（TRAP）方法检测HHT对Jurkat细胞端粒酶活性的影响.半定量RT-PCR方法检测HHT作用后Jurkat细胞端粒酶逆转录酶（hTERT）及c-myc原癌基因mRNA的表达水平.结果 HHT对Jurkat细胞端粒酶活性及hTERTmRNA、c-myc基因mRNA表达有明显抑制作用.结论 HHT可通过下调hTERT基因转录抑制淋巴细胞的端粒酶活性.c-myc可能参与调控淋巴细胞hTERT基因转录.     

肺神经内分泌癌组织中c-myc和E2F1蛋白表达的临床病理意义

目的:探讨转录因子c-myc和E2F1蛋白在肺神经内分泌癌组织中的表达及其临床病理意义。方法:采用免疫组化SP法检测90例多种肺神经内分泌癌组织中c -myc及E2F1蛋白表达,并分析其与各临床病理指标的关系。结果:c- myc和E2F1蛋白表达定位于癌细胞核;c- myc蛋白表达与组织学类型、临床分期、淋巴结转移、肿瘤大体类型以及预后相关,P<0. 05(P值分别为0. 041、0 .003、0 .019、0. 033和0 .000),与患者性别、年龄无关,P>0 05(P值分别为0 069 和1 000);E2F1表达与组织学类型、临床分期、淋巴结转移、肿瘤大小、预后有关,P<0 .05(P值分别为0. 000、0. 001、0. 000、0 .011和0 .000),与患者性别、年龄无关,P>0. 05(P值分别为0. 105和0 .844)。结论:c- myc、E2F1 蛋白在肺神经内分泌癌的发生、演进过程中起着重要作用,并可作为分子指标检测患者预后。     

肺癌组织中P-选择素和nm23蛋白的表达及其与肿瘤转移的关系

目的探讨P-选择素和nm23蛋白的表达与肺癌转移的关系。方法用免疫组化法检测20例癌旁肺组织和76例肺癌组织中P-选择素和nm23蛋白的表达。结果P-选择素在肺癌各组织学类型、组织学分级中表达差异无统计学意义,χ2=0.308,P=0.857;在肺癌淋巴结转移组中表达率62.00%(31/50),显著高于无淋巴结转移组34.62%(9/26),χ2=5.145,P=0.023;肺癌Ⅲ期、Ⅳ期中阳性率分别为71.43%(15/21)、82.35%(14/17),显著高于Ⅰ期23.81%(5/21)、Ⅱ期35.29%(6/17),χ2=17.000,P=0.000。nm23蛋白在肺癌各组织学类型、组织学分级、TNM分期中表达差异无统计学意义,χ2=2.952,P=0.086;在癌旁组织和肺癌中表达差异无统计学意义,χ2=1.868,P=0.172;在肺癌淋巴结转移组中表达率60.00%(30/50),显著低于无淋巴结转移组88.46%(23/26),χ2=6.566,P=0.010。结论P-选择素高表达提示肺癌高浸润风险,nm23蛋白对肺癌淋巴结转移起抑制作用,P-选择素高表达和nm23蛋白低表达有明显相关性。     

血压平逆转2K1C肾性高血压大鼠左室重构的作用及其机理的研究

目的:研究血压平逆转二肾一夹肾性高血压大鼠左室重构的作用及其机理。方法:建立2K1C肾性高血压大鼠(RHR)模型,术后8周40只RHR随机分为5组,每组8只,分为:血压平大、中、小剂量组(73、36.5、18.25g·kg-1·d-1);依那普利组(10g·kg-1·d-1);模型组,另取8只大鼠作为假手术对照组。模型组和假手术组灌服等容量水,疗程8周。手术前及术后每周测血压1次,给药第8周末,各组测量大鼠体重(BW),眼眶放血2ml,断头处死大鼠,迅速取出心脏,去除心房、右室游离壁,左室及室间隔称重(LVW),计算LVW/BW之比。采用放免法检测血清PCⅢ,心肌组织石蜡切片HE染色及SP免疫组化染色高清晰度图像分析系统测量心肌细胞形态参数及原癌基因cmyc和cfos表达阳性细胞的平均光密度值。结果:血压平降低血压,降低左室重量(LVW)、左室重量指数(LVW/BW)、心肌细胞体积及血清PCⅢ含量,抑制原癌基因cmyc和cfos的表达,血压平大、中剂量组LVW、LVW/BW及血清PCⅢ含量明显低于模型组(P<0.01),图像分析心肌细胞形态参数(面积、周长、平均直径、长径及短径)及cmyc、cfos表达阳性的心肌细胞平均光密度值明显低于模型组(P<0.01),与假手术组接近(P>0.05)。结论:复方中药血压平具有逆转2K1C肾性高血压大鼠左室重构的作用,其降低血压和血清PCⅢ含量、抑制Ⅲ型胶原合成、防治心肌纤维化及降低原癌基因cmyc和cfos的表达、抑制心肌细胞肥大、减轻左心室肥厚是其逆转二肾一夹肾性高血压大鼠左室重构的部分机制。     

重组人Bcl-2腺病毒载体的构建与鉴定

目的　构建人bcl-2重组腺病毒载体。方法　通过酶切分析获得正向插入目的基因的真核表达载体pcDNA/bcl -2 ,然后将bcl -2定向克隆到腺病毒穿梭质粒pAdCMV中 ,通过体内同源重组 ,重组质粒与质粒pJM17共转染 2 93细胞 ,获得复制缺陷型重组腺病毒AdCMV/bcl -2 ,进行扩增、纯化。通过PCR检测病毒DNA ,空斑实验检测病毒滴度。结果　腺病毒穿梭质粒与pJM17体内同源重组后获得含目的基因的重组腺病毒 ,病毒滴度为 2 0× 10 1 0 pfu/ml。结论　基因重组腺病毒载体能成功获得高滴度含目的基因的腺病毒     

硒对大鼠肝细胞凋亡和原癌基因c-myc、c-fos和c-jun表达的影响

目的　研究亚硒酸钠对大鼠肝细胞凋亡和原癌基因c myc、c fos和c jun表达的影响。方法　选用大鼠 ,每组 5只 ,用 5、10和 2 0 μmol/kg亚硒酸钠腹腔注射染毒。用末端标记法 (TUNEL)、流式细胞术检测细胞凋亡 ,用Northern斑点杂交方法研究原癌基因c myc、c fos和c jun的表达。结果　 5、10和 2 0 μmol/kg的亚硒酸钠染毒大鼠 ,不仅能诱导大鼠肝细胞凋亡 ,细胞凋亡率均较对照组 ( 2 2 2± 0 43 ) %显著增高 ,分别为 ( 3 72± 1 76) % (P <0 0 5 )、( 5 82± 1 42 ) % (P <0 0 1)和 ( 11 76± 1 87) % (P <0 0 1) ,而且还存在着明显的剂量 反应关系。 5、10和 2 0 μmol/kg的亚硒酸钠也能引起大鼠肝细胞c myc、c fos和c junmRNA明显增多 ,免疫组化分析可以检测到表达产物c Myc ,c Fos和c Jun蛋白 ,说明这 3种原癌基因表达增强。结论　一定剂量的亚硒酸钠可以诱导大鼠肝细胞凋亡和原癌基因c myc、c fos和c jun的表达增强     

镉应答癌基因蛋白对细胞原癌基因表达的影响

目的探讨镉应答癌基因蛋白(TEF-1δ编码蛋白)对多种不同细胞肿瘤相关基因表达的影响，以阐明镉的分子致癌机制。方法应用TEF-1δ基因真核细胞稳定表达系统和Western blot检测技术，用各种单克隆抗体检测细胞肿瘤相关基因蛋白的表达情况。结果相对于载体转染中国地鼠卵巢细胞(CHO)对照细胞，在4株具有高效稳定表达TEF-1δ编码蛋白质的CHO细胞系中均有细胞原癌基因C-fos高表达，其编码蛋白(55kDa)含量均明显高于对照组。同样，4株高效稳定表达TEF-1δ编码蛋白质的CHO系均具有相对较高的细胞周期调控基因Cyclln D1(编码蛋白36kDa)的表达。其余肿瘤相关基因蛋白如pan-ras，c-myc，c-jun，MDM2，ODC，p16，p53的表达在TEF-1δ转基因细胞与对照细胞之间未见明显差别。结论镉应答原癌基因TEF-1δ的超额表达可调高细胞原癌基因c-fos和细胞周期调控基因Cyclin Dl的表达，这可能是镉应答原癌基因TEF-1δ的分子致癌机制。     

BRAF原癌基因与甲状腺癌关系的研究进展

甲状腺癌是最常见的内分泌系统恶性肿瘤，其发病率为30～40／100万，占人类所有恶性肿瘤的1％～2％。其中甲状腺乳头状癌（Papillary thyroid carcinoma，PTC）最多，占60％～80％，多见于年轻女性和儿童。大多数PTC诊断相对容易，然而，对于一些不典型的甲状腺癌除了常规病理学检查学以外，尚需借助一些特异的分子生物学标记对其进行诊断，进而还可探讨其发病机制，从而为临床靶基因治疗提供依据。以往的研究表明，甲状腺癌是比较少见的由特异性染色体异位、嵌合、基因融合及突变而引起的上皮细胞恶性肿瘤。最近研究发现的BRAF基因与甲状腺乳头状癌关系密切，现就其研究进展作一综述。