多药耐药基因1 C3435T和C1236T多态性与癫痫患者苯巴比妥血清药物浓度的关系

目的以中国汉族癫痫儿童为研究对象,探讨多药耐药基因1(MDR1)基因C3435T和C1236T多态性对抗癫痫药苯巴比妥药物浓度的影响。方法符合癫痫诊断标准的癫痫患者90例,服用苯巴比妥,抽取受试者外周静脉血,采用PCR-限制性片段长度多态性方法对服用苯巴比妥癫痫患者进行MDR1基因C3435T和C1236T分型,同时采用荧光偏振免疫法测定苯巴比妥的血清浓度,比较不同基因型间苯巴比妥(PB)血清浓度差异。结果 MDR1基因C3435T多态性中,PB在基因型CT、CC和TT基因型中血清浓度分别为7.02±0.89μg·m L-1,8.12±1.0μg·m L-1,6.32±0.78μg·m L-1;3基因型间差异无统计学意义(P>0.05)。MDR1基因C1236T多态性中,苯巴比妥在CT、CC和TT基因型血清浓度分别6.72±0.91μg·m L-1,7.13±0.8μg·m L-1,8.2±0.63μg·m L-1;3基因型间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MDR1基因C3435T和C1236T多态性不影响抗癫痫药苯巴比妥药物浓度。     

局麻药的急性耐受性:可能只是药物浓度降低的表现

为了了解布比卡因在硬膜外腔的浓度变化情况,作者设定了估算条件,依此来计算硬膜外腔布比卡因的浓度。从计算的结果发现:1给予常用浓度的维持量后,硬膜外腔布比卡因的浓度降低;维持肌肉松弛的时间缩短。2提高维持量的浓度,硬膜外腔的布比卡因能维持较高的浓度,达到较好的肌肉松弛度。由此提出假说:1局麻药的急性耐受性(tachyphylaxis/acute tolerance)是局麻药浓度降低的表现;2提高维持量的浓度可以克服局麻药的急性耐受性。     

抑癌基因Reprimo启动子区甲基化在胃癌中表达及其临床意义

目的:检测胃癌中抑癌基因Reprimo启动子区甲基化状态及蛋白的表达,探讨Reprimo启动子区甲基化在胃癌发生发展中的作用及临床意义。方法:采用甲基化特异聚合酶链反应(MSP)及免疫组化(SP法)检测慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生(36例)、异型增生(23例)、胃癌(42例)标本中Reprimo基因启动子区的甲基化及蛋白表达情况,并与正常胃粘膜组织(20例)作为对照进行对比分析。结果:肠上皮化生、异型增生和胃癌中Reprimo基因启动子区甲基化阳性率依次升高。正常对照组未检出甲基化,与异型增生和胃癌相比差异有统计学意义。Reprimo基因启动子区甲基化在异型增生和胃癌中的阳性率显著高于肠上皮化生组。Reprimo蛋白表达率依次降低且明显低于正常对照组,启动子区甲基化与蛋白表达呈显著负相关。结论:在胃癌发生发展过程中Reprimo基因启动子区发生了甲基化,其高甲基化状态影响了Reprimo蛋白的表达,可能参与胃癌的发生发展,是胃癌发生的早期分子事件。     

207例抗癫痫药物血药质量浓度测定结果分析

目的探讨抗癫痫药物血药质量浓度监测对抗癫痫药物合理应用的意义。方法建立我院抗癫痫药Access数据库,回顾性分析我院所监测的207例样品。结果 207例样品的患者控制有效率为76.32%。结论监测癫痫患者服药后的血药质量浓度,对临床及时调整给药方案、降低癫痫的发作率、减少癫痫药物的不良反应具有重要的意义。     

黄奇楠生物活性和化学成分的研究

目的研究黄奇楠的生物活性,并分析其化学成分。方法对黄奇楠乙醚提取物进行抗菌、抗肿瘤、乙酰胆碱酯酶抑制和降血糖活性测试,然后应用HP6890/5975C GC/MS联用仪分析其化学成分。结果乙醚提取物对金黄色葡萄球菌、慢性髓原白血病细胞K562、人胃癌细胞SGC-7901、乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶均表现出较好的抑制活性。同时,GC-MS检测到30个成分(相对含有量为91.46%),并鉴定了其中26个化合物,包括16个倍半萜类成分(相对含有量为52.94%)和3个2-(2-苯乙基)色酮类成分(相对含有量为16.09%)。其中,有7个倍半萜具有香味(相对含有量为36.29%)。结论黄奇楠乙醚提取物具有抗菌、抗肿瘤、乙酰胆碱酯酶抑制和降血糖活性,并含有多种化学成分,主要为倍半萜类型。     

银杏内酯B对谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的:探讨银杏内酯B对谷氨酸诱导的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞凋亡的保护作用及其机制。方法:用2mmol/L谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞凋亡建立模型,以不同浓度的银杏内酯B(10、50和250μmol/L)进行保护,MTT比色法检测细胞存活率;Hoechst 33258染色法观察药物作用后细胞凋亡的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Fura-2/AM双波长荧光法测定细胞内钙离子浓度;Western blot检测线粒体和胞浆中Cyt C蛋白的表达。结果:2 mmol/L谷氨酸作用SH-SY5Y细胞24 h后细胞存活率为0.721±0.013,与正常组相比明显降低;细胞核固缩裂解,呈凋亡特征性改变;细胞凋亡率为(13.27±0.08)%、细胞内钙离子浓度为359±11 nmol/L,均明显升高。与凋亡组相比,银杏内酯B(10、50、250)μmol/L保护组细胞存活率分别为0.768±0.014、0.819±0.013、0.897±0.010,均明显升高;细胞核核固缩裂解减少,形态有所改善;细胞凋亡率分别为11.33±0.57、7.02±0.47、5.85±0.24;细胞内钙离子浓度为302±9 nmol/L、243±9 nmol/L、186±8 nmol/L,均明显降低;Western blot结果显示,与凋亡组相比银杏内酯B保护组可以显著减少细胞线粒体以及胞浆中Cyt C蛋白的含量。结论:银杏内酯B对谷氨酸诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有保护作用,其机制可能与银杏内酯B降低了细胞内钙离子的浓度及阻断了Cyt C从线粒体释放入胞浆中有关。     

肾病综合征患儿血清补体抗御免疫复合物致病性的研究

作者测定了60例肾病综合征患儿血清补体抑制免疫复合物沉淀和溶解免疫复合的能力(ICPIC,CMSC).临床分析表明,单纯性肾病患儿血ICPIC和CMSC无明显异常,而肾炎性肾病、乙肝性肾炎、紫癜性肾炎患儿则显著下降.肾脏病理分析表明,除微小病变型肾病无显著异常外,其它类型均有不同程度下降.此外,研究发现血ICPIC和CMSC可较好地反映肾病远期转归,而且反映肾脏病变活动性比血补体(CH_(50),C_3和C_4)和血循环免疫复合物敏感.     

甲磺酸帕珠沙星对临床常见致病菌体外抗菌活性及抗生素后效应观察

目的：观察甲磺酸帕珠沙星对临床常见致病菌的体外抗菌作用及对大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌的抗生素后效应（PAE）。方法采用琼脂稀释法测定甲磺酸帕珠沙星对临床常见致病菌的最低抑菌浓度（MIC）;采用稀释法和菌落计数法观察甲磺酸帕珠沙星不同浓度时对大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌的 PAE。结果甲磺酸帕珠沙星对临床常见致病菌存在较强的抗菌活性;药物在浓度为8 MIC、4 MIC、2 MIC 时,对大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌产生明显的 PAE,且随着药物浓度的增大,PAE 值随之增大。结论甲磺酸帕珠沙星对对大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌存在明显的 PAE,且测试菌对甲磺酸帕珠沙星存在浓度依耐性。     

LC-MS/MS法测定人血浆、尿液中米屈肼的浓度及其药动学研究

目的:建立测定人血浆、尿液中米屈肼浓度的方法,研究其在健康人体内的药动学特征。方法:血浆、尿液样品经沉淀法处理后,采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法进样测定。色谱柱为Dikma Diamonsil C18,流动相为甲醇-水(含0.2%甲酸、0.3%醋酸铵)(31∶69,V/V),流速为0.6 ml/min;采用电喷雾离子源(ESI),以多重反应监测(MRM)方式扫描,负离子方式检测。用于定量分析的离子分别为m/z 147.10→58.20(米屈肼)和m/z 152.00→110.10(内标,对乙酰氨基酚)。采用DAS 2.1软件分别计算单次、多次给药的药动学参数,并比较其差异。结果:米屈肼血药、尿药浓度分别在0.02~20 ng/ml(r=0.999 3)和0.05~40 ng/ml(r=0.998 2)范围内线性关系良好,定量限分别为0.02、0.05 ng/ml;精密度、回收率符合生物样品测定要求,内源性杂质不干扰测定。血浆中米屈肼低、中、高剂量(250、500、750 mg)单次给药组t1/2分别为(3.39±0.81)、(5.52±0.57)、(5.32±0.96)h,tmax分别为(0.80±0.45)、(1.38±0.43)、(1.10±0.36)h,cmax分别为(4.17±1.46)、(8.08±1.04)、(15.04±1.86)ng/ml,AUC0-36 h分别为(24.55±5.81)、(45.50±7.07)、(85.60±13.09)ng·h/ml,单次给药在250~750 mg剂量范围内,cmax、AUC0-36 h与剂量呈线性关系(R2分别为0.974 5、0.968 3);米屈肼低剂量多次给药组达稳态时,cmin为(0.28±0.10)ng/ml,AUCss为(38.78±4.18)ng·h/ml,css为(1.62±0.17)ng/ml,DF为(3.81±1.14),t1/2为(6.17±1.46)h,tmax为(1.20±0.33)h,cmax为(6.46±1.96)ng/ml,AUC0-36 h为(40.33±4.65)ng·h/ml;cmax、AUC蓄积因子分别为(1.73±0.90)和(1.64±0.40)。多次连续给药达稳态时与单剂量相比,t1/2、cmax、AUC0-36 h均有所改变,tmax无显著性差异。各剂量组单次给药后,26 h尿累积排泄率分别为(0.004 009±0.001 1)%、(0.004 026±0.001 01)%、(0.003 858±0.000 68)%。结论:该试验建立的方法灵敏度好、准确度高、专属性强,适用于人体中米屈肼血药及尿药浓度的测定和药动学研究。米屈肼胶囊在健康人体内具有一定的蓄积作用,且具有线性药动学特征。     

头花蓼水提取物对CYP450酶诱导和抑制作用研究

目的考察头花蓼水提取物对人肝微粒体CYP450 5种亚型酶的体外抑制作用和对小鼠的体内诱导作用,从而预测发生药物相互作用的可能性,为临床合理用药提供科学依据。方法以探针底物代谢物生成法,考察头花蓼水提取物体外对人肝微粒体主要I相代谢酶CYP1A2、CYP2E1、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4活性的影响;采用微粒体体外孵育法,考察小鼠经高、低剂量(1.16、0.58 g·kg-1)头花蓼水提取物分别连续灌胃7 d和14 d后,小鼠肝微粒体中主要I相代谢酶活性的变化,以评价头花蓼水提取物对小鼠肝微粒体主要CYP450酶是否有诱导作用。结果头花蓼水提取物对人肝微粒体中主要的CYP450 I相代谢酶的抑制作用均不强,IC50值在849.6~2 287 mg·L-1;与空白对照组比较,1.16 g·kg-17 d组小鼠CYP2C9和CYP3A4活性分别增加了49.9%和21.1%(P<0.01和P<0.05),0.58 g·kg-114 d组小鼠CYP2C9和CYP3A4活性分别增加了27.6%和15.5%(P<0.01和P<0.05),1.16 g·kg-114 d组小鼠CYP2C9和CYP3A4活性分别增加了67.5%和32.1%(P<0.01),头花蓼提取物对其余CYP亚型活性未见明显影响。结论在临床剂量下,头花蓼水提取物对人肝微粒体CYP1A2、CYP2E1、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4无明显抑制作用,对小鼠肝微粒体CYP2C9和CYP3A4显示诱导作用。