肾动脉狭窄介入治疗前后血清脑利钠肽水平的变化及意义的研究

目的探讨肾动脉狭窄介入治疗前后血清脑利钠肽BNP水平的变化及意义。方法采用回顾性调查方法，对肾动脉狭窄介入治疗前后血清脑利钠肽水平的变化进行分析。结果肾动脉狭窄介入治疗再通后，血清BNP水平出现下降（P〈0．01）。结论血清BNP水平的变化对肾动脉狭窄介入治疗后疗效的评价具有一定的临床指导意义。     

DMSO增强原核表达TAT-EGFP（Apoptin）穿膜效应的研究

目的：构建pET15b-TAT-EGFP和pET15b-TAT-Apoptin,观察表达的融合蛋白TAT-EGFP在细胞内的定位及TAT-Apoptin的诱导Caski凋亡活性。方法：人工合成编码TAT蛋白转导区的DNA片段,插入载体pET15b后再连接EGFP和Apoptin基因,组成pET15b-TAT-EGFP（Apoptin）重组子。转化大肠杆菌,1mMIPTG诱导TAT-EGFP（Apoptin）融合蛋白表达,His亲和层析柱纯化。培养的Caski细胞经过10%DMSO处理1h后,加入融合蛋白孵育1h,观察TAT-EGFP进入细胞的情况。同时用TUNEL检测TAT-Apoptin诱导Caski凋亡的情况。结果：成功地构建了高表达pET15b-TAT-EGFP（Apoptin）重组子,纯化了分子质量约为30KD的融合蛋白TAT-EGFP和17KD的TAT-Apoptin融合蛋白,并在体外培养的Caski细胞经10%DMSO处理后证实TAT-EGFP融合蛋白穿透生物膜的能力明显增强。结论：通过对TAT-EGFP融合蛋白的表达纯化及活性分析,证实了DMSO能够增强TAT的蛋白转导作用,为肽类及生物大分子药物进入组织细胞内发挥治疗作用提供了理论基础。     

西地那非与利钠肽对肾功能的作用

5型磷酸二酯酶广泛存在于肾脏和血管,近来还被发现存在于心脏中。西地那非是一种5型磷酸二酯酶抑制剂,临床上广泛用于勃起功能障碍的治疗;脑利钠肽为一心源性产物,可扩张血管、舒张心脏、并有利尿作用,两者均通过环鸟嘌呤核苷酸起作用。因此临床中,设想通过加强肾性环鸟嘌呤核苷酸,5型磷酸二酯酶的慢性抑制可提高外源性脑利钠肽的肾性作用。为此,Chen HH等人进行了一项研究,在两组依靠起博诱导的慢性心衰狗中,     

环缩酚肽抑制视网膜表达VEGF及PECAM基因和血管增生

[目的]观察两种环缩酚肽衍生物(Hep-A和Hep-B)对氧诱导的小鼠视网膜表达血管内皮生长因子(VEGF)和细胞黏附分子(PECAM;ICAM-1;VCAM-1)基因的影响及血管增生的变化.[方法]建立氧诱导的血管增殖性视网膜病变模型,12 d开始给小鼠皮下注安慰剂(第1组,n=7)、Hep-A 10 mg/kg(第2组,n=6)或者Hep-B 10 mg/kg(第3组,n=6),每天两次.5 d后取出左侧眼,分离视网膜并抽提RNA,用荧光定量PCR测出上述基因含量,并分别求出每个靶基因与标准基因S16含量的比率;右眼经心脏荧光素灌注后取眼球做视网膜平铺片,用图像分析软件定量计算视网膜新生血管的面积.[结果]视网膜中VEGF/S16的mRNA比率为:第1组(0.554±0.050),第2组(0.355±0.037),第3组(0.287±0.051);PECAM/S16为:第1组(2.050±0.249),第2组(1.228±0.153),第3组(1.027±0.210).经ANOVA分析,第2组和第3组分别与第1组比较,视网膜中VEGF基因表达分别减少36%和48.2%(P=0.001);PECAM基因表达分别减少40.1%(P＜0.05)和49.9%(P＜0.01);而VCAM-1和ICAM-1表达无明显差异.视网膜平片检测视网膜新生血管面积:第1组为(1.06±0.03)mm2/眼,第2组为(0.17±0.01)mm2/眼,第3组为(0.11±0.01)mm2/眼;经ANOVA分析,第2组和第3组分别与第1组比较,视网膜新生血管的面积明显减少(P＜0.001).[结论]两种环缩酚肽衍生物均抑制氧诱导的小鼠视网膜表达VEGF和PECAM基因,并抑制其形成视网膜新生血管.     

三种实验性IgA肾病模型的比较

目的探讨建立一种理想的IgA肾病（IgAN）动物模型方法。方法分别采用葡聚糖G200、大肠杆菌外膜蛋白和金葡菌的细胞膜20肽抗原决定簇诱导小鼠IgA肾病模型。用分子生物学和病理学方法对3组IgAN模型小鼠进行鉴定和比较。结果（1）葡聚糖组尿蛋白增高，伴有血尿；免疫荧光显示部分肾小球大量IgA沉积；光镜下肾小球系膜细胞增多，肝和脾可见弥漫性的粉染物质沉积；电镜下肾小球系膜区少量低电子密度的致密沉积物，肝和脾可见淀粉丝样物质沉积。（2）大肠杆菌外膜蛋白组尿蛋白增高，伴有血尿；免疫荧光显示肾小球有少量IgA沉积；光镜下肾小球系膜细胞轻度增多，间质炎细胞浸润明显；电镜下肾小球系膜区无电子致密沉积物。（3）金葡菌细胞膜20肽抗原决定簇组尿蛋白增高，伴有血尿；免疫荧光显示多数肾小球均可见大量IgA沉积；光镜下肾小球系膜细胞增多，伴系膜基质轻度增生；电镜下肾小球系膜区和基底膜的内皮细胞下可见高电子密度的致密沉积物。结论金葡菌细胞膜20肽抗原决定簇组诱导的IgAN模型从临床表现和病理学变化与人IgAN极其相似，是3种IgAN模型中最理想的IgAN模型。     

慢性肾脏病非透析患者脑钠素与动脉粥样硬化及心功能的关系

目的 研究脑钠素（BNP）与慢性肾脏病（CKD）非透析患者动脉粥样硬化及心功能不全的关系。 方法 采用双抗夹心免疫荧光法检测203例CKD非透析患者与16例高血压患者对照组全血BNP水平，分析其与颈动脉超声结果、心脏彩超结果及既往心血管疾病史的关系。 结果 CKD非透析患者BNP水平与对照组相比显著升高[M（范围）：54.40(15.10～ 173.00) ng/L比9.35(7.35～15.00) ng/L，P < 0.01]。Spearman相关分析显示CKD患者BNP与颈动脉内膜中层厚度（IMT）、左室心肌重量指数（LVMI）等呈正相关。存在颈动脉斑块、左室肥厚或既往发生过心血管事件的患者血BNP水平显著增高。多元回归分析显示LVMI、既往心血管事件均是影响BNP水平的独立因素。 结论 CKD非透析患者BNP水平和动脉粥样硬化性疾病、左室肥厚及心功能不全相关，提示BNP水平可作为一项评价CKD非透析患者心功能及动脉粥样硬化的敏感生物学指标。     

三七总皂甙对淀粉样β25～35肽诱导的NG108-15细胞老年性痴呆模型的保护作用

背景：阿尔茨海默病(Alzheimer disease，AD)的病理病因虽然还没有完全清楚，但目前认为β-淀粉样肽(amyloid β-peptide，Aβ)是引起AD的胆碱能神经功能紊乱的主要成分。因此，Ag的产生及其对神经细胞的影响，以及寻找该病的发病机制、治疗方法及其有效的治疗药物成了医药界的研究热点。目的：观察三七总皂甙(PNS)对NG108-15细胞老年性痴呆模型的影响，为寻找该病的发病机制提供佐证，为研究和开发中药的新成分提供理论依据。设计：体外平行对照实验。单位：广西中医学院新药开发中心，广西中医学院生物化学教研室。对象：实验在广西中医学院新药开发中心完成。NG108-15细胞：中国科学院上海细胞研究所提供。PNS：云南玉溪维和制药厂生产。Aβ25～35片段：德国Sigma公司产品，批号：042K49501。MTT(四甲基噻唑蓝)，德国Sigma公司产品，批号：020609。cAMP(环-磷酸腺苷)日本ャマサ酱油株式会社产品，批号：00207。胚胎牛血清(FBS)：由美国Hyclone公司提供，批号：0405。DMEM培养基：美国GIBCO公司产品，批号：0311。干预：NG108-15细胞培养法：含50mL／L胚牛血清、10g／LHAT、10g／L青霉素和链霉素(1：1)的DMEM培养液，置100mL／LCO2、37℃用的培养箱内培养殖，每隔一天换一次液，4d传代一次。主要观察指标：利用MTT法、细胞计数法和细胞形态学检测法观察PNS对NG108-15细胞存活率和细胞突起的改变。结果：PNS能增加Aβ25～35片段神经毒性诱导的NG108-15细胞存活率[增殖状态：(311&;#177;21)％，分化状态：(113&;#177;31)％，P&;lt;0．05，F=5．567]、细胞突起率[增殖状态：(25．66&;#177;3．65)％，分化状态：(67．97&;#177;2．47)％，P&;lt;0．05，F=6．471]和细胞突起平均长度[增殖状态：(25．66&;#177;3．09)μm，分化状态：(25．66&;#177;3．65)μm，P&;lt;0．001，F=12．641]。结论：PNS具有减轻细胞对Aβ的神经毒性反应和促进细胞突起生长的作用，表明PNS能对老年性痴呆的病理发展有拮抗作用。     

福林酚法测定软胶囊中肽含量

肽,又称多肽,是一类由氨基酸组成,比蛋白质小,结构简单,生理活性强的物质,它们与蛋白质没有本质的区别,但又不同于蛋白质。多肽这类生物活性物质是生命活动的重要参与者,它们影响着细胞与细胞,组织与组织的生理活动。许多肽类的功能已经明确,具有多种生理调节作用犤1犦。部分肽