卵母细胞质内单精子注射的胚胎形态与临床结局分析

目的：研究卵母细胞浆内单精子注射（ICSI）技术治疗不育症的胚胎结局。方法：对我中心1999年1月对2001年3月进行的291个ICSI治疗周期（实验组）和352个常规体外受精（IVF）周期（对照组）进行回顾性分析。结果：（1）实验组和对照组的受精率分别为75．7％和73．2％,差异不显著（P＞0．05）;两组的卵溶解率分别为10．6％和7．9％。实验组稍高,但差异不显著（P＝0．238）。（2）实验组和对照组超过20％碎片的胚胎率分别为41．2％和35．6％,两组的差异不显著（P＝0．137）;两组的囊胚形成率分别为41．3％和55．8％,实验组显著低于对照组（P＜0．001）。（3）实验组的临床妊娠率为34．7％,略低于对照组39．9％的结果,但差异不具显著性（P＝1．744）,实验组的宫内胚胎停育和自然流产率,略低于对照组,但差异亦不具显著性（8．9％vs13.4%,P=0.079)。结论：实验组可获得较稳定的临床妊娠,是治疗男性不育症等的一种有效的手段。     

人羊膜诱导胚胎干细胞向表皮样干细胞的定向分化

目的 探索体外定向诱导胚胎干细胞（ES细胞）分化为表皮样干细胞的条件,为研究其分化机理及寻找新的皮肤组织工程种子细胞奠定基础。方法 将小鼠胚胎干细胞单独（对照组）或与人羊膜共培养4－5d,观察其形态分化,分别用β1整合素免疫组化和流式细胞仪检测胚胎干细胞向表皮样干细胞的分化。结果 与人羊膜共培养4－5d后,ES细胞分化为表皮细胞样的单层细胞,细胞排列紧密,呈多边形,免疫组织化学染色后,多数细胞呈现β1整合素阳性,对照组大量细胞死亡,未见β1整合素阳性细胞,流式细胞仪检测结果显示：实验组和对照组β1整合素细胞分别为81．4％和8．4％,两者比较差异显著,Z检验P＜0．01。结论 人羊膜组织可在体外诱导胚胎干细胞分化为表皮样干细胞。     

小鼠胚胎干细胞体外分化为神经前体细胞的研究

目的 探索小鼠胚胎干细胞（Embryonic stem cell,ES cell）体外分化为神经前体细胞（Neural precursor cells,NPC）的无血清培养条件,比较人胚胎成纤维细胞（Human embryonic fibroblasts,HEF）与小鼠胚胎成纤维细胞（Mouse embryonic fibroblasts,MEF）对小鼠ES细胞生长的作用。方法 在MEF或HEF饲养层上培养ES细胞,培养液中含白血病抑制因子。采用无血清方法培养NPC,免疫组化方法检测巢蛋白（Nestin）,用硝基四氮啖蓝/5-溴-4-氯-吲哚基磷酸（NBT/BCIP）显色检测碱性磷酸酶。结果 无血清培养可以获得86%的NPC。HEF与MEF-样能维持ES未分化状态。结论 无血清培养方法有利于ES细胞向NPC分化,HEF可用于小鼠ES细胞的培养,而且比MEF优越。     

诊断超声对人胚胎安全性的研究

目的　探讨诊断级B超对人胚胎发育的安全性。方法　取 12 0名孕 6～ 8周拟行人工流产孕妇 ,随机分成正常对照组 (Ⅰ组 )、辐照 5min(Ⅱ组 )、10min(Ⅲ组 )、2 0min(Ⅳ组 )、30min(Ⅴ组 )于 1h内取绒毛 ,超声辐照 30min(Ⅵ组 )于 7～ 10d后取绒毛。检测绒毛的生物化学变化。结果　诊断剂量超声辐照 2 0min可致人体宫内绒毛发生生物化学变化。丙二醛 (MDA)值随超声剂量增加而升高 (PⅠ -Ⅲ >0 .0 5,PⅠ .Ⅳ <0 .0 1,PⅠ -Ⅴ <0 .0 1) ,而超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶活性随超声辐照剂量增加而下降 (PⅠ -Ⅲ >0 .0 5,PⅠ -Ⅳ <0 .0 1,PⅠ -Ⅴ <0 .0 1)。对照组与Ⅵ组比较P >0 .0 5,提示损伤作用是可逆性的。结论　诊断超声辐照时间 2 0min以上时对绒毛可造成潜在危害     

ISOBUTYRAMIDE ACTIVATES TRANSCRIPTION OF HUMAN FETAL γ- AND MURINE EMBRYONIC εy-GLOBIN GENES

INTRODUCTIONDuringhumandevelopment,theexpressionofβ－likeglobingenesdisplaystwoswitches：fromembryonic（ε）tofetal（GγandAγ）duringearlydevelopmentandfromfetaltoadult（βandδ）aroundtheparturientperiod．Inadultlife,thefetalhemoglobin（HbF,α２γ２）islessthan１％oftotalhemoglobinandisrestrictedtoFcellswhichrepre－sentlessthan５％ofthebloodcells（１）．Stimulationorreactivationoffetalglobinexpressionhasbeenconsideredtobeapotentialmethodofamelioratingtheβhemoglobin－opathies．Ins…     

体外受精与卵细胞内单精显微注射后受精和胚胎质量的比较

目的 评估 ICSI与 IVF后的卵子受精和胚胎发育,了解不明原因不孕的病人在同一治疗周期中,通过 ICSI受精的胚胎是否较 IVF更好。方法 将 30例不明原因不孕的病人同一周期的卵子随机分为两组,分别行 ICSI和 IVF授精,比较各组间卵子的受精和胚胎质量。结果 不明原因不孕中 IVF授精后发生受精障碍 3例,占 10％ (3/30),而 ICSI授精后无受精障碍发生; ICSI授精组与 IVF授精组比较,卵子受精率无明显差异,而 a类胚胎率差异显著 (P     

人胚神经干细胞的分离与培养

神经干细胞 (ｎｅｕｒａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ ,ＮＳＣｓ)的发现和研究是近些年来神经生物学领域内最重要的进展之一。 1992年 ,国外学者从小鼠的纹状体区分离出了一类细胞 ,它能够在体外不断分裂增殖 ,且表现出多样分化潜能 ,与干细胞的生物学属性一致 :①自我更新、分裂增殖的能力 ;②多种分化潜能 ,可分化为本系统大部分类型的细胞 ;③这两种能力可以维持相当长的时间 ,甚至终生 ;④对损伤和疾病具有反应能力。近期 ,国内外学者对神经干细胞的研究和应用表现出极大兴趣 ,已成功地进行了大鼠等动物神经干细胞的分离和培养 ,但目前国内尚未…     

实验动物胚胎和合子的低温保存

近40年来,人体的一些重要细胞组织低温保存和移植的逐步成功,低温技术在治疗肿瘤等方面的应用,动植物细胞、胚胎、组织低温保存的发展,已经给医学、生物学、农业、畜牧业等带来了巨大的效益,并使低温生物学、低温医学成为人们关注的新兴交叉科学。在实验动物方面,随着生命科学的飞速发展,实验动物的品种、品系数量也在不断地增加。因此采用胚胎冷冻保存技术,建立实验动物的胚胎库,将是保存实验动物品系和我国特有的动物资源的行之有效的方法。同时也为进行胚胎发育机理研究、转基因动物培育、动物模型培育等创造了条件。     

用于胚胎干细胞分离培养的饲养层的制作

饲养层对胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ES cell)的培养与建系十分重要。实验选择小鼠原代成纤维细胞(Priimary mouse embmy fibroblasts,PMEF)作为饲养层,这种饲养层能够较好地维持ES细胞未分化状态和二倍体核型。除选用经典的14．5d的孕鼠制做原代成纤维细胞外,我们还选了10d、18d、的孕鼠制成饲养层,通过ES-D3的传代培养结果表明：10-18d的PMEE均可作为饲养层用,10代内的饲养层培养细胞均适宜。     

植入过程中转化生长因子β2,β3和转化生长因子βⅢ型受体在？…

探讨ＴＧＦβ２、ＴＧＦβ３和ＴβＲ－Ⅲ与胚胎植入的关系。方法：取孕４－８ｄ小鼠子宫,用免疫组方法观察ＴＧＦβ２、ＴＧＦβ３和ＴβＲ－Ⅲ的表达情况并以非孕小鼠子宫做对照。结果ＴＧＦβ２于孕子宫各型细胞均有表达,表达程度以孕７ｄ为最高,ＴＧＦβ３和Ｔβ的表达主要集中于子宫腺和肌细胞。