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31.
大鼠胚胎神经干细胞两种不同分离、传代方法的比较 总被引:5,自引:2,他引:3
目的体外培养大鼠胚胎神经干细胞(NSCs),比较不同分离、传代方法对其生长的影响。方法取怀孕15d的大鼠,分别用机械分离法和含0.01%EDTA的胰蛋白酶消化法分离海马区细胞,均以1×106/mL的活细胞密度接种到无血清的NSCs培养基中培养,分离纯化至P5代。以含10%胎牛血清(FBS)和2%多聚赖氨酸的DMEM/F12诱导分化,免疫细胞化学鉴定。结果机械分离组获得的活细胞及培养后的神经干细胞球数目明显多于胰蛋白酶消化组,其细胞贴壁率却高于胰蛋白酶消化组。取神经干细胞球及诱导分化后的细胞作免疫细胞化学染色鉴定,细胞分别呈Nestin、β-tubulin-Ⅲ、GFAP和O4阳性反应。结论大鼠胚胎海马区有NSCs存在,离体培养时能分裂增殖,并能被诱导分化。机械分离法和胰蛋白酶消化法各有利弊,可以根据实验情况交叉采用两种不同的分离方法,以稳定高效地培养出NSCs。 相似文献
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骨组织工程实际应用的关键是成骨细胞成骨以修补骨缺损,其前提是找到良好的种子细胞.而目前种子细胞的老化是组织工程中的一大难题,一些分化和增殖能力强的原始细胞即干细胞,是解决这一难题的希望所在.目前研究较多的是骨髓基质干细胞,但它却存在着:①相对低的产生率,大约100 000个细胞中才有1个真正的干细胞;②自我更新能力有限,而且随着时间的延长,增生潜能及向特殊类型细胞转化的能力均消失殆尽的问题.因此,基于骨组织工程的目的仍需发展一种新的细胞资源.而胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)因其具有全能性和无限增殖的能力,有望成为组织工程中种子细胞的新来源. 相似文献
33.
目的:明确胚胎NA能神经元移植对点燃癫痫发作严重程度的影响。方法:以Wistar大鼠为研究对象,按移植物的性质分为NA移植组、移植对照组和还对照组。首先定期电刺激杏仁核制备电点燃癫痫模型,再用立体定向技术向各组动物的海马移植相应的移植物,移植后观察癫痫的电生理和行为学指标(杏仁核后放电阈值、持续时间、癫痫行为级别、癫痫持续时间)变化情况,TH免疫组织化学染色了解移植物存活情况。结果:经统计学处理,移植前后各指标无显著性差异(P>0.05)。结论:胚胎NA能神经元移植对点燃癫痫的发作严重程度无抑制作用。 相似文献
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35.
36.
早期胚胎发育障碍的免疫因素分析 总被引:1,自引:0,他引:1
引起早期胚胎发育障碍的原因很多,随着基础免疫学及免疫遗传学研究的飞速发展,免疫异常引起的早期胚胎发育障碍越来越引起人们的重视。 相似文献
37.
以钒基核苷酸复合物为核酸酶抑制剂,从人胚组织中制备总RNA,所得产品几乎不含DNA和蛋白质,经过分离Poly(A)~ mRNA,证明制品有合成cDNA的完整功能,方法比较简捷,适于大量制备以满足分离mRNA 之需,并讨论了此法的优缺点。 相似文献
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40.
在人胚胎干细胞(human embryonic stem,hES)的研究中,有效的冻存方法非常重要。目前,冷冻Es细胞主要有两种方法:慢速冷冻一快速复温和超快速玻璃化法。慢冻法需要昂贵的程序性冷冻仪,而玻璃化法步骤繁琐且只能冻存小量细胞.不能满足临床应用。因此,本研究旨在寻找非程序性冷冻仪冻存大量hES细胞的方法。 相似文献