基于UPLC-Q-TOF/MS技术的大建中汤血清药物化学研究

目的 应用血清药物化学方法分析大建中汤入血成分及体外化学成分。方法 采用UPLC-Q-TOF/MS技术快速鉴定大建中汤经大鼠ig给药后吸收入血的原型成分、代谢成分以及体外化学成分,结合UNIFI软件系统分析,根据质谱相对分子质量、裂解规律、文献报道等方法对质谱碎片信息进行分析,表征大建中汤入血成分及体外化学成分。结果 在给药血清中检测出22个入血成分,包括5个原型成分和17个代谢产物,体外分析鉴定得到41个化学成分。结论 UPLC-Q-TOF/MS技术可实现大建中汤体内外化学成分的快速鉴定,且血清中鉴定出的原型成分和代谢产物可能是大建中汤潜在的活性成分,可为其质量控制研究提供依据。     

骨碎补内生菌Lecanicillium sp. GZWMJZ-847中3个新3-氢化萘特特拉姆酸衍生物

目的 研究骨碎补内生蜡蚧菌Lecanicillium sp. GZWMJZ-847的次级代谢产物和抑菌活性。方法 采用大米培养基对菌株Lecanicillium sp. GZWMJZ-847发酵;采用凝胶柱色谱、正反相硅胶色谱等方法对化合物进行分离纯化;采用核磁共振谱、质谱、NMR计算等方法确定化合物的化学结构;采用营养肉汤稀释法测试化合物对病原细菌及酵母菌的抑菌活性、平板法测试化合物对病原霉菌的抑菌活性。结果 从菌株的发酵产物中分离鉴定了3个新的和3个已知的3-氢化萘特特拉姆酸衍生物,包括蜡蚧特特拉姆酸A（1）、蜡蚧特特拉姆酸B（2）、蜡蚧特特拉姆酸C（3）、Sch 210971（4）、Sch 210972（5）、Sch 213766（6）。化合物1和4～6对4株人体革兰阳性病原菌和1株植物革兰阴性病原菌具有抑制作用,最小抑菌浓度（minimun inhibitory concentration,MIC）为7.8～125 mmol/L。化合物6对油菜菌核病菌和小麦赤霉病菌表现出一定的抑制作用,半数抑制浓度分别为（22.05±0.62）、（55.54±1.72）μg/mL。结论 蜡蚧特特拉姆酸A～C（1～3）为新的3-氢化萘特特拉姆酸衍生物,骨碎补内生菌Lecanicillium sp. GZWMJZ-847产生的3-氢化萘特特拉姆酸对人体病原菌和植物病原菌可表现出抑制作用。     

参与连翘苯丙烷合成途径的WRKY转录因子的筛选与鉴定

目的 筛选出参与连翘Forsythia suspensa苯丙烷合成途径的WRKY转录因子并进行生物信息学分析。方法 通过对从连翘转录组数据中筛选出的62条连翘WRKY基因序列进行鉴定;通过采用蛋白理化性质和基序分析、蛋白结构分析、系统进化分析、功能注释、蛋白互作分析、外源激素处理后实时荧光定量分析等方式进行相关分析。结果 最终筛选出52条具有WRKY结构域的连翘WRKY转录因子。WRKY转录因子编码蛋白的氨基酸数目在105～728,相对分子质量在12277.95～80 321.99。蛋白基序分析显示其均有WRKY结构域,与拟南芥WRKY转录因子构建系统进化树将连翘52个WRKY转录因子进一步分为3大类;筛选出5个可能参与连翘苯丙烷合成途径的连翘WRKY转录因子,并推测其可能以被MAPK级联反应所调控的方式介导连翘中苯丙烷合成途径。结论 通过分析转录组测序结果,从52个连翘WRKY转录因子中筛选出5个可能参与连翘苯丙烷合成途径的转录因子,其表现出组织特异性表达,且对不同浓度茉莉酸甲脂表现出不同的响应,为进一步研究其作用机制提供研究方向。     

基于代谢组学和血清药物化学研究益肾固络合剂治疗慢性肾小球肾炎的效应物质及作用机制

基于代谢组学和血清药物化学研究益肾固络合剂治疗慢性肾小球肾炎(chronic glomerulonephritis, CGN)的效应物质及作用机制。建立阳离子化牛血清白蛋白(cationic bovine serum albumin, C-BSA)诱导的CGN大鼠模型,益肾固络合剂灌胃给药后,进行肾脏功能相关生化指标(24 h尿蛋白、血清尿素氮和肌酐)测定以及组织病理形态观察等药效评价;采用UPLC-Q-TOF-MS技术结合多元统计分析筛选益肾固络合剂治疗CGN的血清生物标志物,并进行代谢通路分析;依据质谱离子碎片信息和代谢途径,结合PeakView 1.2和MetabolitePilot 2.0.4软件对益肾固络合剂入血成分(原型及代谢产物)进行鉴定分析;整合代谢组学和血清药物化学数据,构建血清生物标志物和入血成分相关性分析的数理模型,筛选益肾固络合剂治疗CGN的潜在效应物质。益肾固络合剂显著降低CGN大鼠的24 h尿蛋白、血清尿素氮和肌酐水平,以及改善肾脏组织病理损伤;代谢组学共筛选出花生四烯酸和溶血磷脂酰胆碱类化合物等20个益肾固络合剂治疗CGN的血清生物标志物,涉及花生四烯酸代...     

抵当汤联合盐酸二甲双胍缓释片治疗2型糖尿病临床研究

目的：观察抵当汤联合盐酸二甲双胍缓释片治疗2型糖尿病的疗效及对肠道微生态、糖脂代谢的影响。方法：选取60例2型糖尿病患者作为研究对象,按随机数字表法分为对照组及观察组各30例。对照组给予盐酸二甲双胍缓释片治疗,观察组在对照组基础上联合抵当汤治疗,2组均治疗8周。比较2组临床疗效,比较2组治疗前后中医证候积分、糖脂代谢[空腹血糖（FBG）、餐后2 h血糖（P2hBG）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、空腹胰岛素]指标值、氧化应激[超氧化物歧化酶（SOD）、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）]指标值、肠道微生态指标值的变化。结果：观察组临床疗效总有效率为93.33%,对照组为73.33%,2组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后,2组神疲乏力、烦躁易怒、口苦咽干、舌红苔黄中医证候积分均较治疗前下降（P<0.05）,观察组上述4项中医证候积分均低于对照组（P<0.05）。治疗后,2组血清FBG、P2hBG、HOMA-IR、TG水平均较治疗前下降（P<0.05）,血清HDL-C水平均较治疗前升高（P<0.05）;观察...     

基于代谢探讨肿瘤“正虚邪实”病机及其治疗

代谢是指生物体内发生的所有化学反应的总称,包括物质代谢和能量代谢。中医学认为肿瘤的总病机为正虚邪实,并以此确立扶正治癌的临床大法。从代谢的角度,将正气与物质代谢、能量代谢及癌毒联系,将肿瘤“正虚邪实”病机拓展为“整体元气虚损,局部毒聚邪实,瘤周虚实夹杂”,以此病机指导治法,由“扶正治癌”拓展为“调元扶正,解毒治癌”。文章尝试对“正虚邪实”总病机及其“扶正治癌”学术思想进行继承创新,或可为肿瘤多学科治疗充分体现中医药综合调节提供新思路。     

李惠林论治肥胖型代谢综合征经验

肥胖型代谢综合征是内分泌科的常见代谢性疾病,为患者带来极大的身心和经济压力。李惠林主任医师认为脾肾两虚是肥胖型代谢综合征的内因,饮食不节、运动过少是外因,肝失疏泄是重要环节,痰浊瘀血是其病理因素。李惠林主任医师以抵当汤合黄连温胆汤加减治疗本病,以疏肝理气、健脾补肾、祛湿化痰、活血化瘀为法,并指导患者开展锻炼,调起居、畅情志。     

基于“人卧血归于肝”探讨睡眠障碍对代谢相关脂肪性肝病的影响

“人卧血归于肝”是睡眠与“肝”藏象功能的重要关联,也是肝主藏血、肝主疏泄的具体体现。现基于“人卧血归于肝” 梳理睡眠与“肝”藏象的必然联系,总结睡眠障碍对肝脏糖脂代谢紊乱的影响,指出睡眠障碍通过中枢调控系统引发进食异常从而增加肝脏代谢负担,并通过其诱发的免疫反应加重肝脏代谢紊乱和肝脏炎症,也可增加胰岛素抵抗引发糖脂代谢异常并增加肝脏脂肪堆积。除此以外,睡眠障碍还可通过影响肠道菌群的变化对脂肪的消化吸收促进肝脏脂肪变性。故以“人卧血归于肝”的理论引出睡眠对于肝脏疾病的重要作用,并以期为进一步探索中西医结合防治方案提供理论参考。     

升解通瘀汤对缺血性心肌病致慢性心力衰竭气虚血瘀证患者尿液代谢组学的影响

目的 探讨升解通瘀汤治疗缺血性心肌病致慢性心力衰竭气虚血瘀证的可能作用机制。方法 20例缺血性心肌病致慢性心力衰竭气虚血瘀证患者随机分为治疗组与对照组各10例。对照组予常规西药治疗,治疗组在此基础上加用升解通瘀汤口服治疗,每日1剂,两组疗程均为4周。采用氢-核磁共振谱（1H-NMR）检测技术分别对两组患者治疗前后的尿液样本进行分析,应用主成分分析法（PCA）和正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）对治疗前后组内与组间的差异性代谢物进行筛选,并利用MetaboAnalyst对差异代谢物进行代谢通路分析。结果 治疗前两组间无差异代谢物;治疗后两组间有果糖和α-羟基异戊酸酯2个差异代谢物,且两种差异代谢物在治疗组的含量均较对照组更低。两组治疗前后组内比较共筛选出差异代谢物20种,其中对照组3种,分别为乳酸、酪氨酸、色氨酸,含量均较治疗前降低;治疗组17种,其中缬氨酸、3,4-二羟扁桃酸、吲哚磺酸盐、烟酸、马尿酸含量较治疗前升高,精氨酸、α-葡萄糖、β-葡萄糖、乙酰乙酸、胆碱、异亮氨酸、亮氨酸、胍基乙酸、甘露醇、尿素、蛋氨酸、天冬氨酸含量较治疗前降低。代谢通路分析结果显示,仅在治疗组治疗前...     

基于代谢组学的小儿豉翘清热颗粒对发热食积乳鼠清热导滞作用机制研究

小儿发热常伴随食积,中医认为儿童发热时退烧兼顾导滞,可有效避免发热损伤。该文以高糖、高脂饲料饲养的SD大鼠乳鼠联合注射角叉菜胶,建立发热食积模型,评价小儿豉翘清热颗粒清热导滞的药效水平并探讨潜在作用机制,为药效作用及机制研究提供一定的参考依据。结果显示,小儿豉翘清热颗粒可有效降低模型乳鼠肛温,改善机体炎症环境[白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞数、单核细胞数等],也可有效修复小肠损伤,增强肠道推进功能。在确证其散热疗效的基础上,基于LTQ-Orbitrap MS/MS及UPLC-QQQ-MS/MS液质联用技术,采用非靶向及靶向代谢组学的方法对其散热机制进行了深入探究。通过QI软件结合SIMCA-P软件对脑组织样本进行非靶向代谢组学分析,结果筛选出可显著调控的内源性代谢产物22种,MetaboAnalyst通路富集结果显示,其干预机制主要集中在酪氨酸代谢、三羧酸循环、肌醇磷酸代谢等通路上。同时,脑组织样本靶向代谢组学研究结果显示,其可中枢性改变消化系统活力、抑制能量异常代谢及炎症反应等,从多个层面发挥清热导滞的作用。