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目的:建立一种简单、稳定、可靠的PON1基因多态性分析法。方法:取外周静脉血100μl,用ROSE法提取基因组DNA,用两对引物:P192F 5′-TAT TGT TGC TGT GGG ACC TGA G-3′,P192R 5′-CAC GCT AAA CCC AAA TAC ATC TC-3′;P55F 5′-GAA GAG TGA TGT ATA GCC CCA G-3′,P55R 5′-TTT AAT CCA GAG CTA ATG AAA GCC-3分别进行PCR扩增,用限制性内切酶AlwI,NlaⅢ对两种PCR产物分别进行酶切,3%琼脂糖凝胶电泳。结果:扩增的两个PCR产物在192、55多态性位点大小分别为99bp、170bp。Alw I酶切后,凝胶电脉得到完全酶切(66bp,33bp),部分酶切(99bp、66bp、33bp),未被酶切(99bp)三种类型DNA片段(RR,QR,QQ基因型);NlaⅢ酶切后,凝胶电脉得到部分酶切(170bp,126bp,44bp),未被酶切(170bp)两种类型DNA片段(LM,LL基因型)。经双盲重复检测,结果一致。应用此方法对胃癌患者血样标本检测,发现其PON1基因多态性在192位点频率较高。结论:采用一步PCR-RFLP技术可以建立简单、稳定、可靠的PON1基因多态性分析法。 相似文献
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ELISA法检测可溶性人类白细胞抗原—I及广东人参考值的测定 总被引:3,自引:0,他引:3
OBJECTIVE: To explore a method for quantitative detection of soluble human leukocyte antigen class I(HLA-I) antigens, with the assistance of which we attempt to define the reference value of the antigen in the population of Guangdong Province. METHODS: Sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was employed with W6/32 monoclonal antibody serving as the solid phase antibody and beta2 microglobulin antibody as the first antibody. HRP-labeled second antibody and the substrate were added for enzyme-catalyzed coloring. On the basis of the standard curve obtained by sHLA-I standard reagent in serial dilution, the concentration of sHLA-I antigens in the samples of 60 normal subjects from the population of Guangdong province was detected. RESULTS: The sensitivity of this assay was 2.84 ng/ml with variation coefficients of 5.80% within the same batch and 9.00% between batches. The recovery rate ranged from 98.57% to 100.15%. The level of sHLA-I antigens in normal individuals was 699.54+/-360.10 ng/ml. CONCLUSION: Sandwich ELISA is sensitive, specific and stable in the detection of sHLA-I. 相似文献
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异丙酚与安氟醚或七氟醚静吸复合麻醉对心肌酶的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:观察异丙酚与安氟醚或七氟醚静吸复合麻醉对心肌酶的影响.方法:32例择期非心脏手术的全麻病人,随机分为4组(每组8例),分别给予安氟醚麻醉(A组)、七氟醚麻醉(B组)、异丙酚-安氟醚麻醉(C组)、异丙酚-七氟醚麻醉(D组).其中A、B组为对照组,C、D组为观察组.分别于麻醉前、麻醉诱导后2 h和术后3 d采集静脉血测血清磷酸肌酸激酶(CK)及其同功酶(CK-MB)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-羟丁酸脱氢酶(HBDH).结果:麻醉诱导后2 h,A组CK、CK-MB值、LDH及HBDH值升高,与麻醉前比较差异有显著性(P<0.01或P<0.05);B组CK和CK-MB值升高,与麻醉前比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01).术后3 d,A、B两组CK值升高,与麻醉前和麻醉诱导后2 h比较差异有显著性(P<0.01或P<0.05),AST值升高,与麻醉前比较差异有显著性(P<0.01或P<0.05).而且A、B两组相比较,A组的CK、LDH值升高幅度明显大于B组(P<0.05).C、D两组仅CK值在术后3 d与麻醉前比较差异均有显著性(P<0.01),但其升高幅度均明显低于A、B两组的同时值(P<0.01),其余各项心肌酶的变化在麻醉诱导后2 h及术后3 d差异均无显著性(P>0.05).与C组比较,A组在麻醉诱导后2 h CK、CK-MB、HBDH值升高(P<0.01),LDH值升高(P<0.05);在术后3 d CK值升高(P<0.01).与D组比较,B组CK值在麻醉诱导后2 h及术后3 d升高(P<0.01),CK-MB值在麻醉诱导后2 h升高(P<0.05).结论:安氟醚和七氟醚两者均能使心肌酶升高,但安氟醚所致的心肌酶升高幅度更明显;临床麻醉剂量的异丙酚能有效地防止安氟醚和七氟醚麻醉时心肌酶的升高. 相似文献
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二十四员大环双核铜(Ⅱ)配合物的合成及其对超氧化物歧化酶的模拟--Ⅱ配合物的歧化超氧离子的活性 总被引:3,自引:0,他引:3
用核黄素光照法测定自合成的2,6-二乙酰基吡啶缩3-氧杂戊烷1,5-二胺大环,H20、im^-、N3^-及SCN^-为桥基的双核铜(Ⅱ)配合物的超氧化物歧化酶活性,它们均在10^-5-10^-7mol/L的浓度范围内具有50%以上抑制率。 相似文献
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去势后大鼠海马结构一氧化氮合酶阳性神经元的变化 总被引:8,自引:1,他引:7
目的:观察去势后大鼠海马结构一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的变化。方法:用黄递酶组织化学染色方法观察切除双侧卵巢后雌后SD大鼠海马结构NOS阳性神经元的形态,分布的变化,并进行计算机图像分析。结果:去势后海马结构NOS阳性神经元分布变化有区域差异性;NOS阳性神经元在下托、海马(CA)一区邻近下托的部分、CA三区、CA四区(CA4)和齿状回(DG)数目明显减少,而在CA二区数目明显明显增多,CA4和DG的NOS阳性神经元平均密度降低,胞体的平均周长和平均截面积都明显减少。结论:雌激素可能通过影响海马结构NOS的表达来影响学习和记忆。 相似文献
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茶碱 ,尽管用于临床治疗支气管哮喘已有半个多世纪的历史 ,目前对其药理作用的机制仍然存有很大争议。它在体外实验中非选择性地抑制磷酸二酯酶 (PDE)的所有同工酶 ,故传统认为茶碱是通过抑制PDE ,减少cAMP的水解而起作用。然而近几年研究结果显示 ,体外实验的茶碱浓度远远高于其有效的血浆浓度 ,治疗浓度的茶碱对PDE的抑制率仅为5 %~ 2 0 % ,而且它在小剂量下也具有抗炎和免疫调节的作用。此外 ,它还能拮抗腺苷引起的支气管痉挛 ,刺激肾上腺髓质和肾上腺以外的嗜铬细胞释放儿茶酚胺 ,干扰呼吸道平滑肌细胞内钙离子移动 ,兴奋… 相似文献
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目的 探讨金标法用于首次无偿献血者献血前HBsAg初筛的社会效益和经济效益。方法 对24497例首次无偿献血者用金标法和ELISA法进行HBsAg检测,结果 金标法用于首次无偿献血者献血前HBsAg初筛后,避免了2118人共42.36万毫升不合格血液的无效采集,加工、检验、贮存、报废和运输,因HBsAg阳性而报废的血液由9.90%降低至1.37%,从每1万名报名参与献血的首次无偿献血者中节省了采集和检测的费用约6万元。从每年的初筛工作中可节省1个多月的时间和人力,结论 可避免血液资源的浪费,有效地预防交叉感染。 相似文献
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