鬼臼毒素的生物合成及药理活性研究进展

鬼臼毒素是来源于鬼臼属植物的芳基萘类木脂素化合物,是鬼臼属植物的次级代谢产物,同时也是植物来源的药用天然产物,具有广谱抗肿瘤活性,目前对鬼臼毒素的相关研究较少。中国是鬼臼属植物的多样性中心和分布中心,为保护其现有资源,鬼臼毒素的生物合成特别是合成生物学逐渐成为当今研究的新方向。鬼臼毒素及其类似物具有强烈细胞毒性,对多种肿瘤细胞、病毒、细菌的增殖均有良好的抑制效果,广泛应用于各类肿瘤的临床治疗。本文对鬼臼属植物在我国的植物分布进行归纳总结,对鬼臼毒素的生物合成步骤、应用及生物学研究进行综述,同时概述了鬼臼毒素的药理活性,以期为鬼臼资源的应用、鬼臼毒素的合成、鬼臼类药物的开发提供参考,对恶性疾病治疗具有深远意义。     

鬼臼毒素水溶液稳定性研究

目的?考察鬼臼毒素水溶液的稳定性,为鬼臼毒素新型给药系统的研究奠定基础。方法?在室温下将鬼臼毒素水溶液分别用1mol/L的NaOH或HCL调节pH至设定值,放置60h,考察pH对鬼臼毒素水溶液稳定性的影响;采用经典恒温法预测鬼臼毒素水溶液在室温下和4℃条件下的稳定性。结果?鬼臼毒素降解的pH速率曲线呈V型,最稳定的pH(pH_m)为5。鬼臼毒素的水溶液在室温下有效期（t₉₀）为24.86d,4℃下为478.34d。结论?鬼臼毒素水溶液不稳定,其降解反应速率受溶液pH的影响。      

新型鬼臼毒素衍生物的合成及其抗肿瘤活性

目的 设计并合成新型鬼臼毒素类衍生物。方法 5-甲氧基吲哚与氯代物或酰氯反应得到一位氮取代的5-甲氧基吲哚;其与草酰氯反应,再以4-氨基4-脱氧表鬼臼毒素为原料,经缩合反应得到目标化合物。体外活性采用Hela细胞筛选模型进行评价。结果与结论 合成了7个新化合物,其中化合物7a, 7b 的活性优于阳性对照依托泊苷（etoposide）。     

Synthesis and antitumor activity of novel podophyllotoxin derivatives against multidrug-resistant cancer cells

Seven novel 4β-N-substituted podophyllotoxin derivatives with indole rings were prepared and evaluated for cytotoxicity against human cancer cell lines HeLa, KB, KBV, K562, and K562/AO2. Most of them demonstrated improved antitumor activity and weak multidrug resistance compared to the drugs currently available.     

一株产鬼臼毒素内生真菌的分离及其代谢产物抗小鼠S180肉瘤的研究

目的从秦岭濒危药用桃儿七(Sinopodophyllum hexandrum)植株内分离出产鬼臼毒素(podophyllotoxin)的内生真菌,研究其发酵液的抑瘤活性。方法采用组织分离法分离、纯化桃儿七植株根、茎部位的内生真菌,逐一鉴定其代谢产物,筛选出能够产鬼臼毒素的内生真菌。采用动物体内抑瘤实验研究内生真菌发酵液对小鼠S180肉瘤的抑制作用,并对荷瘤小鼠眼眶取血进行白细胞及淋巴细胞计数。结果分离出一株产鬼臼毒素的内生真菌T8,鉴定为Cephalosporium sp.。T8发酵液实验动物组的肿瘤质量低于模型组,大于环磷酰胺组(P<0.05),且其抑制率低于环磷酰胺(P<0.05)。T8发酵液能够促进白细胞和淋巴细胞的增殖。结论 T8发酵液具有一定的抑制肿瘤生长的作用,经减毒处理后可以作为肿瘤治疗的辅助药物。     

4—β—取代氨基甲酰—4—脱氧—4‘—去甲表鬼臼毒素衍生物的 …

为考察４’－去甲表鬼臼毒素Ｃ４位上连接碳原子对其生物活性的影响,本文设计并合成了Ｃ４位β构型取代氨基甲酰取工的衍生物２６个。它们在体外的抑帛是Ｌ１２１０细胞和ＫＢ细胞的药理实验中,虽显示了一定的抗肿瘤细胞生长活性,但均明显弱于依托泊甙。     

4β-(1,3,4-噁二唑-2-氨基)鬼臼毒素衍生物的合成及其抗癌活性

目的设计合成鬼臼毒素4β-(1,3,4-噁二唑-2-氨基)衍生物,并寻求具有高效低毒抗癌活性的新化合物。方法鬼臼毒素经叠氮化、还原、加成、消除得到4β-异硫氰酸酯-4-脱氧鬼臼毒素(4),再与酰肼化合物反应得到氨基硫脲衍生物,最后经环化得到目标化合物。采用MTT法,以5-氟尿嘧啶、鬼臼毒素、VP-16为阳性对照药,评价目标化合物对人前列腺癌细胞(DU-145)、人胃癌细胞(SGC-7901)、人非小细胞肺癌细胞(A549)、神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)、人肝癌细胞(HepG2)、子宫颈癌细胞(HeLa)6种肿瘤细胞以及1种正常细胞小鼠成纤维细胞(L929)的细胞毒活性。结果合成了9个新化合物,其结构经IR、1H-NMR、13C-NMR和MS确证。体外抗癌活性实验表明,目标化合物对正常细胞的毒性均远远小于阳性对照,部分化合物显示出较好的抗癌活性。结论在这一系列衍生物中,化合物6b对所测试细胞系的细胞毒活性显示了突出的生物活性。     

新型酰胺类鬼臼毒素衍生物的合成及体外抗肿瘤活性

目的:通过对鬼臼毒素母核进行结构改造,以获得高效、低毒、抗多药耐药的新型鬼臼毒素衍生物。方法:将4β-氨基-4-脱氧表鬼臼毒素的C-4位经酰胺化分别引入对位取代的苯甲酸和对位取代的肉桂酸化合物,得到4-甲酰基苯甲酸及4-甲酰基肉桂酸的鬼臼毒素类衍生物,通过MTT法筛选,并对K562和Hela细胞进行药理活性评价。结果:合成得到两个系列共8个化合物,所有化合物都经过HR-ESI-MS和¹HNMR验证,其中化合物1d、2b具有较强的体外抗肿瘤活性。结论:在C-4位引入4-甲酰基苯甲酸以及4-甲酰基肉桂酸基团可增加鬼臼毒素类衍生物的抗肿瘤活性。     

濒危药用植物桃儿七中鬼臼毒素和总木脂素含量测定

目的:测定不同产地桃儿七中鬼臼毒素和总木脂素类成分含量,对其资源利用价值进行评价。方法:采用高效液相色谱法和紫外分光光度法分别测定不同产地共126个桃儿七样品中鬼臼毒素和总木脂素含量,采用参比波长法测定桃儿七中总木脂素类成分的含量。结果:桃儿七中鬼臼毒素和总木质素的含量均以产自甘肃省永登县自然保护区样地的样品含量最高,产自西藏自治区江达同普乡样地的样品含量最低,前者分别为7.40%,20.66%,后者分别为0.40%,5.46%,两者分别相差近19倍和4倍。桃儿七中鬼臼毒素与总木脂素的含量呈显著正相关,且两者的含量表现出海拔较低、纬度较高地区样地的含量较高的特点。结论:2种含量测定方法均简便、快速、准确、重复性好;以鬼臼毒素含量和总木脂素含量为指标评价桃儿七资源利用价值较为客观;本研究的结果,对于桃儿七野生资源采集和栽培生产基地建设的产地选择具有重要的指导意义。     

南方山荷叶的含量测定及其与混淆品八角莲的指纹图谱研究

目的：建立南方山荷叶及其八角莲的指纹图谱并确定特征峰。方法：对南方山荷叶及其混淆品进行薄层鉴别及含量测定并建立指纹图谱。结果：10批药材中湖北产南方山荷叶含量最高;通过指纹图谱确定了6个特征峰分别为：苦鬼臼毒素、苦鬼臼毒素葡萄糖苷、槲皮素、鬼臼毒素、3-O-甲基槲皮素、山奈酚。结论：该方法简便、专属性强、重现性好,可用于南方山荷叶的质量控制。