细菌脂多糖对小鼠生长发育和骨骼发育的影响

目的:研究细菌脂多糖(LPS)对小鼠宫内胎儿死亡(IUFD)、生长发育迟缓(IUGR)和骨骼发育迟缓的影响。方法:LPS低中高组小鼠于妊娠d15-17分别腹腔注射不同剂量LPS(25μg/kg、50μg/kg、75μg/kg),LPS+2-苯叔丁基硝酮(PBN,活性氧ROS拮抗剂)组在LPS(75μg/kg)处理前30min和后3h经腹腔各给予100mg/kg的PBN,对照组给予等容量生理盐水。孕鼠于妊娠d18处死。另给药1d时取LPS高剂量组LPS+PBN组和对照组于LPS处理后6h处死孕鼠。结果:①小鼠妊娠d15-17给予LPS后,中高剂量组平均每窝死胎数明显高于对照组,活胎体重、身长和尾长下降,并呈明显的剂量-效应关系;LPS高剂量导致IUGR和骨骼发育迟缓;PBN处理明显抑制LPS对胎儿的作用。②LPS使母肝、胎肝和胎盘组织脂质过氧化,GSH含量显著降低。PBN显著抑制LPS的这些作用。结论:母鼠妊娠晚期接触LPS引起IUFD、IUGR和骨骼发育迟缓,ROS至少部分参与了LPS的引起IUFD、IUGR和骨骼发育迟缓。     

可控性医用氧浓度与流量吸氧器的研制

在临床急救、体征支持甚至家庭保健最广泛和普遍的吸氧治疗仍采用传统的落后技术,不能精确定量控制氧气的比例含量和实际气体流量。本项目应用现代电子与电气技术实现任意比例氧气和空气的精确混合,并达到对混合气体压力和输出流量的可调节性使用,从而完成临床患者不同病种、不同病程吸氧治疗中对氧消耗的定量控制。     

前列地尔脂微球载体注射液对大鼠小肠淤血性损伤的保护作用

目的:研究前列地尔脂微球载体注射液(Lipo-PGE1)对大鼠小肠淤血性损伤的保护作用.方法:SD大鼠45只,随机分成3组(n=15):模型组、给药组(Lipo-PGE1干预)和伪手术组.采用阻断门静脉45 min和开放60min的方法建立大鼠小肠淤血性损伤模型,伪手术组只作开腹及解剖门静脉等操作,不阻断门静脉.给药组于阻断门静脉前5 min,阻断即刻、开放后5 min分别静脉注射Lipo-PGE10.5 mL(0.2μg),其余两组相应时间点分别注射同样剂量生理氯化钠溶液.门静脉开放60 min后取小肠标本作病理检查及髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)含量和Na /K -ATP酶活力测定.取材后向小肠内注入5%葡萄糖溶液2 mL,分别测定0,15,30,45和60 min门静脉血糖浓度.结果:假手术组肠黏膜基本正常,而模型组小肠黏膜明显损伤,且葡萄糖吸收曲线低平,吸收峰延迟,MPO活性和MDA含量显著升高,Na /K -ATP酶活力显著降低.给药组小肠黏膜损伤程度较模型组显著减轻,葡萄糖吸收曲线介于假手术组和模型组之间,吸收峰同假手术组,MPO活性和MDA含量较模型组降低,Na /K -ATP酶活力显著升高.结论:Lipo-PGE1可减轻小肠的淤血性损伤并在一定程度上保护其吸收功能,这可能与其能减轻中性粒细胞在淤血时肠组织浸润、减少氧自由基释放从而减轻脂质过氧化损伤有关.     

中药配合牵引综合治疗腰椎间盘突出症疗效观察及其对血清SOD活性的影响

为评价中医药综合治疗腰椎间盘突出症的疗效及探讨其可能的疗效机理.对36例腰椎间盘突出症患者进行治疗前后JOA评分与测定血清中SOD活性.结果治疗后JOA评分明显下降,SOD活性明显升高,但腰椎间盘突出症疗效与SOD活性无关.认为本疗法是治疗腰椎间盘突出症的有效方法之一,但不是通过提高SOD活性而改善临床症状的.     

氯化钴诱导PC12细胞凋亡的分子机制

目的确定氯化钴(CoCl2)诱导PC12细胞凋亡的分子机制。方法500μmolLCoCl2诱导PC12细胞24h后,检测活性氧(ROS)生成量的变化以及抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(NAC)、二硫代苏糖醇(DTT)对细胞存活率和ROS生成量的影响;琼脂糖凝胶电泳检测NAC、DTT对CoCl2诱导PC12细胞DNA片段化的影响;利用RTPCR法检测凋亡相关基因bclxl和bax在PC12细胞调亡过程中的表达及NAC、DTT对基因表达的影响;化学发光法检测NAC、DTT对Caspase3表达的作用。结果在CoCl2诱导PC12细胞凋亡中,ROS生成量明显上升,为正常时的2.92倍;NAC、DTT可提高细胞存活率,由53.1%上升为94.8%和92.3%(P<0.01),并有效抑制ROS的生成,为正常时的24.2%和82.1%(P<0.01);同时抑制DNA片段化的发生。bclxl在细胞凋亡过程中表达明显下降,bax表达无明显变化;NAC和DTT可使bclxl的表达明显上升。Caspase3在细胞凋亡中被激活,NAC、DTT可抑制Caspase3的表达(P<0.01)。结论ROS介导了CoCl2诱导的PC12细胞凋亡,这一过程与抑制bclxl表达,激活Caspase3有关。     

Induction of apoptotic cell death in human bladder cancer cells by ethanol extract of Zanthoxylum schinifolium leaf,through ROS-dependent inactivation of the PI3K/Akt signaling pathway

BACKGROUND/OBJECTIVESZanthoxylum schinifolium is traditionally used as a spice for cooking in East Asian countries. This study was undertaken to evaluate the anti-proliferative potential of ethanol extracts of Z. schinifolium leaves (EEZS) against human bladder cancer T24 cells.MATERIALS/METHODSSubsequent to measuring the cytotoxicity of EEZS, the anti-cancer activity was measured by assessing apoptosis induction, reactive oxygen species (ROS) generation, and mitochondrial membrane potential (MMP). In addition, we determined the underlying mechanism of EEZS-induced apoptosis through various assays, including Western blot analysis.RESULTSEEZS treatment concentration-dependently inhibited T24 cell survival, which is associated with apoptosis induction. Exposure to EEZS induced the expression of Fas and Fas-ligand, activated caspases, and subsequently resulted to cleavage of poly (ADP-ribose) polymerase. EEZS also enhanced the expression of cytochrome c in the cytoplasm by suppressing MMP, following increase in the ratio of Bax:Bcl-2 expression and truncation of Bid. However, EEZS-mediated growth inhibition and apoptosis were significantly diminished by a pan-caspase inhibitor. Moreover, EEZS inhibited activation of the phosphoinositide 3-kinase (PI3K)/Akt pathway, and the apoptosis-inducing potential of EEZS was promoted in the presence of PI3K/Akt inhibitor. In addition, EEZS enhanced the production of ROS, whereas N-acetyl cysteine (NAC), a ROS scavenger, markedly suppressed growth inhibition and inactivation of the PI3K/Akt signaling pathway induced by EEZS. Furthermore, NAC significantly attenuated the EEZS-induced apoptosis and reduction of cell viability.CONCLUSIONSTaken together, our results indicate that exposure to EEZS exhibits anti-cancer activity in T24 bladder cancer cells through ROS-dependent induction of apoptosis and inactivation of the PI3K/Akt signaling pathway.     

灯盏花乙素清除活性氧作用的研究

目的:研究灯盏花乙素体外清除活性氧的作用,探讨其作用机制。方法:采用化学发光法检测灯盏花乙素对邻菲罗啉-抗坏血酸体系产生的羟自由基、黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶-鲁米诺体系产生的超氧阴离子及过氧化氢的清除作用。结果:灯盏花乙素具有清除羟自由基、超氧阴离子及过氧化氢的作用,其 IC_(50)分别为66 μg/ml、1.3 μg/ml和 1.6 μg/ml。结论:灯盏花乙素是一种有效的抗氧化剂。     

二氮嗪对软骨细胞氧化损伤的影响

目的:探讨二氮嗪对双氧水诱导的软骨细胞氧化损伤的影响。方法:取SD乳鼠膝关节软骨细胞进行原代培养,将对数生长期的软骨细胞分成5组,分别为阴性对照组(A组),双氧水组(B组),H2O2+0.1μmol·L-1二氮嗪组(C组),H2O2+1.0μmol·L-1二氮嗪组(D组),H2O2+10μmol·L-1二氮嗪组(E组);A组细胞不做特殊处理,B组用0.3 mmol·L-1双氧水在37℃恒温箱内孵育4 h,C、D、E、F组预先分别用0.1μmol·L-1DZ,1.0μmol·L-1DZ,10μmol·L-1DZ,100μmol·L-1在37℃的恒温箱孵育30分钟,PBS洗涤细胞,再用0.3 mmol·L-1双氧水在37℃恒温箱内孵育4小时。分别检测ABCDE各组细胞的细胞活性,ROS的量,细胞凋亡情况。结果:①MTT法检测各组细胞活性,细胞活性率从大至小依次为D组C组E组F组B组;②用活性氧探针DCFH-DA检测各组细胞中的ROS的量,ROS产量从多至少依次为B组E组D组C组A组;③流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,各组细胞凋亡率由大至小依次为B组E组D组C组。④Western bolt检测各组软骨细胞中HIF-1α蛋白的表达,各组软骨细胞中HIF-1α蛋白表达量依次为C组D组E组A组B组。结论:二氮嗪可降低双氧水诱导的软骨细胞的凋亡率,同时也降低双氧水诱导的软骨细胞ROS的产生,并诱导软骨细胞产生HIF-1α蛋白,可能存在二氮嗪诱导HIF-1α的表达,引起下游相关基因的转录,总体提高软骨细胞对氧化损伤的耐受力,阻碍自由基诱导的软骨细胞的凋亡。