变性高效液相色谱法快速诊断21三体综合征

目的用变性高效液相色谱法(DHPLC)分析三体综合征患者的双链DNA,快速产前诊断21三体综合征。方法根据所设计的引物对21号染色体D21S11、D21S1411和D21S1412共3个短串联重复序列(STR)位点进行PCR扩增,然后在50℃柱温条件下用DHPLC对PCR扩增产物进行检测和分析。结果健康对照者D21S11、D21S1411和D21S1412的DHPLC峰形呈现一个或两个高低相同的波峰,21三体综合征患者的DHPLC峰形呈现两个高低不同的波峰,且其中一个波峰高度接近为另一个波峰的2倍。结论 DHPLC具有灵敏度高、特异性强、简便快捷等,适合广泛应用于21三体综合征的快速诊断。     

应用CLSI EP5-A2文件评价ADAMSTM A1c HA-8160全自动糖化血红蛋白仪的精密度

目的：对 HA-8160全自动糖化血红蛋白仪进行精密度性能评价。方法按照 CLSI EP5-A2文件要求,利用高值和正常两水平质控品对 HA-8160全自动糖化血红蛋白仪测定糖化血红蛋白（HbA1c）项目的精密度进行评价。结果HA-8160全自动糖化血红蛋白仪测定糖化血红蛋白（HbA1c）项目高值和正常两水平的批内精密度变异系数分别为0．97％和1．45％;批间精密度变异系数分别为0．62％和0．34％;日间精密度变异系数分别为0．63％和0．56％;总精密度变异系数分别为1．31％和1．59％。结论 HA-8160全自动糖化血红蛋白仪测定HbA1C 的精密度能够满足临床检测要求。     

双向电泳和质谱技术在类风湿关节炎滑膜细胞差异蛋白分析中的应用及意义

目的 采用2-DE和质谱技术分析RA患者和创伤件关节炎患者关节滑膜组织中FLS蛋白质组学的变化,寻找RA关节滑膜特异性自身抗原.方法 采用2-DE分离6例创伤性关节炎患者及3例RA患者关节滑膜组织中FLS总蛋白质,凝胶经银染显色和图像数据分析识别差异蛋白质点,并用MALDI-TOF-MS对筛选出的差异蛋白质点进行鉴定.结果 RA患者与创伤性关节炎患者中的FLS蛋白质通过2-DE检测,分别检出1 633、1 603个蛋白质点;对2组相互匹配的蛋白质点进行差异分析后,其中蛋白质差异量大于3倍的差异点共有92个,从中选取在RA患者FLS中表达上调的33个差异蛋白质点进行MALDI-TOF-MS 鉴定分析,并与IPI和Swiss-Prot数据库进行比对,共鉴定出包括肿瘤型丙酮酸激酶、α-烯醇化酶、二硫键异构酶A3 前体、谷胱甘肽转移酶、泛素结合酶E2K、血小板活化因子乙酰水解酶、二氢嘧啶酶样2、腺苷酸酶、转醛醇酶、乙酰基辅酶A异构酶、26S蛋白调节亚单位S6a、膜联蛋白A11、过氧化物还原酶1、人色氨酰tRNA合成酶、核纤层蛋白、肌间蛋白、核基质蛋白、肌动蛋白、T-复合物多肽1、葡萄糖调节蛋白75、αB-晶体蛋白、葡萄糖调节蛋白78、未知蛋白:如PSMFA和SELENBP1等30个与RA发病有关的蛋白.结论 RA患者与创伤性关节炎患者FLS间存在差异表达的蛋白质,这些差异蛋白有可能是构成RA关节滑膜的相关自身抗原,并可能在诱导RA自身免疫反应中发挥一定作用.     

脐带血库启用新冷冻贮存袋的验证研究

目的：新型号的脐带血冷冻贮存袋启用前,需要进行一系列的测试,以验证贮存袋能否达到脐带血冷冻贮存的使用要求。方法抽取28个新型号冷冻贮存袋,按照标准操作程序将脐带血细胞冷冻保存和溶解复温,然后检测贮存袋的物理完整性及袋内脐带血细胞的各项质量指标,项目包括有核细胞活率、细胞回收率、CD34阳性细胞、干细胞集落培养、无菌测试以及验证贮存袋的最大装载容量。结果28个测试的贮存袋,均通过了完整性测试,所保存的细胞各项检测指标符合使用要求。结论新型贮存袋性能效果与原来的基本一致,并确认50 mL 规格贮存袋装载50 mL 液体、250 mL 贮存袋装载80 mL 液体是安全的。     

气相色谱-质谱联用检测尿液8种有机酸实验室间质量的调查

目的评价2018年遗传代谢病气相色谱-质谱联用检测尿液有机酸实验室间质量调查结果,以改进和提高新生儿遗传代谢病筛查或相关实验室气相色谱-质谱联用检测质量。方法 2018年3月向全国19家开展气相色谱-质谱联用尿液有机酸检测的实验室发放2个批号质控尿液样品(批号201811和201812)。实验室自愿参加此次调查活动并按照规定格式上报结果、测定方法、仪器和试剂等相关信息。组织者用Clinet EQA程序和Microsoft Excel 2010等软件分析各实验室检测结果及检验前、检验中及检验后过程。结果实验室回报率为94.7%(18/19)。2个批号样品(批号201811和批号201812)的检测中,各参加实验室部分有机酸的检测结果相对稳定;相比高浓度而言,低浓度有机酸的检测水平相对较好。质控品稳定性检测结果显示,苯丙酮酸(稳健变异系数99.48%)和尿黑酸(稳健变异系数67.56%)的结果差异较大。结论相比高浓度,低浓度有机酸的检测水平相对较好;稳定性差的苯丙酮酸和尿黑酸不适合作为室间质量评价质控品,应选用更稳定的化合物作为质控品以评价实验室质量。     

不同实验室方法在肺结核辅助诊断中的应用评价

目的评价不同实验室方法在肺结核(PTB)诊断中的应用效能,为PTB的早期诊断提供数据参考。方法 2016年1月至2018年12月在上海市同仁医院肺科门诊诊治的298例疑似PTB患者,依照临床诊断,分为活动性肺结核组138例、非活动性肺结核组43例、非肺结核组117例。对其痰标本分别采用痰涂片快速抗酸染色、MGIT培养、Xpert MTB/RIF分子检测,采用卡方检验比较其敏感性、特异性。结果 3种方法在区分活动性肺结核组与非活动性肺结核合并非肺结核组上具有一定的意义(χ~2值分别为89.08,138.94,137.12,P均0.01),非活动性肺结核组与非肺结核组的阳性率之间差异无统计学意义。痰涂片、MGIT培养、Xpert MTB/RIF和3种方法联合检测诊断活动性肺结核的敏感性分别为45.7%(63/138)、63.8%(88/138)、65.4%(87/133)和78.2%(104/133),MGIT培养和Xpert MTB/RIF敏感性高于痰涂片(χ~2值分别为35.79和11.26,P均0.01),MGIT培养和Xpert MTB/RIF的敏感性差异无统计学意义(χ~2=29.87,P0.05),联合检测敏感性高于3种方法单独检测(χ~2值分别为30.84,64.62,70.14,P均0.01);诊断特异性分别为99.1%(116/117)、98.3%(115/116)、99.1%(113/114)和97.3%(110/113),3种方法的特异性差异无统计学意义。结论 MGIT培养与Xpert MTB/RIF对PTB检测具有较高的敏感性,3种方法联合检测可提高敏感性。     

高效液相色谱法测定人血浆中同型半胱氨酸浓度

目的建立柱前衍生化反相高效液相色谱-荧光检测法测定血浆中同型半胱氨酸(Hcy)浓度的方法。方法以tris-(2-carboxylethyl)-phosphine hydrochloride(TCEP)为还原剂,以7-fluorbenzo-2-oxa-1,3-diazole-4-sulfonate(SBD-F)为衍生剂,色谱柱为Xterra RP18柱,柱温35℃,流动相为甲醇︰磷酸二氢钠缓冲液(pH值3.0)=3︰97,激发波长380 nm,发射波长510 nm,外标法定量。结果 Hcy浓度在1.95～125μmol/L范围内线性关系良好(r=0.999 8)。日内和日间相对标准偏差均<7%,方法回收率为103.2%～111.9%。结论此方法准确、灵敏、快速,是一种适合于实验室研究和临床检测血浆中Hcy浓度的方法。     

超高效液相色谱－串联质谱联用检测血清胆汁酸谱方法的建立及初步临床应用

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)联用方法检测血清中胆汁酸表达的方法,并初步探讨胆汁酸亚型与肥胖的关系.方法 采用固相萃取方法处理血清标本,经UPLCHSS T3色谱柱梯度洗脱后,用负离子多反应监测模式对血清中的胆汁酸组分进行质谱检测,并根据中国国家食品药品监督管理局(SFDA)的指导原则对该方法的特异性、线性范围、灵敏度、不精密度和相对回收率进行性能验证.利用UPLC-MS/MS方法检测10例单纯性肥胖者和10名健康对照者血清胆汁酸浓度,并采用秩和检验进行统计分析.结果 UPLC-MS/MS方法可同时检测人血清中14种胆汁酸亚组分,在10～20 000 nmol/L范围内线性相关良好.其对不同亚组分的最低检出限(LOD)为0.02～7.90 nmol/L,最低定量限(LOQ)为0.07～44.20 nmol/L;其日内不精密度为0.35％～12.41％;日间不精密度为1.11％ ～13.04％;相对回收率为89.8％～114.6％.初步临床应用显示,单纯性肥胖者及健康对照者血清胆汁酸谱色谱图有一定差异,单纯性肥胖者血清中游离胆汁酸和结合胆汁酸浓度分别为0.49(0.45 ～1.90)、1.44(0.84～3.72) μmol/L,均低于健康对照组的0.98(0.53～3.06)、1.99(0.67 ～2.88) μmol/L,但差异均无统计学意义(Z=-0.958、-0.801,P均＞0.05).结论 建立的UPLC-MS/MS方法可有效分离并定量检测血清中各种胆汁酸亚型,其线性范围广、灵敏度高、精密度好,可用于临床标本游离胆汁酸和结合胆汁酸的分析测定.     

烧伤病人静脉输液渗漏原因分析与防治措施

目的：目的：分析严重烧伤救治过程中静脉输液渗漏的原因及防范措施。方法：总结作者2002年至2007年参与护理治疗的9例严重烧伤并发静脉输液渗漏病人的临床资料，分析液体渗漏的主要因素，临床特点，处理方法及防范措施。结果：9例病人均为周围静脉穿刺输液患者，事前曾接受过输入高渗液体，或对血管内皮细胞产生损伤作用的药物治疗，输入液体种类依次为5％碳酸氢钠、氨基酸、氯化钾及多巴胺等；主要临床表现为患处（肢）疼痛、肿胀、局部皮温下降，或有表皮小水疱形成，严重者皮肤溃烂、渗出、坏死，经综合治疗痊愈出院，未留残疾。结论：严重烧伤病人周围静脉输液渗漏的原因比较复杂，除原发病导致毛细血管通透性增加外，与输入液体及药物的种类与性质密切相关。     

高效液相色谱法测定羚黄氨咖敏片中马来酸氯苯那敏、对乙酰氨基酚、咖啡因的含量

目的建立羚黄氨咖敏片中马来酸氯苯那敏、对乙酰氨基酚、咖啡因的高效液相色谱测定方法。方法采用Hypersil-ODS柱,甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(25:75,0.5%磷酸调节pH3.0)为流动相,流速1.0mg/min,检测波长216nm。结果马来酸氯苯那敏线性范围1.20~2.80mg/L,平均回收率为97.90%,RSD为1.52%;对乙酰氨基酚150.00~350.00mg/L,平均回收率为100.21%,RSD为0.92%;咖啡因9.00~21.00mg/L,平均回收率为101.46%,RSD为0.90%。结论本方法简便、结果准确,可用于制剂的含量测定和质量控制。