欧前胡素通过提高自噬水平缓解大鼠雌激素缺乏性骨质疏松

目的探寻欧前胡素(Imp)对大鼠雌激素缺乏性骨质疏松的疗效及机制。方法将大鼠随机分为对照(control),OVX和OVX+Imp组。建模后10 d,给OVX+Imp组、对照组和OVX组大鼠分别尾静脉注射欧前胡素75 mg/kg或氯仿溶剂,2次/周,10周。μCT和HE切片分析股骨远端骨小梁形态及参数。应力测试股骨及L5椎骨力学强度。钙黄绿标记内源性矿物沉积。ELISA检测血清PINP和B-ALP。ALP染色检测BMMSCs成骨分化能力。Real-time PCR和Western blot分别检测mRNA和蛋白表达。HE染色检测皮下移植物异位成骨。结果 1)OVX组骨量、骨小梁参数、股骨和L5椎骨力学强度、矿物沉积速率、血清PINP和B-ALP均低于对照组和OVX+Imp组(P0.05)。2)OVX组内源性BMMSCs的ALP活性、成骨基因表达及异位成骨能力均低于对照组和OVX+Imp组(P0.05)。3)OVX组内源性BMMSCs自噬水平低于对照组和OVX+Imp组(P0.05)。4)BMMSCs+3-MA组自噬水平低于BMMSCs组,成骨能力相应降低(P0.05);BMMSCs+3-MA+Imp组自噬水平高于BMMSCs+3-MA组,成骨活性相应升高(P0.05)。结论欧前胡素通过提高自噬水平恢复内源性BMMSCs成骨能力,治疗雌激素缺乏性骨质疏松。     

钩吻的化学成分研究

目的研究马钱科胡蔓藤属植物钩吻Gelsemium elegans的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20、HPLC等色谱方法进行分离纯化,通过理化性质及核磁共振谱学数据对分得的化合物进行结构鉴定。结果从钩吻的95%乙醇提取物中分离得到15个化合物,分别鉴定为钩吻素子(1)、钩吻素甲(2)、钩吻绿碱(3)、钩吻素己(4)、花椒毒素(5)、香柑内酯(6)、异茴芹内酯(7)、欧前胡素(8)、蛇床子素(9)、对羟基苯甲酸(10)、香草酸(11)、β-谷甾醇(12)、β-胡萝卜苷(13)、钩吻内酰胺(14)、16-表伏康树卡平碱(15)。结论化合物5～9为首次从该种植物中分离得到。     

基于网络药理学方法的元胡止痛滴丸治疗原发性痛经的配伍合理性研究

目的探究元胡止痛滴丸治疗原发性痛经的配伍合理性。方法选取元胡止痛滴丸中延胡索生物碱类代表成分延胡索乙素、巴马汀、海罂粟碱、原阿片碱以及白芷香豆素类代表成分欧前胡素和异欧前胡素为研究对象,利用网络药理学的方法对6个化合物的潜在作用靶点和通路进行预测,并利用分子对接技术对预测结果进行验证,通过数据整合,剖析元胡止痛滴丸的作用机制及配伍规律。结果 6个化合物可作用于23个潜在的蛋白靶点和19条相关通路。作用通路涉及中枢镇痛、激素调节、解痉、血管舒张、炎症及免疫等各个环节,2类成分既有共同的作用靶点群及通路群,又各有偏重,各通路群间通过共有靶点连接,显示出不同成分间的多靶点、多途径的协同作用。结论延胡索通过作用于中枢镇痛、平滑肌相关受体蛋白以及血栓素、血管紧张素等靶点蛋白而发挥止痛、理气、活血等功效,起到君药的作用。白芷通过参与痉挛、炎症等相关信号通路的调节与转导,发挥宣湿痹行气血的功效,辅助君药延胡索起到臣药作用,体现了二者配伍的合理性。     

LC-MS/MS法同时测定欧前胡素与异欧前胡素血药浓度

目的建立可同时测定欧前胡素与异欧前胡素血药浓度的液质联用-质谱串联法(LC-MS/MS)。方法以地西泮为内标,血浆样品经乙酸乙酯萃取后经超高效液相色谱(Acquity UPLC)BEH C18色谱柱(2.1×100 mm,1.7μm)分离,欧前胡素与异欧前胡素在质谱条件为正电喷雾电离(ESI~+)(m/z:271.5204.2),锥孔电压为20 V,碰撞能量为33 V,考察特异性、线性范围、定量下限、基质效应以及方法学回收率、精密度和稳定性。结果欧前胡素与异欧前胡素保留时间分别约1.5 min及2.4 min,欧前胡素浓度在0.1～20 ng/mL范围内线性良好(r~2=0.998 2),定量下限0.1 ng/mL(信噪比S/N10)。异欧前胡素浓度在0.05～10 ng/mL范围内线性良好(r~2=0.998 9),定量下限0.05 ng/mL(S/N10),基质效应为94.89%～110.70%,方法学回收率为94.3%～104.3%。欧前胡素与异欧前胡素的重复性以CV表示,CV分别4.91%、5.26%,期间CV分别16.39%、14.87%。冻融条件下二者CV均不大于7.21%,室温下均不大于10.44%。结论建立了同时测定欧前胡素与异欧前胡素血药浓度的LC-MS/MS法,该法灵敏度高、特异性好、稳定性好。     

腰息痛胶囊定性定量方法研究

目的建立腰息痛胶囊定性定量方法。方法采用薄层鉴别方法进行定性鉴别并对腰息痛胶囊中乌头碱限量进行检查。运用高效液相色谱法测定欧前胡素的含量。结果确立了制剂中当归、白芷、三七、赤芍鉴别方法,确立了制剂中乌头碱限量检查方法。通过方法学系统考察,建立了欧前胡素的含量测定方法,其欧前胡素的线性范围为0.033 6～0.268 8μg,回归方程Y=39.09X＋3.720（r=0.999 97）,平均加样回收率97.8%,RSD=0.6%（n=6）。结论建立的鉴别、检查和含量测定方法简便、准确、重复性好,适用于腰息痛胶囊的质量控制。     

Antihypertensive and vascular remodelling effects of the imperatorin derivative OW1 in renovascular hypertension rats

OW1 is a novel imperatorin derivative that exhibits vasodilator activity. In the present study, the antihypertensive effect of and inhibition of vascular remodelling by OW1 were investigated in two‐kidney, one‐clip (2K1C) renovascular hypertensive rats. Rats were subjected to the 2K1C procedure and treated with OW1 (40 or 80 mg/kg per day) for 8 weeks. Blood pressure was measured in conscious rats. Microalbumin (mALB) and total protein (U‐TP) concentrations were determined in the urine, as were plasma concentrations of angiotensin (Ang) II, calcitonin gene‐related peptide (CGRP) and angiotensin‐converting enzyme 1 (ACE). The unclipped kidney was stained with haematoxylin and eosin and Masson trichrome, whereas aortic sections were stained with Masson trichrome. In addition, OW1‐induced vasodilatation was evaluated in vitro in rat mesenteric and renal arteries. Immunohistochemical analysis was used to quantify collagen I and III expression. OW1 relaxed rat mesenteric and renal arterial rings in vitro. Treatment of 2K1C hypertensive rats with OW1 (40 and 80 mg/kg per day) for 8 weeks significantly decreased blood pressure. In addition, OW1 reduced plasma AngII and ACE concentrations and increased plasma CGRP concentrations. At 80 mg/kg per day, OW1 decreased blood urea nitrogen, mALB and U‐TP levels. Histological analysis revealed that OW1 reduced renal arteriolar thickness and relieved the structural hypertrophic arteries. Moreover, OW1 had an inhibitory effect on vascular remodelling and renal lesions in hypertensive rats. In conclusion, the results suggest that OW1 could potentially be a novel candidate for hypertension intervention.     

SPE-HPLC法测定鼻炎灵片中黄芩苷与欧前胡素的含量

目的建立SPE-HPLC测定鼻炎灵片中的黄芩苷、欧前胡素的含量测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱：Diamonsil C18（5μm,250 mm×4.6 mm）,流动相：甲醇（A）-0.1%磷酸溶液（B）梯度洗脱,检测波长：280 nm;流速1.0ml·min-1,进样量10μl。结果黄芩苷在1.311~131.1μg·ml-1范围内线性关系良好（r=0.9993）,平均加样回收率为99.8%,RSD为0.1%（n=6）;欧前胡素在1.003~100.3μg·ml-1范围内具有良好的线性关系（r=0.9994）,平均加样回收率为99.0%,RSD为0.6%（n=6）。结论该方法简便快捷,准确、重复性好,灵敏度高,可用于建立鼻炎灵片的质量控制。     

正交设计优选白芷的渗漉法提取工艺

目的 优选白芷的渗漉法提取工艺.方法 以欧前胡素的含量为指标,应用正交试验设计筛选白芷的最佳提取工艺条件.结果 最佳提取工艺为A2B2C3D1,即用8倍量的70%乙醇浸泡24h,渗漉速度2m/mim.结论 优选得到的工艺稳定可行.     

白芷提取物欧前胡素对洗涤血小板功能的影响

目的:观察白芷提取物欧前胡素对洗涤血小板的影响。方法:分别以ADP和凝血酶诱导血小板聚集,考察欧前胡素对血小板聚集的影响。结果:欧前胡素有极显著降低对ADP和凝血酶诱导的血小板聚集率和聚集曲线斜率的作用(P<0.01)。通过比较凝血酶诱导的聚集曲线,给药组与空白对照组有显著性差异,说明欧前胡素对血小板的第二相聚集反应有抑制作用。结论:欧前胡素有抑制血小板聚集的作用,并对血小板释放和花生四烯酸代谢有影响。     

白芷提取液加热过程中欧前胡素稳定性研究

目的:研究白芷提取液65℃和70℃加热过程中欧前胡素的浓度变化,为浓缩温度的设定提供依据。方法:采用高效液相色谱法,测定欧前胡素在65℃、70℃不同加热时间的浓度变化。结果:在65℃和70℃水浴恒温条件下,0～8 h欧前胡素浓度保持不变。结论:在65℃、70℃欧前胡素受热8 h浓度稳定。