RP-HPLC法同时测定九味羌活口服液中13种成分

目的建立RP-HPLC法同时测定九味羌活口服液(JQOL)中梓醇、甘草苷、甘草酸铵、细辛脂素、毛蕊花糖苷、苍术素、阿魏酸、欧前胡素、羌活醇、异欧前胡素、黄芩苷、升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的方法。方法采用Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-5.0 mmol/L KH2PO4溶液(稀磷酸调节p H值至3.0)(15∶85)为流动相,梯度洗脱,体积流量为1.0 m L/min。结果梓醇、甘草苷、甘草酸铵、细辛脂素、毛蕊花糖苷、苍术素、阿魏酸、欧前胡素、羌活醇、异欧前胡素、黄芩苷、升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷13种成分能够达到很好分离;其线性范围分别为2.08~31.22μg/m L(r=0.999 5)、4.01~60.15μg/m L(r=0.999 2)、10.09~151.31μg/m L(r=0.999 2)、4.98~74.63μg/m L(r=0.999 4)、2.05~30.74μg/m L(r=0.999 6)、4.10~61.46μg/m L(r=0.999 6)、2.93~43.98μg/m L(r=0.999 3)、2.04~30.66μg/m L(r=0.999 5)、12.54~181.55μg/m L(r=0.999 7)、53.95~89.23μg/m L(r=0.999 5)、12.05~180.68μg/m L(r=0.999 5)、5.97~89.51μg/m L(r=0.999 4)、7.99~119.82μg/m L(r=0.999 6),平均加样回收率分别为98.8%、98.6%、101.2%、99.4%、100.1%、99.7%、98.9%、99.4%、100.5%、98.7%、101.2%、98.3%、99.1%,RSD分别为1.9%、1.8%、1.5%、0.8%、0.6%、0.9%、1.2%、2.0%、1.6%、0.8%、1.4%、1.5%、1.7%(n=6)。9批次JQOL供试品中梓醇、甘草苷、甘草酸铵、细辛脂素、毛蕊花糖苷、苍术素、阿魏酸、欧前胡素、羌活醇、异欧前胡素、黄芩苷、升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷质量浓度分别为0.229~0.259 mg/L、1.231~1.260 mg/L、0.849~0.877 mg/L、0.357~0.371 mg/L、0.149~0.169 mg/L、0.941~0.967 mg/L、0.529~0.547 mg/L、0.269~0.294 mg/L、1.039~1.067 mg/L、0.043~0.064 mg/L、3.631~3.649 mg/L、0.157~0.183 mg/L、0.068~0.084 mg/L。结论该法分离度好,快速简便,重现性好,可用于JQOL的质量控制。     

白芷香豆素类化合物与P-糖蛋白体外亲和作用研究

目的研究白芷香豆素类化合物(欧前胡素、异欧前胡素、佛手柑内酯、氧化前胡素)在体外对P-糖蛋白(P-gp)三磷酸腺苷(ATP)酶活性的影响,进而探讨白芷香豆素类成分影响P-gp介导药物转运的机制。方法采用ATP酶活性测试法判断白芷香豆素类化合物是否为P-gp的底物。结果欧前胡素和氧化前胡素各质量浓度组平均荧光强度值(ΔRLUTC)均大于基础平均荧光强度值(ΔRLUbasal);异欧前胡素中、低质量浓度组及佛手柑内酯高、低质量浓度组ΔRLUTC小于ΔRLUbasal。结论欧前胡素和氧化前胡素为非浓度依赖的P-gp ATP酶抑制剂,异欧前胡素、佛手柑内酯在低质量浓度时可抑制ATP酶活性,对P-gp具有抑制作用;在高质量浓度时可诱导ATP酶活性,对P-gp具有诱导作用。     

欧前胡素对体外培养的人表皮黑素细胞Rab27a和酪氨酸酶的作用

目的： 观察欧前胡素对体外培养的人表皮黑素细胞转运相关蛋白Rab27a和酪氨酸酶的作用。方法：体外分离、纯化培养人表皮黑素细胞。随机分为空白对照组和欧前胡素处理组,以50或25 μmol/L欧前胡素作用48 h后观察黑素细胞形态,免疫荧光法检测Rab27a 和酪氨酸酶在黑素细胞中的定位及变化,应用透射电镜观察黑素细胞黑素小体的超微结构。结果：欧前胡素作用48 h后,黑素细胞的树状突起缩短,免疫荧光检测显示,黑素细胞Rab27a和酪氨酸酶蛋白在细胞内定位未见明显变化,但欧前胡素作用后Rab27a蛋白的荧光强度轻度增强(P<0.05),而酪氨酸酶荧光强度降低(P<0.05)。透射电镜结果可见黑素细胞中的黑素小体数量减少。结论：欧前胡素对体外培养的人表皮黑素细胞Rab27a表达呈促进作用,对酪氨酸酶活性及黑素合成呈抑制作用。     

N、P和K肥配施对川白芷产量及欧前胡素和异欧前胡素量的影响

目的 研究N、P和K肥的施用量及配比对川白芷产量和欧前胡素和异欧前胡素量的影响。方法 采用L₉(3⁴)正交组合设计田间试验,测定川白芷产量,HPLC法测定根部欧前胡素和异欧前胡素量。结果 不同N、P和K肥施用量及配比会显著影响川白芷的产量以及品质。N、P、K肥配施对川白芷的产量均表现为正效应,但对川白芷欧前胡素与异欧前胡素量的影响差异较大。在低K水平下（K₂O 120 kg/hm²）,适当增加N、P肥用量可增大欧前胡素的量;在高K水平下（K₂O 240 kg/hm²）,适中的N、P肥配比有利异欧前胡素的形成;在高N水平下（195 kg/hm²）,无论P、K肥用量及配比多少欧前胡素、异欧前胡素量均小于空白(ck)。正交方差分析结果还表明,N、P和K肥对产量影响均达极显著水平,影响顺序为P肥＞N肥>K肥;N、P和K肥对欧前胡素量的影响均达到了极显著水平（P＜0.01）,其中P、K肥影响比N肥大;但仅N肥对异欧前胡素量影响到达显著水（P＜0.05）。所有处理中,N施用量为150 kg/hm²,P₂O₅为225 kg/hm²,K₂O为120 kg/hm²,N-P₂O₅-K₂O的配比为1.3︰1.9︰1的产量和欧前胡素量最高,与ck之间的差异均达到了显著水平,同时异欧前胡素量也较高。结论 在本实验条件下,得到较适宜配施方案,从而使川白芷产量及欧前胡素和异欧前胡素量均提高。     

HPLC法同时测定藿香正气胶囊中8个主要成分的含量

目的:建立同时测定藿香正气胶囊中甘草苷、柚皮苷、橙皮苷、麝香草酚、欧前胡素、和厚朴酚、异欧前胡素及厚朴酚共8个主要化学成分的HPLC分析方法。方法:采用C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为水-甲醇-乙腈,梯度洗脱(0.01～20 min,68∶30∶2→60∶38∶2;20～50 min,60∶38∶2→34∶64∶2;50～65 min,34∶64∶2;65～75 min,34∶64∶2→28∶70∶2;75～85 min,28∶70∶2→68∶30∶2),流速1.0 mL.min-1,检测波长283 nm。结果:在各自的线性范围内甘草苷、柚皮苷、橙皮苷、麝香草酚、欧前胡素、和厚朴酚、异欧前胡素、厚朴酚8个化合物的标准曲线呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为97.4%,98.5%,97.4%,98.6%,97.8%,99.2%,97.0%,97.5%;所有化合物的精密度和重复性试验的RSD均<3.0%。结论:该分析方法简单、灵敏、准确,重复性好,可同时分析藿香正气胶囊中的主要成分。     

偏正颗粒的提取工艺优选及其急性毒性试验

目的优选偏正颗粒的提取工艺并考察其醇沉工艺,观察偏正颗粒的急性毒性反应。方法以欧前胡素含量为指标,采用正交试验法优选偏正颗粒的提取工艺;通过对小鼠灌胃给药,观察偏正颗粒对小鼠的毒性反应。结果优化的提取工艺为加6倍量水,浸泡1 h,煎煮2次,每次1 h,并选用50%的乙醇沉淀;将因偏正颗粒的毒性反应出现死亡的动物解剖,未见明显病理改变。结论优选的工艺合理、可行。偏正颗粒在规定剂量下使用安全。     

高效液相色谱法测定复方白芷乳膏中欧前胡素和异欧前胡素含量

目的建立测定复方白芷乳膏中欧前胡素和异欧前胡素含量的高效液相色谱法。方法Waterse2695高效液相色谱系统,EmpowerWaters工作站,Waters2489UV／visibleDetector检测器;HypersilODS2C18柱（150mm×4．6mm,5txm）,流速1．0mL／min,流动相甲醇一水（62：38）,检测波长254nm,进样量20uL。结果欧前胡素进样质量浓度在1．274—25．48[zg／mL范围内与峰面积呈良好的线性关系（r：0．99999）;异欧前胡素与峰面积在1．338。26．76Ixg／mL范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．99999）。欧前胡素的平均加样回收率为100．57％（n=9）,RSD=1．31％;异欧前胡素的平均加样回收率为100．87％（n=9）,RSD=1．95％。结论所用方法操作简便、准确、稳定、灵敏度高,适用于复方白芷乳膏中欧前胡素和异欧前胡素的质量控制。     

不同硫磺熏蒸程度白芷二氧化硫残留量与有效成分含量的相关性

目的:探讨经硫磺熏蒸后白芷的二氧化硫残留量与有效成分欧前胡素和氧化前胡素含量的相关性,为制订其科学合理、客观可控的二氧化硫限量标准提供科学依据.方法:采用《中国药典》2010年版附录方法进行二氧化硫残留量的动态检测;采用课题组前期建立的HPLC对不同硫磺熏蒸程度的白芷进行欧前胡素和氧化前胡素的含量测定;采用曲线回归的方法进行二氧化硫残留量与有效成分含量的关联分析.结果:自然晒干的白芷样品其二氧化硫残留量低于其他经过硫磺熏蒸的样品,氧化前胡素和欧前胡素均高于其他经过硫磺熏蒸的样品.随着硫磺用量和熏蒸时间的增加,二氧化硫残留量升高,氧化前胡素和欧前胡素的含量下降,且二者随着二氧化硫残留量增加而降低.结论:初步探讨了随着硫磺熏蒸程度的增加,二氧化硫残留量、有效成分含量的变化规律,为下一步的深入研究提供参考.     

高效液相色谱法测定清眩片中欧前胡素和异欧前胡素的含量

目的建立清眩片中欧前胡素和异欧前胡素含量测定的方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱：C18-A色谱柱（伊利特,200mm×4．6mm,5μm）;流动相：甲醇水（55：45）;流速：1．0mL·min^-1;检测波长：300nm。结果欧前胡素和异欧前胡素进样量分别在0．0151～0．1359μg和0．0105～0．0945μg与峰面积具有良好的线性关系（r=0．9999）,平均加样回收率分别为99．6％和100．6％,RSD分别为0．56％（n=6）和1．92％（n=6）。结论本方法能够快速、准确、方便的检测清眩片中欧前胡素和异欧前胡素的含量,可作为清眩片质量评价的依据。     

鼻炎片中欧前胡素含量测定

目的建立高效液相色谱法测定鼻炎片中白芷所含有效成分欧前胡素的含量。方法采用Diamonsil C18分析色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为甲醇-水（60∶40）,流速为1.0 mL/min,检测波长为300 nm。结果欧前胡素在0.044～1.408μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系,r=0.999 9,加样回收率为98.91%,RSD=1.93%。结论本方法快速、准确,可用于鼻炎片的质量控制。