Antimicrobial Photodynamic Treatment with Mother Juices and Their Single Compounds as Photosensitizers

The potent antimicrobial effects of antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) with visible light plus water-filtered infrared-A irradiation and natural compounds as photosensitizers (PSs) have recently been demonstrated. The aim of this study was to obtain information on the antimicrobial effects of aPDT with mother juices against typical cariogenic oral Streptococcus pathogens in their planktonic form and determine its eradication potential on total human salivary bacteria from volunteers. Mother juices of pomegranate, bilberry, and chokeberry at different concentrations were used as PSs. The unweighted (absolute) irradiance was 200 mW cm⁻², applied five minutes. Planktonic cultures of Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus and total mixed bacteria from pooled saliva of volunteers were treated with aPDT. Up to more than 5 log₁₀ of S. mutans and S. sobrinus were killed by aPDT with 0.4% and 0.8% pomegranate juice, 3% and 50% chokeberry juice, and 12.5% bilberry juice (both strains). Concentrations of at least 25% (pomegranate) and >50% (chokeberry and bilberry) eradicated the mixed bacteria in saliva samples. This pilot study has shown that pomegranate mother juice is superior to the berry juices as a multicomponent PS for killing pathogenic oral bacteria with aPDT.     

金丝桃属植物的HPLC指纹谱研究

目的 建立金丝桃属植物的HPLC指纹谱，对该属植物中所含的化学成分进行综合评价并为该属植物鉴定提供依据。方法 采用HPLC方法将获得的色谱数据转化为色谱指纹谱，据此对样品进行分折鉴别。结果 不同种金丝桃均显示了它们各自的指纹特征。结论HPLC指纹谱可以用来鉴别金丝桃属的不同种植物，该属植物种间的化学成分有较高的相似性，但各相应的成分含量差异显著。     

基于UPLC多指标测定比较不同来源款冬花药材的质量

目的建立同时测定款冬花药材中12种成分的超高效液相色谱(UPLC)方法,并对不同产地药材的质量状况进行评价。方法采用BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱;流动相为乙腈(A)-0.03%三氟乙酸水(B),梯度洗脱,体积流量0.5 m L/min,检测波长254 nm,柱温40℃。通过计算不同成分的变异系数,采用聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA)对不同产地的款冬花药材进行分析。结果建立的测定方法符合方法学要求,款冬花药材中不同成分的变异系数差别较大,其中金丝桃苷的变异系数达到0.91。PCA和HCA显示野生款冬和栽培款冬具有明显差异,其中野生款冬中绿原酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、款冬酮等成分量相对较高。结论不同产地款冬花药材存在较大差异,体现在不同成分的变异范围明显不同,野生和栽培药材存在差异,为保证临床用药的安全有效,款冬花药材间的差异性对临床疗效的影响有待进一步深入研究。     

金丝桃苷固体纳米晶体的制备及其体外释放研究

目的制备金丝桃苷固体纳米晶体(hyperoside solid nanocrystal,Hyp-SN),并考察其体外释放特性。方法采用高压均质法制备Hyp纳米混悬剂,并进一步冷冻干燥得Hyp-SN。以平均粒径及多分散度指数(PI)为指标,通过单因素试验优化处方及制备工艺;对最佳处方及制备工艺所得Hyp-SN进行理化性质表征,并测定其体外释放特性。结果以叔丁醇为冻干保护剂制备的Hyp-SN平均粒径为(405.2±14.6)nm,PI为0.25±0.08(n=3);扫描电镜显示Hyp-SN呈不规则棒状,大小较均匀,X射线衍射图谱表明Hyp制备成纳米混悬剂后,仍以结晶状态存在;体外释放结果表明Hyp-SN的溶出速率和溶解度显著高于Hyp物理混合物。结论 Hyp-SN制备方法简便,能显著提高难溶性药物的溶解度和溶出速率,具有广阔的应用前景。     

金丝桃苷预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤作用与PI3K/Akt信号通路的关系

研究金丝桃苷(hyperoside,Hyp)预处理对抗大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)的保护作用及其与PI3K/Akt信号通路的关系。通过可逆性左冠状动脉前降支结扎法建立心肌缺血再灌注模型,给予大鼠心肌缺血30 min,复灌120 min。健康雄性SD大鼠60只,随机分为5组:假手术组(Sham组)、缺血再灌组(MIRI组)、Hyp预处理组(Hyp组)、Hyp预处理联合PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002组(Hyp+LY组)及PI3K/Akt抑制剂组(LY组)。记录各组大鼠心脏血流动力学指标,测算心肌梗死面积和大鼠血清中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肿瘤坏死因子(TNF-α)及白介素-6(IL-6)活性。Western blot法检测心肌p-Akt,Akt,Bcl-2和Bax的蛋白表达。结果显示,与MIRI组比较,Hyp组大鼠心脏血流动力学指标明显改善,心肌梗死面积显著降低;血清中MDA含量和CK,CK-MB,TNF-α,IL-6活性降低,SOD,CAT和GSH-Px活性明显增强;p-Akt的蛋白表达和Akt磷酸化水平明显增强,且Bcl-2蛋白表达增强,Bax蛋白表达减弱(P<0.01)。而LY294002可显著取消Hyp的以上作用(P<0.01)。结果表明,Hyp对抗大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用机制可能与其激活PI3K/Akt 信号通路,上调Bcl-2 蛋白表达,下调Bax 蛋白表达等作用有关。     

HPLC测定烈香杜鹃中6种黄酮成分的含量及主成分分析

目的: 建立HPLC测定烈香杜鹃中芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、槲皮素、山柰酚和异鼠李素6种黄酮成分的方法,同时应用主成分分析评价其质量。方法: 样品经75%甲醇超声,采用C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),乙腈-0.2%磷酸水为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长365 nm。结果: 芦丁,金丝桃苷,槲皮苷,槲皮素,山柰酚,异鼠李素在0.009 7～0.194 9,0.007 1～0.141 6,0.188 0～3.752,0.027 1～0.434 0,0.010 8～0.216 0,0.005 8～0.116 6 μg线性范围良好,加样回收率均在100%～105%,RSD都 < 3%。结论: HPLC操作简便、重复性好、结果准确。根据不同化学指标,采用主成分分析可以进行烈香杜鹃质量评价。     

金丝桃苷体外抗胃癌作用及其机制研究

目的：研究金丝桃苷（Hyperoside）对胃癌BGC-823细胞的生长、周期及凋亡的作用,并通过检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase 3、caspase 8、caspase 9）的活性探讨金丝桃苷诱导胃癌凋亡的可能机制。方法：采用MTT法检测金丝桃苷对胃癌BGC-823细胞的增殖影响;流式细胞技术检测金丝桃苷对胃癌BGC-823细胞周期和凋亡的影响;比色法测定金丝桃苷对胃癌BGC-823细胞凋亡过程中caspase 3、caspase 8和caspase 9活性影响。结果：金丝桃苷处理BGC-823细胞24h和48h后,细胞生长明显抑制,作用24h和48h时其IC50分别为32.14和22.67μg/mL;金丝桃苷处理组与对照组相比,胃癌BGC-823细胞G0/G1期比例明显增加,凋亡细胞比例明显增加;caspase 3、caspase 8和caspase9活性随药物浓度增加而逐渐升高。结论：金丝桃苷能够通过阻断细胞周期、诱导细胞凋亡有效抗胃癌,其诱导肿瘤细胞凋亡机制可能与激活caspase 3、caspase 8和caspase 9活性密切相关。     

荷叶HPLC-UV指纹图谱研究

目的采用HPLC法建立荷叶药材的指纹图谱。方法 Ultimate XB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.1%甲酸+0.2%三乙胺溶液(A)-乙腈(B)进行梯度洗脱,检测波长254 nm,体积流量1.0 mL.min-1,柱温35℃。结果建立了荷叶的HPLC-UV的指纹图谱,指定出11个共有指纹峰,共指认3个共有峰的结构并对不同产地和不同采收时期荷叶的相似度进行了比较。结论本方法操作简便,快速,重现性好,为荷叶的鉴别和质量控制提供有效依据。     

粉碎过筛条件对吴茱萸含量测定结果的影响及解决办法

目的研究不同的粉碎过筛条件对吴茱萸含量测定的影响规律,提出能反映取样代表性的粉碎过筛方法,以减小实验误差。方法以绿原酸、金丝桃苷、去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸新碱为指标,采用HPLC法测定不同粉碎过筛条件对其含量测定的影响。通过比较不同条件下各指标成分的含量及分析结果的精密度,剖析粉碎过筛影响含量测定结果的原因,进而确定合适的粉碎过筛方法。结果吴茱萸中6种活性成分的含量与内果皮在粉末中的比例呈负相关。按《中国药典》2015年版方法处理样品,6种活性成分含量测定的日内精密度和重复性试验结果多数不符合要求(RSD5.0%)。当所有粉末都过2号筛时,分析结果的精密度和重复性都符合分析要求(RSD2.0%)。结论内果皮等纤维素颗粒在粉末中的比例是药材粉碎过筛环节最关键的影响因素。所有粉末都能过2号筛的粉碎过筛方式既保证了取样的代表性,又解决了分析结果的精密度和准确度符合分析要求的问题。     

四妙勇安汤水煎液化学成分研究

目的对中药复方四妙勇安汤水煎液中的化学成分进行研究。方法利用硅胶、ODS、Sephadex LH-20、AB-8大孔吸附树脂柱色谱等分离技术对四妙勇安汤水煎液中化学成分进行分离,结合理化性质及MS、NMR等谱学数据鉴定其结构。结果从四妙勇安汤水煎液中共分离并鉴定了22个化合物,分别为5(S)-5-carboxystrictosidine(1)、哈巴俄苷(2)、京尼平苷(3)、甘草次酸(4)、甘草酸(5)、金丝桃苷(6)、甘草苷(7)、异甘草苷(8)、甘草素(9)、异甘草素(10)、木犀草素(11)、槲皮素(12)、2-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)ethyl O-α-arabinopyranosyl-(1→6)-O-α-rhamnopyranosyl-(1→3)-O-β-glucopyranoside(13)、安格洛苷C(14)、类叶升麻苷(15)、桂皮酸(16)、阿魏酸(17)、(E)-aldosecologanin(18)、原儿茶酸(19)、豆甾醇(20)、三十一烷醇(21)、胡萝卜苷(22)。结论化合物1~3、5、6、8、11、13~15、18~21为首次从四妙勇安汤中分离得到。