核糖体蛋白L6在K562/A02和K562细胞株中的表达差异

目的探讨核糖体蛋白L6（ribosomal proteinL6，RPL6）在急性髓细胞性白血病耐药细胞系K562／A02和敏感细胞系K562中的差异表达。方法分别从K562／A02和K562细胞中提取总RNA，以内参对照RT—PCR检测fuPL6基因表达。结果RPL6在飚62／A02细胞中的表达较K562高（P〈0．001）。结论在耐药细胞系K562／A02高表达RPL6可能与白血病耐药有关。     

Relationsip between PTEN and VEGF Expression and Clinicopathological Characteristics in HCC

Recent reports have identified that phosphatase and tensin homlog deleted on chromosome ten protein (PTEN) is a tumor suppressor gene in the human body with a double-specific phosphatase activity of lipid phosphatase and protein phosphatase[1]. Vascular endo-thelial growth factor (VEGF) is known as one of the ut-most factors stimulating tumor blood vessel growth. Hepatocellular carcinoma (HCC) is a solid malignant tumor, whose growth is rapid, with frequent intrahepatic dissemination and m…     

Signaling modulation of bile salt-induced necrosis in isolated rat hepatocytes.

Hydrophobic bile salts induce either necrosis or apoptosis depending on the severity of the injury caused by them. Since bile salt-induced apoptosis is influenced by Ca2+- and protein kinase-signaling pathways, and both necrosis and apoptosis share common initiating mechanisms, we analyzed whether these signaling cascades also influence bile salt-induced necrosis in isolated rat hepatocytes. Taurochenodeoxycholate (TCDC, 0.25-1.50 mM, 2 h) reduced, in a dose-dependent manner, the percentage of viable hepatocytes, and increased the release of the cytosolic enzyme, lactate dehydrogenase (LDH) and alanine aminotransferase (ALAT), and that of the plasma membrane enzyme, alkaline phosphatase (AP). The PKC inhibitors, H7 (100 microM) and chelerythrine (2.5 microM), both prevented significantly TCDC-induced necrosis. On the contrary, the PKA activator, dibutyryl-cAMP, exacerbated TCDC-induced cell damage in a dose-dependent manner; this effect was more likely due to cAMP-mediated PKA activation, as the PKA inhibitor, KT5720 (1 microM), counteracted this effect. Instead, the intracellular Ca2+ chelator, BAPTA/AM (20 microM), was without effect. TCDC (1 mM) increased lipid peroxidation from 0.7 +/- 0.2 to 7.5 +/- 0.9 nmol of malondialdehyde per mg of protein, p < 0.001; the addition of the free radical scavenger, diphenyl-p-phenylendiamine, completely blocked this increase and prevented significantly TCDC-induced necrosis. PKC inhibition induced only a slight attenuation of TCDC-induced lipid peroxidation. Possible mechanisms accounting for the modulatory effect of signal transduction pathways on TCDC-induced necrosis, including signaling influence on TCDC transport events and TCDC-induced oxidative stress, are discussed.     

苦瓜蛋白在K562/A02细胞生长抑制和凋亡中的作用及其机制研究

目的:研究苦瓜蛋白(momordin)诱导人慢性粒细胞白血病耐药细胞株K562/A02的凋亡及作用机制.方法:采用CCK-8法检测细胞生长抑制率,FCM法和细胞形态学检测细胞凋亡,FCM法检测P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)、p53、bcl-2和caspase-3蛋白表达水平,并运用caspase-8活性检测试剂盒检测caspase-8的活性.结果:苦瓜蛋白能抑制K562/A02耐药细胞的生长且呈剂量依赖关系,并能诱导细胞凋亡,能使P-gp、p53和bcl-2的表达下降,而使caspase-3和caspase-8活性增强.结论:苦瓜蛋白可逆转耐药细胞株K562/A02的细胞凋亡受抑性,主要机制可能与其下调p53、P-gp和bcl-2的表达以及提高caspase活性有关.     

芪贞汤对人大肠癌纤维粘连蛋白黏附能力的影响

[目的]探讨扶正解毒活血法中药芪贞汤对人大肠癌高转移细胞株L-10细胞纤维粘连蛋白黏附能力的影响。[方法]通过体外细胞培养法,观察该方对L-10细胞纤粘连蛋白黏附能力的阻碍作用。[结果]芪贞汤对L-10细胞纤维粘连蛋白黏附能力明显抑制,并且显示了芪贞汤高浓度优于低浓度,有明显的浓度依存性;随着时间的推移,其抑制作用在变化,当作用120min时,阻碍作用达到高峰,随后其阻碍作用逐渐减低。[结论]扶正解毒活血法中药芪贞汤对人大肠癌高转移细胞株L-10细胞具有明显的抗纤维粘连蛋白黏附能力的作用,从而提示芪贞汤有可能通过抑制纤维粘连蛋白黏附能力,实现抑制癌的浸润和转移的作用。     

肝细胞癌组织中endoglin(CD105)和VEGF及p57kip2表达与预后的关系

目的探讨肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)endoglin (CD105)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和有丝分裂抑制因子(p57kip2)的表达与组织形态学和自然病程的关系.方法SP法检测143例资料完整的HCC中63例获访者肝癌组织和20例非肝癌肝组织中endoglin (CD105)、VEGF和p57kip2的表达.结果肝癌组织endoglin(CD105)、VEGF和p57kip2免疫组化阳性率分别为68.3%(43/63)、73.0%(46/63)和68.3%(43/63),显著高于癌旁组织及非癌肝组织,P=0.000 0.癌组织分化与VEGF、endoglin (CD105)和p57kip2表达差异无统计学意义(P值分别为0.097 8、0.139 3和0.839 7).endoglin (CD105)、VEGF和p57kip2表达不同,患者的生存时间有差别(P值分别为0.001 3、0.003 9和0.000 8),endoglin (CD105)和VEGF高表达,可能预示预后较差,而p57kip2高表达可能预示预后较好.p57kip2表达与endoglin(CD105)和VEGF表达呈负相关,r's值分别为-0.357 2和-0.272 5.结论endoglin(CD105)、VEGF蛋白的过度表达和p57kip2丢失可能与肝癌的发展及预后有关.     

血管内皮生长因子与抑癌基因PTEN在肝细胞癌组织中表达及临床意义

目的:观察第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(phosphatase and tensinhomlog deleted on chromosome ten protein,PTEN)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)在肝细胞癌(hepatocellular carcino-ma,HCC)中表达及其关系,并探讨两者与HCC发生、发展及肿瘤侵袭性的关系。方法:采用免疫组织化学链霉素亲合素-生物素-过氧化物酶复合物(SP)法、半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测60例HCC及癌旁组织中PTEN与VEGF蛋白及mRNA表达和微血管密度(microvessel density,MVD),并进一步分析它们之间的相关性及其与肝癌组织临床病理分期、侵袭性的关系。结果:HCC中PTEN蛋白及mRNA表达阳性强度明显低于癌旁组织,而VEGF阳性表达强度明显高于癌旁组织,且两者间呈负相关(r=-0·613、-0·572,P=0·000、0·002);肝癌组织分化程度、侵袭性与PTEN表达呈负相关(P=0·02、0·000),而与VEGF和MVD表达呈正相关(P=0·000);MVD与PTEN表达呈负相关(r=-0·439,P=0·001),而与VEGF表达呈正相关(r=0·645,P=0·000)。结论:PTEN和VEGF表达水平一定程度上能反映HCC组织分化和侵袭性强弱;HCC中PTEN表达缺失可能引起VEGF表达增加,从而在肿瘤侵袭、转移中发挥一定作用。     

骨髓增生异常综合征白血病转化危险因素研究

目的探讨骨髓增生异常综合征（MDS）白血病转化（LT）的危险因素。方法收集2012年 1月至2020年12月中国医学科学院血液病医院MDS诊疗中心确诊、具有完整的临床资料且进行LT情况随访的320例初诊的原发性MDS患者，回顾性分析发生LT的MDS患者初诊时临床和分子学特征以及MDS患者发生LT的危险因素。结果中位随访13.6（0.4～107.3）个月，随访期间共有75例（23.4％）MDS患者发生LT（LT组）。与未发生LT患者（未发生LT组）相比，LT组患者年龄更大（60岁对48岁，P<0.001）、骨髓原始细胞比例更高（7.0％对2.5％，P<0.001）。两组患者中骨髓纤维化（MF-2/3级比例）（13.9％对6.5％，P＝0.046）、WHO分型诊断构成比（P<0.001）、修订版国际预后积分系统（IPSS-R）分组（P<0.001）和IPSS-R细胞遗传学分组（P＝0.001）比较，差异均有统计学意义。初诊时，LT组和未发生LT组患者中位基因突变数目分别为1（1，3）个、1（0，2）个（P＝0.003）。LT组TP53（P＝0.034）、DNMT3A（P＝0.026）、NRAS（P＝0.027）、NPM1（P＝0.017）基因突变率显著高于未发生LT组。6例患者初诊和LT时两次二代测序结果比较，LT时患者中位基因突变数目增多［2（0～8）个对0.5（0～4）个］，中位等位基因突变频率（VAF）较初诊时明显增加。多因素Cox分析显示，骨髓原始细胞比例［以<5％为参照，5％～10％的HR＝4.587，95％CI 2.214～9.504，P<0.001；>10％的HR＝9.352，95％CI 4.049～21.600，P<0.001］，IPSS-R细胞遗传学分组差和极差（HR＝2.603，95％CI 1.229～5.511，P＝0.012）、DNMT3A突变（HR＝4.507，95％CI 1.889～10.753，P＝0.001）、NPM1突变（HR＝3.341，95％CI 1.164～9.591，P＝0.025）是MDS发生LT的独立危险因素。结论骨髓原始细胞比例高、IPSS-R细胞遗传学分组差和极差、DNMT3A突变、NPM1突变是MDS发生LT的独立危险因素。