乌拉尔甘草水溶性成分的HPLC指纹图谱研究

目的 建立乌拉尔甘草水溶性成分的HPLC指纹图谱,为有效控制乌拉尔甘草药材及甘草浸膏的质量奠定基础.方法 采用RP-HPLC法,色谱柱为Waters Sunfire~(TM) C_(18)(4.6 mm×150 mm,5 μm),以甲醇-0.1%磷酸水为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长260 nm,柱温25℃,检测时间95 min,分析了乌拉尔甘草主产区的12批样品.结果 在选定的色谱条件下,通过相似度分析确定18个色谱峰构成了乌拉尔甘草水溶性成分指纹图谱的特征峰,对其中的4个色谱峰进行了指认.结论 建立的乌拉尔甘草水溶性成分指纹图谱具有简便、稳定、可靠的优势,为乌拉尔甘草药材有效物质研究及甘草浸膏的质量控制奠定了基础.     

新疆甘草DNA片段的克隆、序列分析及其基因组DNA文库的构建

目的克隆新疆甘草DNA片段 ,构建新疆甘草基因组DNA文库。方法对新疆产 4种甘草进行随机扩增多态性DNA(RAPD)分析 ,回收甘草随机引物s12 1的PCR产物中 5 0 0bp左右的带 ,克隆到pMD18 T载体中 ,经电泳鉴定后测定序列 ,进行序列分析。用Sau3AI对所提新疆甘草基因组DNA进行酶切 ,回收 15～ 2 3kb之间的酶切产物片段 ,然后与LambdavectorBamHIArms进行连接、包装形成文库 ,计算文库重组噬菌体滴度、包装效率。结果获得了甘草 4 90bp的DNA片段 ,所建文库的重组噬菌体滴度为 3× 10 6pfu/ml、包装效率为 6× 10 6重组子 /μg载体DNA。结论成功克隆了新疆甘草DNA片段 ,并构建了基因组DNA文库 ,为进一步研究奠定了基础。     

甘草中有机氯类农药残留量的毛细管气相色谱测定

目的　对甘草中15种有机氯农药的毛细管气相色谱测定方法的研究。方法　样品经有机溶剂超声提取、Florisil硅土色谱柱净化后,采用不分流进样方式,用DB-5弹性石英毛细管柱经柱程序升温技术分离, 并用电子捕获检测器检测,外标法计算含量。结果　三水平的平均回收率为74.7%～119.2%,RSD为0.7%～18.9%;被测样品中均含有不同程度的农药残存。结论　本法简便,重复性及净化效果好,可用于甘草中15种有机氯农药的残留量检测。     

甘草种子萌发初期的酯酶与蛋白质研究

用电泳和分光光度法对甘草种子萌发初期的酯酶和可溶性蛋白质进行了研究。结果表明，萌发后48h左右，酯酶同工酶和可溶性蛋白质的电泳谱带数量较多，颜色较深，且可溶性蛋白质的含量较高。这说明48h前后是甘草种子萌发的代谢关键时期。     

甘草种子萌发初期的酯酶与蛋白质研究

用电泳和分光光度法对甘草种子萌发初期的酯酶和可溶性蛋白质进行了研究。结果表明，萌发后48h左右，酯酶同工酶和可溶性蛋白质的电泳谱带数量较多，颜色较深，且可溶性蛋白质的含量较高。这说明48h前后是甘草种子萌发的代谢关键时期。     

甘草、喜树碱配伍应用的抗肿瘤作用研究

目的：研究甘草、喜树碱配伍应用的抗肿瘤作用。应用SRB法对甘草、喜树碱配伍后进行体外抗肿瘤作用研究,对S180荷瘤小鼠的瘤重和H22小鼠的生存时间进行了的观察。甘草、喜树碱配伍后体外对肿瘤细胞生长的抑制作用明显,并对人成纤维细胞无影响;体内实验表明,甘草、喜树碱能抑制S180小鼠的瘤重,能显著延长H22小鼠的生存时间。提示甘草与喜树碱配伍应用后能增强喜树碱的抗肿瘤作用并能降低其毒性。     

乌拉尔甘草叶挥发油的化学成分分析

 目的分析乌拉尔甘草叶挥发油的化学成分。方法采用水蒸气蒸馏法提取,运用毛细管气相色谱-质谱联用法结合计算机检索对其化学成分进行分析和鉴定,用气相色谱面积归一化法测定各组分的相对百分含量。结果经毛细管色谱分离出76个峰,并且确认了其中的61种化合物。化学成分主要为十九烷(12.89%),廿烷(12.23%),1-十七烯(12.05%),2,6,11-三甲基-十二烷(7.54%),十八烷(7.46%),E-蒎烷(5.54%),二十二烷(5.30%),二十三烷(4.92%),十六烷基-环氧乙烷(3.09%) 等,上述9种化合物的含量占挥发油总量的71.02%。结论首次报道了乌拉尔甘草叶挥发油的化学成分,为进一步开发利用提供了科学依据。     

甘草Lx对青霉噻唑蛋白致敏大鼠过敏休克的保护作用

为寻找青霉素类过敏休克有效防治药物,研究了甘草Lx对青霉噻唑(BPO)-蛋白致敏大鼠过敏休克的保护作用。结果表明:大鼠腹腔注射甘草Lx,可明显降低BPO-蛋白致敏大鼠过敏休克发生率和死亡率,致敏对照组过敏休克发生率和死亡率分别为100%和70%,给药组均为5%。致敏对照组和Lx给药组大鼠血清抗体峰效价分别为96和4,肺组胺含量分别为99±6和64±8ng/g(P<0.01)。提示甘草Lx的保护作用可能与抑制致敏大鼠抗体生成和肺组胺合成有关。     

乌拉尔甘草优良品系选育研究(Ⅰ)——4个来源甘草遗传基础的AFLP分析

目的研究4个来源甘草属植物的遗传基础,初步探讨扩增片段长度多态性(AFLP)分子标记技术在甘草品系选育中的应用。方法采用AFLP标记技术对乌拉尔甘草栽培新品系"民勤1号"、"喀什1号"、"阿克苏1号"和常规栽培品系内蒙古乌拉尔甘草进行基因组DNA多态性、指纹图谱和UPGMA聚类分析。结果从64对引物组合中筛选出了8对引物组合进行多态性分析,以多态位点百分率最高的E-AAC/M-CAG组合构建4个来源甘草的指纹图谱。UPGMA聚类分析将4个来源甘草分为4组,表现出不同的亲缘关系。结论"民勤1号"、"喀什1号"、"阿克苏1号"形成了独特的基因构成,可以作为乌拉尔甘草优良栽培新品系选育目标进行深入研究。     

甘草种苗等级与植株生物量积累及药材产量和质量的关系

目的:研究甘草种苗等级与植株生物量积累、药材产量和质量的关系,为制定种苗标准提供依据。方法:以单根重量为分级指标对甘草种苗进行分级,采用聚类分析方法将种苗聚类分级为3个级别,以级别为处理进行田间试验,连续两年于生长期测定甘草植株鲜重和根干重,实验室测定药材有效成分含量。结果:一级、二级种苗(单根重10.0 g以上)生长期植株的总生物量、根干物质量及产量均大于三级种苗。3年生药材的甘草酸、甘草苷、芹糖基甘草苷和甘草素的含量,一、二级种苗高于三级种苗;不同等级种苗药材甘草酸和甘草苷的含量均高于2010年版中国药典一部标准。结论:种苗等级对甘草药材的质量及产量均有影响,生产上建议选用单根重在10.0g以上的种苗。