Solubilization and Stabilization of an Anti-HIV Thiocarbamate,NSC 629243, for Parenteral Delivery,Using Extemporaneous Emulsions

The O-alkyl-N-aryl thiocarbamate, I, (2-chloro-5-[[(l-methyl-ethoxy)thioxomethyl]amino]benzoic acid, 1-methylethylester, NSC 629243, also known as Uniroyal Jr.) is an experimental anti-HIV drug with very low water solubility (1.5 µg/mL). Early clinical studies required an injectable solution at 15 mg/mL, representing a solubility increase of 10⁴-fold. Adequate solubilization of this hydrophobic drug was achieved in 20% lipid emulsions. Extemporaneous emulsions were prepared by adding a concentrated drug solution to a commercially available parenteral emulsion. Various methods of preparation to minimize drug precipitation during its addition and enhance redissolution of precipitated drug were evaluated. The stability and mechanism(s) of decomposition of NSC 629243 in both 20% lipid emulsions and in natural oil vehicles were examined. In lipid emulsions, the shelf life at 25°C varied from 1 to >10 weeks, depending on the extent to which air was excluded from the preparation. The shelf life of 50 mg/mL solutions in natural oils at 25°C varied from <1 to >100 days depending on the oil and its supplier. A qualitative correlation was found between the initial rate of oxidation and the peroxide concentration in the oil. The primary degradation product in both systems was shown to be a disulfide dimer, II, formed via oxidation. Oxidation was inhibited by vacuum-sealing of emulsion formulations or incorporation of an oil-soluble thiol, thioglycolic acid (TGA), into oil formulations. TGA may inhibit oxidation by consuming free radicals or peroxide initiators or by reacting with the disulfide, II, to regenerate the starting drug.     

洛伐他汀增加受白细胞介素-1β刺激的平滑肌细胞一氧化氮合成

目的　研究洛伐他汀对大鼠血管平滑肌合成一氧化氮的影响及其机理。方法　血管平滑肌取自SpragueDawley大鼠 (2 0 0 - 2 5 0g)的胸主动脉。大鼠血管平滑肌细胞培养液中亚硝酸盐水平由比色法测定。结果　洛伐他汀 (10 5mol/L)明显增加白细胞介素 1β(IL 1β ,10ng/mL)诱导的一氧化氮合成 ,呈时间 (0 - 2 4小时 )依赖型。外源性甲羟戊酸 (10 4 mol/L)和芒牛儿芒牛儿焦磷酸 (GGPP ,10 μmol/L)可完全逆转洛伐他汀的上述作用。而且用C3外酶 (2 5 - 5 0 μg/mL)抑制Rho可引起类似上述洛伐他汀的作用。结论　洛伐他汀上调受IL 1β刺激的大鼠SMCs合成NO ,其机理可能与Rho蛋白活性抑制有关     

猪带绦虫囊尾蚴囊液谷胱甘肽S转换酶活性测定

目的：探讨猪带绦虫囊尾蚴囊液内谷胱甘肽Ｓ转换酶（ＧＳＴ）的活性。方法：测定酶催化反应后底物浓度的变化,计算ＧＳＴ活力单位。结果：囊液经１：２０稀释,重复４次测定酶促管与非酶促管吸光值,测得平均ＧＳＴ活性为６１．８４活力单位;囊液冻干品则几无ＧＳＴ活性。结论：囊液中存在游离形式的ＧＳＴ活性,对筛选保护性抗原和可能的化疗靶分子具有潜在意义。     

肝脏缺血再灌注损伤时大鼠血清谷胱甘肽及其相关酶活性的变化

目的 还原型谷胱甘肽（GSH）是体内重要的氧自由基的清除剂。本实验意在研究缺血肝脏复流后血清谷胱甘肽及其相关酶水平变化,及L－精氨酸对其水平的影响。方法 雄性SD大鼠90只随机分为3组;左中肝叶先行缺血70min,后恢复血流,于复流前静脉给予生理盐水（损伤组）,或复流前静脉给与L－精氨酸（200mg/kg)（处理组）;假手术组只给与暴露左中肝叶之肝蒂。各组动物在复流后0、1、3、6、12h取血清标本,用以检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、MDA、 还原型谷胱甘肽（GSH）,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－PX）和谷胱甘肽－S转移酶（GSH－ST）。并取肝组织标本做光镜和电镜观察,了解组织病变特点。结果 损伤组血清ALT、MDA、GSH－ST和GSH－PX含量较假手术组有明显的提高（P＜0．05）,而在复流后3h血清GSH水平明显降低（P＜0．05）。给与L－精氨酸处理可以明显减轻这种变化（P＜0．05）。结论 L－精氨酸对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用可能与上调还原型谷胱甘肽水平有关。血清GSH－PT、GSH－ST活性受到肝细胞损伤后释放增加的影响,与肝脏损伤程度有关。     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与脑血管疾病的研究

目的　探讨N 亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)基因多态性与脑血管疾病的关系。方法　利用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)方法 ,检测了 72名健康人和 71名脑血管疾病患者MTHFR基因的6 77碱基多态性突变C→T情况 ,并加以对照分析。结果　脑血管疾病患者MTHFR基因突变型V6 77基因的频率 ,与正常健康人对比差异无显著意义 (P >0 .0 5 )。结论　MTHFR基因突变型V6 77基因可能是脑血管疾病的又一个遗传风险因子 ,但本研究结果显示与脑血管疾病的发病无关 ,是否为脑血管病的遗传风险因素有待进一步研究。     

银染法与放射自显影法检测醛糖还原酶基因多态性的比较

目的 :探讨银染法检测醛糖还原酶 (aldosereductase,AR)基因 5′端微卫星多态性的可靠性。方法 :用银染法和放射自显影法分别检测相同样本DNA的AR基因微卫星多态性 ,比较二者结果。结果 :两种方法均能清楚判读基因型且结果一致。结论 :银染法可以代替放射自显影方法检测AR基因的微卫星多态性     

谷胱甘肽对高糖时人内皮细胞分泌前列环素和内皮素-1的影响

了解谷胱甘肽（ＧＳＨ）对高糖时人内皮细胞分泌前列环素（ＰＧＩ２）和内皮素－１（ＥＴ－１）的影响。方法： 原代培养人脐静脉内皮细胞,分别加入正常对照组,高糖组,正常＋ＧＳＨ组,高糖＋ＧＳＨ组培养基,放免法测定培养 ２４ｈ,４８ｈ,７２ｈ时培养基中的ＰＧＩ２和ＥＴ－１含量。结果：①高糖组较正常对照组ＰＧＩ２显著下降（Ｐ＜０．０１）,ＥＴ－１显 著升高（Ｐ＜０．０１）;②高糖＋ＧＳＨ组较高糖组ＰＧＩ２升高（Ｐ＜０．０１）,ＥＴ－１显著下降（Ｐ＜０．０１）。结论：ＧＳＨ在调节高 糖时人血管内皮细胞分泌 ＰＧＩ２／ＥＴ－１的平衡方面起一定作用。     

NAD-Sepharose 6MB亲和胶的制备及在2,5-二酮基-D-葡萄糖酸还原酶纯化中的应用

目的制备NAD亲和胶,用于分离纯化2,5-二酮基-D-葡萄糖酸还原酶。方法将NAD通过丁二酸二酰肼与溴化氰活化的Sepharose6MB胶联结,制得NAD亲和胶。从棒杆菌细胞中提取的2,5-二酮基-D-葡萄糖酸还原酶粗酶液用NAD亲和胶进行亲和层析纯化。结果NAD的结合率为71．67％;亲和层析回收率为77．27％;酶的比活提高了1．1倍。结论以NAD为配基的亲和胶用于纯化以NADPH为辅酶的2,5-DKG还原酶行之有效。     

胃癌及癌旁黏膜组织胎盘型谷胱甘肽S-转移酶的表达

①目的 探讨胎盘型谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴπ）在胃癌中表达的意义。②方法 应用ＬＳＡＢ免疫组化方法检测了胃癌及癌帝黏膜组织ＣＳＴπ的表达。③结果 正常胃黏膜组织ＧＳＴπ阳性表达率为１６．７％,肠上皮化生和不典型增生腺体ＧＳＴπ阳性表达率分别为７１．４％和１００．０％,显著高于正常胃黏膜（Ｘ＾２＝８．４,１９．４,Ｐ〈０．０１）。胃癌组织中ＧＳＴπ阳性表达率为８０．３％,高分化腺癌和低分化腺癌ＧＳ     

愈肝汤对慢性乙肝患者脂质过氧化的影响

目的　探讨愈肝汤对慢性乙肝患者的脂质过氧化作用。方法　 43例慢性乙肝患者服愈肝汤治疗 3mo ,观察其治疗前后超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH -Px)活力和过氧化脂质(LPO)水平的变化 ,并与 38例健康对照组比较。结果　慢性乙肝患者SOD、GSH -Px活力降低 (P <0 .0 5 ) ,LPO水平升高 (P <0 .0 5 ) ;愈肝汤可升高SOD和GSH -Px酶活性 (P <0 .0 1) ,降低LPO水平 (P <0 .0 5 )。结论　愈肝汤对慢性乙肝患者有明显的抗脂质过氧化作用 ,这是其治疗慢性乙型肝炎、减轻肝细胞损伤的重要机理之一。