骨碎补总黄酮联合纳米骨材料促进MC3T3-E1细胞的增殖分化

文题释义： 骨碎补总黄酮：是由水龙骨科植物槲蕨的干燥根茎中提取的有效成分,骨碎补总黄酮能够促进成骨细胞增殖,抑制破骨细胞成熟分化。 Wnt/β-catenin信号通路：是一类高度保守的信号通路,广泛存在于多细胞真核生物中,是皮肤发育过程中出现最早的分子信号,调控毛囊的生长发育和毛囊干细胞的迁移分化。β-catenin作为细胞内信号传导蛋白,是Wnt信号通路激活的一种重要的上皮细胞表面黏附分子,能够进入细胞核内传递Wnt信号,进一步激活靶基因开始转录,启动细胞增殖周期。 背景：前期研究发现,骨碎补总黄酮可促进纳米骨材料表面MC3T3-E1细胞的成骨分化,其作用机制有待进一步研究。 目的：探究骨碎补总黄酮联合纳米骨材料对MC3T3-E1细胞发挥作用的机制。 方法：将MC3T3-E1细胞与纳米骨材料共培养,选取100 mg/L和250 mg/L骨碎补总黄酮进行药物干预,以10 μg/L转化生长因子β刺激为阳性对照组。分组如下：①正常组;②DKK1组：Wnt通路抑制剂DKK1      (0.1 mg/L)阻断Wnt/β-catenin信号通路;③DKK1+转化生长因子β组;④DKK1+100 mg/L骨碎补总黄酮组;⑤DKK1+250 mg/L骨碎补总黄酮组;⑥DKK1+纳米骨+转化生长因子β组;⑦DKK1+纳米骨+100 mg/L骨碎补总黄酮组;⑧DKK1+纳米骨+250 mg/L骨碎补总黄酮组。在干预24,48 h后收获细胞,免疫荧光双染法观察Wnt/β-catenin通路中Wnt与LRP结合情况,Real-time PCR和Western blot检测β-catenin、LRP5、Gsk-3β、Cyclin D1、RUNX2的表达。 结果与结论：①激光共聚焦扫描显微镜下显示DKK1+转化生长因子β组、DKK1+250 mg/L骨碎补总黄酮组、DKK1+纳米骨+转化生长因子β组、DKK1+纳米骨+250 mg/L骨碎补总黄酮组棕黄色染色较明显,表明Wnt与LRP结合较其他组更好;②Real-time PCR和Western blot结果显示,骨碎补总黄酮可促进β-catenin、LRP5、RUNX2的表达,下调GSK-3β的表达,说明骨碎补总黄酮通过激活经典Wnt/β-catenin 信号通路促进成骨细胞增殖分化,且骨碎补总黄酮诱导的基因活化呈剂量依赖性。 ORCID: 0000-0002-2031-8644(李晋玉) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

骨碎补总黄酮可促进兔骨髓间充质干细胞的增殖和分化*

背景：骨碎补促进骨损伤愈合疗效确切,但具体作用机制尚不清楚。 目的：观察骨碎补总黄酮对兔骨髓间充质干细胞增殖、分化的影响。 方法：冲洗兔股骨和胫骨骨髓腔获取骨髓,采用密度梯度离心法联合贴壁培养法体外纯化扩增兔骨髓间充质干细胞;以四甲基偶氮唑蓝法测定不同浓度骨碎总黄酮对兔骨髓间充质干细胞增殖的影响;经骨碎补总黄酮体外诱导后,行扫描电镜形态学观察,碱性磷酸酶染色、茜素红染色和Von Kossa银染色了解细胞钙化情况。 结果与结论：兔骨髓间充质干细胞可以通过密度梯度离心法联合贴壁培养法扩增和纯化;含骨碎补总黄酮血清培养后,四甲基偶氮唑蓝测定结果显示,骨碎补总黄酮浓度为10-6 mmol/L时可明显促进兔骨髓间充质干细胞增殖。经骨碎补总黄酮诱导液诱导,扫描电镜下可见成骨细胞样形态和钙结节形成;细胞碱性磷酸酶染色、钙结节茜素红染色和Von Kossa银染色均呈阳性,提示骨碎补总黄酮可促进兔骨髓间充质干细胞增殖和分化。     

黄酮对视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的:观察黄酮对氧化剂所诱导的视网膜色素上皮细胞(RPE)的保护作用。方法:在体研究中,预先给予5g/L黄酮滴眼液(3次/d),1wk后舌下静脉注射NaIO3诱导大鼠RPE变性,在2和4wk末,采用视网膜电图(ERG)测量C波。离体研究中,采用缺氧、H2O2、NaN3和t-BHP诱导RPE细胞损伤,并用MTT法检测细胞的存活率。结果:ERG的C波结果表明,第4wk末,黄酮抑制了由NaIO3诱导的大鼠RPE变性。离体研究结果表明,黄酮对多种氧化剂所诱导的RPE细胞损伤具有保护作用。结论:黄酮对氧化诱导的在体和离体视网膜色素上皮细胞均具有保护作用。     

硝苯地平与银杏黄酮的体外代谢性相互作用

 目的通过体外代谢获得药物相互作用的有关数据,以预测临床联合用药时发生代谢性药物相互作用的可能性。方法以HPLC测定孵育液中剩余银杏黄酮的浓度,计算共孵育药物硝苯地平对银杏黄酮3个苷元的IC₅₀值和K_i值;以HPLC测定孵育液中硝苯地平的浓度,计算其代谢抑制率。结果硝苯地平与银杏黄酮进行体外共孵育时,代谢互受影响。结论两药合用时宜慎重。     

蒲黄总黄酮对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢的影响

目的探讨蒲黄总黄酮对脂肪细胞糖脂代谢的影响。方法药物处理胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞24h,通过检测培养液中的葡萄糖含量反映葡萄糖消耗量;XTT法观察药物对细胞活性的影响;3H-葡萄糖摄入法观察细胞对葡萄糖的转运率;通过检测上清液中的浓度观察细胞游离脂肪酸(freefattyacid,FFA)的溢出。结果蒲黄总黄酮在浓度为0.025~0.4g/L时有增加葡萄糖消耗的作用,且呈剂量效应。当浓度为0.4g/L时,XTT值明显下降,显示对细胞的毒性作用。在0.2g/L时,蒲黄总黄酮与罗格列酮相似,可明显提高细胞对3H-脱氧葡萄糖的转运率。蒲黄总黄酮组培养上清液中FFA浓度明显低于空白对照组,而罗格列酮组则无明显差异。结论蒲黄总黄酮能显著增加3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖摄取和消耗,同时可减少FFA溢出,通过调节糖代谢和脂代谢改善胰岛素抵抗。     

蜂胶黄酮对衰老小鼠胸腺bcl-2、bax基因mRNA表达的影响

目的：研究蜂胶黄酮对D-半乳糖致衰老小鼠胸腺bcl-2、bax基因mRNA表达的影响,探讨蜂胶黄酮的抗衰老机制。方法：用D-半乳糖建立衰老小鼠模型,以蜂胶黄酮治疗,RT-PCR法观察小鼠胸腺bcl-2、bax基因mRNA表达。结果：与正常对照组比较,模型组bcl-2基因表达降低,bax基因表达升高,差异有统计学意义（P〈0.01）;与模型组比较,治疗组bcl-2基因表达升高,bax基因表达降低,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：蜂胶黄酮能增加衰老小鼠bcl-2基因表达,降低bax基因表达,具有抗衰老作用。     

马齿苋总黄酮对垂体后叶素诱发小鼠急性心肌缺血的保护作用

目的 观察马齿苋总黄酮(POTF)对垂体后叶素(Pit)诱发小鼠急性心肌缺血的影响.方法 ip Pit予小鼠,建立急性心肌缺血模型,记录小鼠标准Ⅱ导联心电图(ECG)的变化,观察小鼠存活时间、心肌指数(MI)、心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、Ca2+及血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、MDA的变化.结果 POTF能提高小鼠耐急性缺氧的能力、对HT诱发小鼠Ⅱ导联ECG异常有明显改善,同时升高心肌组织中SOD的活性,降低MDA、Ca2+的含量及降低血清中CK、LDH的水平,心脏重量指数显示POTF对心功能也有明显的改善作用.结论 POTF能保护Pit诱发的小鼠急性心肌缺血损伤,其作用机制可能与降低心肌细胞内钙离子浓度、抑制脂质过氧化有关.     

葛根总黄酮对去卵巢大鼠骨密度及骨钙影响的实验研究

目的:观察葛根总黄酮防治骨质疏松的作用及机理。方法:选取雌性SD大鼠60只,随机分为6组,每组10只。除假手术组外其他5组建立去卵巢大鼠的骨质疏松模型,低剂量组予葛根总黄酮水溶液,50mg·kg-1;中剂量组予葛根总黄酮水溶液,100mg·kg-1;高剂量组予葛根总黄酮水溶液,200mg·kg-1;雌激素组予力维爱1.25mg·kg-1;假手术组及模型对照组予蒸馏水灌胃。3月后测定各组大鼠骨重量、骨密度及骨钙含量。结果:葛根总黄酮低、中、高剂量组及假手术组、雌激素组大鼠的右股骨重、左股骨骨密度及右股骨骨钙含量与模型对照组比较,差异均有显著性或非常显著性意义(P<0.05,P<0.01)。结论:葛根总黄酮可有效地防治雌性大鼠的骨质疏松,其机理可能与其具有雌激素效应有关。     

北京蜂胶的化学成分研究

从北京蜂胶中分离出七个化合物,分别为5,7-二羟基黄酮、3,5,7-三羟基黄酮、5,7-二羟基,2′-甲氧基黄酮、二十三(烷)酸甲酯、邻苯二甲酸双(2′-乙基己基)酯、邻苯二甲酸双异丁酯和葵二酸双(2′-乙基己基)酯。     

不同品种降香质量研究

以水蒸汽蒸馏法、气-质联用法及分光光度法分别对不同品种降香挥发油含量、油中主要成分含量及总黄酮含量作了比较研究。降香檀药材挥发油含量为3.61～3.79％,橙花叔醇占挥发油含量的45.23～69.13％,其药材总黄酮含量为2.51～5.82％。其余品种挥发油含量均<1.50％,总黄酮含量也与降香檀药材有显著差异。