术后疼痛大鼠切口组织Toll样受体4及其下游细胞因子表达的变化

目的 探讨术后疼痛大鼠切口组织Toll样受体4(TLR4)及其下游细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA表达的变化. 方法 健康成年雄性SD大鼠74只,体重200～250 g,建立大鼠术后疼痛模型.于术前1d、术后0.5,1,2,6,12h及1,2,3,5,7d测定术侧与非术侧机械缩足反射阈值(PMWT);于术前1d、术后2,8h、1,2,3,5,7d采用荧光定量PCR法检测皮肤切口组织TLR4、IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA的表达. 结果 与术前比较,大鼠术侧术后0.5 h～5 dPMWT降低,术后2h术侧切口组织TLR4mRNA表达下调,之后逐渐升高,IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA于术后2,8h、1,2,3,5d表达上调(P＜0.05),非术侧PMWT差异无统计学意义(P＞0.05);术侧PMWT术后6h最低,之后逐渐升高,术侧切口组织TLR4mRNA术后2d表达水平最高,IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA分别于术后2h、1d、3d表达水平最高(P＜0.05).TLR4、IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA表达水平与术侧PMWT呈负相关(r=-0.501,-0.743,-0.893,-0.657,P＜0.05),IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA与TLR4 mRNA表达水平呈正相关(r =0.764,0.283,0.667,P＜0.05). 结论 术后疼痛大鼠切口组织TLR4及其下游炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达上调,该变化可能参与了术后疼痛的产生和维持.     

鳖甲煎丸对慢性乙型肝炎早期肝硬化患者血清肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-6的影响

[目的]观察鳖甲煎丸对慢性乙型肝炎早期肝硬化患者血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）的影响及其作用机制。[方法]将76例慢性乙型肝炎早期肝硬化患者随机分为对照组和治疗组,对照组给予恩替卡韦片治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用鳖甲煎丸治疗,2组均治疗12周,治疗前后检测2组患者肝功能、肝纤维化指标和血清TNF-α、IL-6水平变化。[结果]治疗后,2组患者肝功能、肝纤维化指标和血清TNF-α、IL-6水平均明显降低,治疗组较对照组下降更明显（P〈O．01）。[结论]鳖甲煎丸治疗慢性乙型肝炎早期肝硬化的疗效确切,其作用机制可能与减少TNF-α和IL-6的释放、抑制炎症反应有关。     

哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征患者呼出气冷凝集液中TNF-α、IL-8、IL-10的检测水平及意义

目的检测哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征(ACOS)患者呼出气冷凝集液(EBC)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素8(IL-8)、IL-10水平,并分析其与该疾病的关系.方法选取2016年2月至2019年3月成都市第三人民医院收治的ACOS患者105例,单纯哮喘患者109例(哮喘组),单纯COPD患者104例(COPD组),另选取同期体检的正常人100例(健康对照组).酶联免疫吸附法检测EBC中TNF-α、IL-8、IL-10水平,自动血液仪检测外周血嗜酸粒细胞比例,利用肺功能仪检测所有受试者第1秒用力呼气容积(FEV1)、用力肺活量(FVC).结果ACOS组、哮喘组、COPD组患者血清IgE水平、外周血嗜酸粒细胞显著高于健康对照组(t=13.594、23.188、3.595;20.886、26.966、20.036,P值均<0.05).ACOS组EBC中TNF-α、IL-8水平显著高于COPD组、哮喘组、健康对照组(t=11.999、13.157、26.807;6.961、7.741、32.496,P值均<0.05),IL-10水平、FEV1%pred显著低于哮喘组、COPD组、健康对照组(t=7.566、9.568、40.129;t=11.539、14.339、28.837,P值均<0.05),FEV1/FVC值显著低于健康对照组(t=16.756,P<0.05);COPD组、哮喘组EBC中TNF-α水平、IL-8水平显著高于健康对照组(t=14.892、14.057;25.544、25.146,P值均<0.05),IL-10水平、FEV1%pred、FEV1/FVC值显著低于健康对照组(t=32.562、31.045;t=17.372、14.939;13.752、16.341,P值均<0.05);哮喘组和COPD组TNF-α、IL-8、IL-10水平、FEV1%pred、FEV1/FVC值比较差异无统计学意义(t=1.015、0.697、1.909、2.658、2.457,P值均>0.05).Pearson检验结果显示,ACOS患者EBC中TNF-α、IL-8水平与FEV1%pred、FEV1/FVC呈负相关(r=-0.463、-0.504;-0.447、-0.476,P值均<0.05);IL-10水平与FEV1%pred、FEV1/FVC呈正相关(r=0.429、0.474,P值均<0.05);Logistic回归分析结果显示,血清IgE水平升高、EBC中TNF-α、IL-8水平升高是ACOS的危险因素(P<0.05),EBC中IL-10水平升高是ACOS的保护因素(P<0.05).结论EBC中TNF-α、IL-8、IL-10水平可能具有潜在的鉴别ACOS生物标志价值.     

不稳定性心绞痛患者介入治疗围术期CD4 T淋巴细胞磷酸酶基因表达的变化

目的探讨不稳定性心绞痛患者PCI围术期CD4T淋巴细胞张力蛋白同源第10染色体丢失的磷酸酶基因(PTEN)表达的变化。方法连续入选拟行择期PCI的不稳定性心绞痛患者42例,分别于PCI术前、术后16²4h抽取新鲜外周血20ml,免疫磁珠法分选出CD4T淋巴细胞,荧光定量PCR检测PTEN mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测PTEN蛋白表达,酶联免疫吸附法检测TNF-α及白细胞介素10(IL-10)炎性相关因子的表达。结果与PCI术前比较,PCI术后患者肌钙蛋白I高于正常高值的发生率为45.4%;与PCI术前比较,PCI术后血浆TNF-α水平明显升高,PTEN mRNA、PTEN蛋白和IL-10明显下降,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。直线相关分析显示,PTEN蛋白与TNF-α呈负相关(r=-0.874,P<0.01),与IL-10呈正相关(r=0.732,P<0.05)。结论 PCI术可能通过下调PTEN的表达,促进相关炎性因子的分泌,从而诱发心肌炎症损伤。     

肿瘤坏死因子-α拮抗剂对类风湿关节炎和强直性脊柱炎患者血清白细胞介素-17和外周血 Th17细胞比例的影响

目的初步探讨外周血 Th17细胞亚群的比例以及 IL-17的表达水平在 RA 和 AS 患者接受 TNF-α拮抗剂治疗前后的改变及其意义。方法选择 RA 患者27例和 AS 患者22例,2种疾病中各有14例患者接受 TNF-α拮抗剂治疗40周。对照组24名来源于健康献血者。采用流式细胞术检测外周血 CD4+T 细胞中 Th17细胞亚群的比例,ELISA 检测外周血 IL-17表达水平。符合正态分布数据采用2个独立样本 t 检验,不符合正态分布则采用 Wilcoxon 秩和检验,患者治疗前后的比较采用配对 t 检验。结果治疗前,RA 和 AS 患者外周血 CD4+ T 细胞中 Th17细胞亚群的比例显著高于健康对照组[RA 1.03%（0.66%,1.78%）与健康对照0.50%（0.43%,0.67%）,Z=-3.236,P<0.01;AS（1.16±0.09）%与健康对照（0.59±0.06）%,t=5.226,P<0.01]。同样,IL-17的表达水平在2组疾病中也显著升高[RA（32.3±2.5） pg/ml,健康对照（14.3±2.5） pg/ml,t=5.070,P<0.01;AS 28.98（23.84,36.14） pg/ml,健康对照11.84（5.33,22.12） pg/ml,Z=-4.103,P<0.01]。 TNF-α拮抗剂治疗后,2组疾病 CD4+T 细胞中 Th17细胞亚群比例无明显变化[RA 驻（0.1045±0.2126）%;AS 驻（0.0025±0.1838）%],但 IL-17表达水平则明显下降[RA 驻（-13.5±5.0） pg/ml;AS 驻（-16.0±1.9） pg/ml]。结论 Th17细胞及其分泌的细胞因子 IL-17在 RA 和 AS 的发病机制中起重要作用,TNF-α拮抗剂对 AS 和 RA 患者 Th17细胞亚群炎症细胞因子的分泌功能有明显的抑制作用,但40周的治疗仍不能降低 Th17细胞比例,这可能是 TNF-α拮抗剂短期治疗后疾病复发的原因之一。     

妊娠期肝内胆汁淤积症患者胎盘组织白细胞介素10和肿瘤坏死因子α及细胞因子信号传导负调控因子3的表达

目的 探讨细胞因子信号传导负调控因子3 (SOCS3)、白细胞介素10 (IL-10)及肿瘤坏死因子α(TNFα)在妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)孕妇胎盘组织中的表达及其意义. 方法 选择2010年10月至2011年5月在新疆医科大学第一附属医院产科剖宫产分娩的ICP孕妇37例为病例组,选择同期健康孕妇35例为对照组.采用Envision免疫组织化学法测定IL-10、TNFα在孕妇胎盘组织中的定位与表达水平,Western blot测定胎盘组织中SOCS3的表达水平.组间比较采用t检验,等级资料采用秩和检验,变量间的相关性采用Spearman相关分析.结果 (1)IL-10、TNFα在两组孕妇胎盘组织中均有表达,在病例组中,IL-10的表达低于对照组(Z=-2.626,P＜0.01),而TNFα的表达则高于对照组(Z=-4.350,P＜0.01).(2)SOCS3在两组孕妇胎盘组织中均有表达,病例组的表达水平低于对照组(t=-2.214,P＜ 0.05).且其下降与IL-10呈正相关(r=0.494,P＜0.01),与TNFα呈负相关(r=-0.472,P＜0.01).结论 ICP患者母胎界面Th1型细胞因子TNFα表达增加,而Th2型细胞因子IL-10表达降低,存在Th1偏移.SOCS3可能通过影响细胞因子平衡而参与了ICP的发病.     

高血压并糖耐量减低患者肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-6的含量及意义

目的：观察原发性高血压（EH）合并糖耐量减低（IGT）患者血浆肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）水平的变化,探讨其与EH合并IGT的关系。方法：入选EH患者82例,分为EH合并IGT组（EH＋IGT组,42例）,EH糖耐量正常组（EH组,40例）,同时随机选择血压正常的健康人40例为健康对照组。检测各组TNF-α、IL-6、空腹血糖（FPG）、餐后2h血糖（2hPG）水平,计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。结果：与健康对照组、EH组比较,EH＋IGT组2hPG[（6.50±0.81）mmol/L、（6.59±0.79）mmol/L比（9.10±1.10）mmol/L]、HOMA-IR[（1.25±0.64）、（1.93±1.05）比（3.90±2.11）]明显升高（P均〈0.01）;与健康对照组比较,EH组、EH＋IGT组血浆TNF-α[（23.83±2.28）ng/ml比（27.80±4.73）ng/ml比（32.30±5.49）ng/ml]、IL-6[（76.76±12.81）ng/ml比（90.62±18.09）ng/ml比（112.97±24.88）ng/ml]水平明显升高（P〈0.05～0.01）,且EH＋IGT组明显高于EH组的（P均〈0.05）。多因素Logistic回归分析显示,EH合并IGT与TNF-α、IL-6、FPG、2hPG呈正相关（β为1.247,1.180,0.516,0.140;P〈0.05～0.01）。结论：原发性高血压合并糖耐量减低患者血浆肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平升高,提示其体内炎症反应增强。     

蛋白酶抑制剂对体外循环心脏手术围术期炎性因子的影响

目的:探讨肿瘤坏死因子-α、外周血单核细胞及SIRS评分,在体外循环心脏手术围术期的变化规律以及蛋白酶抑制剂的影响。方法:300例择期体外循环冠状动脉旁路移植术或瓣膜置换术患者,随机分为试验组与对照组各150例。试验组于麻醉诱导后、肝素化后以及鱼精蛋白中和后,分别给予乌司他丁各100万u,对照组则给予等量0.9%氯化钠液。2组分别于手术开始前(T1)、手术结束即刻(T2)、术后8 h(T3)、术后16 h(T4)、术后24 h(T5)、术后48 h(T6)和术后72 h(T7)使用ELISA方法检验血浆TNF-α浓度、检验白细胞计数和单核细胞百分比并评估患者SIRS评分。结果:TNF-α浓度自T2开始显著升高,达峰时间在试验组和对照组分别为术后16 h和术后24 h。术后72 h 2组的TNF-α浓度仍显著高于术前水平(P<0.01)。自T3开始,试验组TNF-α浓度显著低于对照组(P<0.01)SIRS评分自T2开始升高,至T3达到峰值后逐渐下降。至T7,SIRS评分仍显著高于术前水平(P<0.01)。自T3至T6,试验组SIRS评分始终显著低于对照组(P<0.01)。白细胞计数自T2即显著升高,至T3达到峰值,随后逐渐下降。自T2至T6试验组白细胞计数显著低于对照组(P<0.01)。单核细胞比例自T2即显著降低,至T7恢复术前水平。在T2和T3,试验组单核细胞百分比显著高于对照组(P<0.05)。结论:乌司他丁可显著降低体外循环心脏手术围术期肿瘤坏死因子-α浓度、SIRS评分和白细胞计数,增加单核细胞百分比。     

肝孤核受体激动剂对间充质干细胞的抗缺氧复氧损伤作用及机制

目的探讨肝孤核受体(LXR)激动剂对脂肪间充质干细胞(AD-MSCs)缺氧损伤的保护作用及可能机制。方法酶消化法分离稳定表达萤火虫荧光素酶(Fluc)报告基因的小鼠AD-MSCs,流式细胞术检测CD90、CD44、CD34、CD45细胞表面标记物。3代AD-MSCs分为7组:对照组;缺氧6 h/复氧2 h组(缺氧复氧组);缺氧/复氧+DMSO组(DMSO组);缺氧复氧+不同浓度LXR激动剂T0901317干预组(1μmol/L组、5μmol/L组、10μmol/L组、15μmol/L组)。运用Fluc报告基因生物发光成像技术对AD-MSCs细胞增殖进行定量评价,免疫印迹法检测细胞NF-κB表达水平,ELISA法检测AD-MSCs的白细胞介素6(IL-6)、TNF-α分泌水平。结果流式细胞术结果显示.AD-MSCs呈CD44(+)、CD90(+)、CD34(-)、CD45(-)。光学成像结果显示,AD-MSCs细胞数与Fluc平均生物发光信号强度呈正相关(r~2=0.97)。与对照组比较,缺氧复氧组AD-MSCs分泌TNF-α、IL-6、NF-κB明显升高;与缺氧复氧组比较,10μmol/L组AD-MSCs分泌TNF-α、IL-6、NF-κB明显减少(P<0.05,P<0.01)。结论 LXR激动剂可以促进缺氧复氧损伤后AD-MSCs的存活,并能通过NF-κB信号途径抑制炎性因子IL-6、TNF-α的释放,可为干细胞移植治疗心肌缺血再灌注损伤提供新的细胞保护方法。