促红细胞生成素对新生鼠缺氧缺血性脑损伤后学习记忆功能的影响

目的动态观察促红细胞生长素（erythropoietin,EPO）早期对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后（hypoxic ischemicbrain damage,HIBD）学习记忆功能的影响,从神经行为学方面探索不同剂量EPO早期对新生鼠HIBD的保护作用,为临床早期应用EPO治疗新生儿缺氧缺血性脑病选择合适的治疗剂量提供实验参考。方法新生7日龄Wistar大鼠40只随机分为HIBD生理盐水对照组、假手术组、EPO治疗Ⅰ组、EPO治疗Ⅱ组、EPO治疗Ⅲ组,每组8只,通过结扎并剪断7日龄新生大鼠右侧颈总动脉,吸入8%O2＋92%N2的低氧气源2小时制备新生鼠HIBD模型。EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别于缺氧缺血完成后即刻注射rhEPO5u/g、10u/g、15u/g,HIBD对照组即刻注射生理盐水0.5mL/只,连续14天,通过Morris水迷宫实验观察五组大鼠的学习记忆功能。结果①学习能力：五组大鼠逃逸伏期总体比较差异有统计学意义（〈0.05）,其中假手术组最短,EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组次之,HIBD对照组最长。②记忆能力：HIBD对照组穿环指数与假手术组、EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组间差异均有统计学意义（〈0.05）,而假手术组与EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组间比较,差异无统计学意义（〉0.05）,EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组间相互比较,差异亦无统计学意义（〉0.05）。结论①EPO早期治疗可改善新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后的学习和记忆功能;②通过对本试验的选择的三种EPO实验剂量对新生大鼠HIBD的影响结果表明,随着EPO剂量的增加并不能增强脑保护作用。     

局部血管内低剂量促红细胞生成素和联合 tPA 注射对大鼠脑缺血的影响

目的：探讨局部血管内低剂量促红细胞生成素（ erythropoietin,EPO）联合组织纤溶酶原激活剂（ tissue plasminogen activator,tPA）注射是否可以降低 tPA 单独应用时的不良反应及机制。方法成年雄性 Sprague-Dawley 大鼠进行大脑中动脉闭塞手术,将健康雄性 SD 大鼠按数字表法随机分为5组,每组10只,分别缺血2 h 和4 h,再灌注30 min 后通过大脑中动脉单独注射 tPA,或联合注射 EPO（800 IU/ kg）及 tPA。结果局部血管内低剂量 EPO 联合 tPA 注射可以减小大鼠脑缺血再灌注24 h 后的病死率、改善神经功能、减少脑水肿和脑出血,并且没有产生血液学不良反应。局部血管内低剂量 EPO 联合 tPA 注射组与0.9%（质量分数）氯化钠注射液联合 tPA 注射组比较,p-AKT 和 p-ERK 的表达水平明显升高。结论大鼠脑缺血后,局部血管内低剂量 EPO 和 tPA 联合使用,可减少 tPA 单独使用时的不良反应,并发挥 EPO 的神经保护作用,可能与 AKT 和 ERK 通路激活有关。     

eNOS在 EPO调节慢性缺氧心肌细胞线粒体生物合成中的作用机制研究

目的：探讨内皮型一氧化氮合酶（eNOS）在促红细胞生成素（EPO）调节慢性缺氧环境中心肌细胞线粒体生物合成中的作用及其机制。方法采用H9c2心肌细胞,将其于缺氧环境下培养7 d （94％ N2,5％ O2）,建立心肌细胞慢性缺氧模型。将心肌细胞根据不同处理分为缺氧对照组（HC）,20 U／mL重组人 EPO（rhEPO）处理缺氧组（HE）和20 U／mL rhEPO＋ eNOS shRNA干扰处理缺氧组（HR）。以荧光探针检测线粒体数量变化;RT‐PCR检测线粒体DNA相对表达量;Western blot 检测eNOS总蛋白表达及磷酸化水平（p‐eNOS）变化。结果 rhEPO显著增强eNOS磷酸化水平,增加线粒体数量及其DNA相对拷贝数（P＜0．05）;而同时采用shRNA干扰eNOS后,HR组eNOS总蛋白表达及磷酸化水平较HE组降低（P＜0．05）,同时线粒体数量及其DNA相对拷贝数较 HE组减少（P＜0．05）。结论 eNOS的磷酸化激活是EPO增强慢性缺氧心肌细胞线粒体生物合成的重要信号转导机制。     

rhEPO对大鼠颅脑损伤后的损伤脑组织NF-κB表达和血清TNF-α水平的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素（rhEPO）对大鼠颅脑损伤后损伤脑组织核因子-κB（NF-κB）表达和血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平的影响。方法将90只雄性成年Wistar大鼠分为假损伤组、颅脑损伤组及rhEPO组。采用改进Feeney法制作大鼠颅脑损伤模型,rhEPO组伤后即刻腹腔注射rhEPO（3000IU／kg）;伤后3h、12h、24h、48h、72h、5d和7d免疫组织化学染色法检测NF-κB的表达、双抗体夹心酶联免疫吸附法检测血清TNF-α水平。结果伤后3h,损伤脑组织NF-κB表达明显升高,伤后24h达最高峰,随后其表达水平逐渐下降,至伤后7d仍明显升高（P〈0．05）;rhEPO治疗后,每个时间点损伤脑组织NF-κB表达水平均明显降低（P〈0.05）。伤后3h,血清TNF-α水平也明显升高,伤后12h迅速达到最高峰,随后其水平逐渐下降;伤后3d,其水平又再次升高,随后又逐渐下降,至伤后7d仍明显升高（P〈0．05）。rhEPO治疗后,每个时间点血清TNF-α水平均明显降低（P〈0．05）。结论NF-κB和TNF-α可能在颅脑损伤后的炎症反应中发挥重要作用,而rhEPO可能通过抑制NF-κB和TNF-α的表达而减少损伤脑组织的炎症反应,发挥脑保护作用。     

氨甲酰化促红细胞生成素的制备及鉴定

目的：制备不具有促红细胞生成作用的氨甲酰化促红细胞生成素（CEPO）。方法：用氰酸钾使促红细胞生成素（EPO）氨甲酰化，对CEPO的蛋白酶（endoproteinase Lys-C）酶切产物进行电泳鉴定。分别给予成年KM小鼠腹腔注射EPO、CEPO和生理盐水，每周3次，于3、7和14d测定小鼠红细胞（RBC）、网织红细胞（Ret）数及Ret百分数，观察其动态变化。另外，给予不同种属的成年C57／B6小鼠腹腔注射增加1倍剂量的EPO、CEPO和生理盐水，隔日1次，30d后测定各组小鼠上述的血细胞指标，以证明CEPO不具有促红细胞生成作用。结果：经SDS-PAGE电泳鉴定，EPO已成功地氨甲酰化为CEPO，并且有较高的纯度。KM小鼠和C57／B6小鼠分别接受EPO注射后，RBC数、Ret数、Ret百分数均随给药次数的增多而显著增加，而接受CEPO和生理盐水组均未见有明显的改变。结论：经氨甲酰化反应后，EPO成功地转化为CEPO，并消除了促RBC生成的作用。     

Effect of endogen‐exogenous melatonin and erythropoietin on dinitrobenzene sulfonic acid–induced colitis

Inflammatory bowel disease has been linked to elevated T cells. Excessive production of reactive oxygen species and apoptosis are known to be accompanied by intestinal inflammation. This study was designed to investigate the effects of melatonin (MEL) and erythropoietin (EPO), which is a known anti‐inflammatory and antiapoptotic agent, in dinitrobenzene sulfonic acid (DNBS)–induced colitis in pinealectomized (Px) rats. In microscopically results, epithelial and goblet cell loss, absence of crypts, and increased colonic caspase‐3 activity were observed in the DNBS group. Also, in flow cytometric analysis, the percentage of CD4+ T cells was highest in the DNBS group. Treatment with MEL or EPO had a curative effect on DNBS‐induced colitis. The MEL + EPO groups showed significantly greater improvement when compared with the other treatment groups. Our results indicate that the combination of EPO and MEL may exert more beneficial effects than either agent used alone.     

重组人促红细胞生成素引起纯红细胞再生障碍性贫血的研究综述

随着重组人促红细胞生成素在临床的广泛应用，由其引起的不良反应一纯红细胞再生障碍性贫血也越来越受到人们重视。本文重点阐述重组人促红细胞生成素引起的纯红细胞再生障碍性贫血的发病情况，影响重组人促红细胞生成素免疫原性的可能原因及危险因子，以及诊断治疗措施.     

促红细胞生成素治疗慢性心衰合并贫血的临床观察

目的:观察在慢性充血性心力衰竭合并贫血时标准治疗基础上加用促红细胞生成素(EPO)的临床疗效。方法:入选的57例伴有贫血的慢性充血性心力衰竭患者随机分为治疗组(30例)和对照组(27例)。对照组给予心衰的标准治疗,治疗组给予标准治疗同时给予EPO和铁剂,观察并比较两组治疗6个月前后Hb、心功能分级、LVEF及BNP。结果:治疗组Hb、心功能分级和LVEF较治疗前有显著改善(P<0.05);两组治疗后血浆BNP水平均下降,两组治疗后血浆BNP比较有差异(P<0.05)。结论:EPO治疗慢性充血性心力衰竭合并贫血患者有效,能改善心功能指标。     

促红细胞生成素的临床应用

促红细胞生素(EPO)是一种由肾脏近曲小管合成的活性糖蛋白,能刺激骨髓红系造血母细胞的增殖和分化,对红细胞发育起主要调控作用。临床研究显示,EPO除可用于慢性肾性贫血治疗外,对多种疾病如早产儿、肿瘤、AIDS、充血性心力衰竭以及丙型肝炎病毒感染等疾病所致贫血亦有较好的疗效。近年来,重组人促红细胞生成素对人体免疫系统的影响开始受到重视。