EBV—DNA检测在儿童EB病毒感染中的临床意义

目的探讨荧光定量PCR检测EB病毒（EBV）对诊断和治疗EBV感染的临床意义。方法应用荧光定量聚合酶链反应病毒核酸扩增方法,对儿科2010—06～2012—06以发热为主诉的患儿205例,检测外周血EB病毒DNA栽量,结合常规外周血及异型淋巴细胞检查,对照首发临床表现,分析荧光定量PCR检测发热患儿感染EBV的临床价值。结果205例发热患儿中,外周血EBV—DNA阳性42例,阳性率20．5％。荧光定量PCR检测EB病毒能早期反映EBV感染。结论荧先定量PCR检测EBv—DNA有助于早期诊断EBV感染,能减少诊疗的盲目性,对临床有一定指导意义。     

荧光定量分析人皮肤瘢痕疙瘩组织中miRNA-34s的表达

背景：通过分析不同肿瘤组织与正常组织miRNA表达谱的差异,有可能筛选到特异性好、灵敏度高、可作为特定肿瘤分子标志物的miRNA。目的：采用实时荧光定量RT-PCR检测miRNA-34家族（miRNA-34s：miR-34a/b/c）在瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中的差异表达,分析评价microRNA-34s在瘢痕疙瘩形成发展的作用及可能的机制影响。方法：收集手术切除瘢痕疙瘩组织（10例）和正常皮肤（2例）;TRIZOL法提取标本的总RNAs并进行质检,再采用 Ambion′s miRNA Isolation Kit 从总 RNAs 中分离 microRNA,采用实时荧光定量 RT-PCR 技术检测miRNA-34s（miR-34a/b/c）在瘢痕疙瘩组织和正常皮肤组织中的表达水平。结果与结论：miRNA-34s（miRNA-34a/b/c）在瘢痕疙瘩组织中均呈下调表达（P＜0.01）。表明该家族成员参与了瘢痕疙瘩的形成发展,下调表达的miRNA-34s可能导致了瘢痕疙瘩的肿瘤性生长。     

重庆地区地中海贫血基因突变类型分析

目的了解重庆地区地中海贫血患者基因突变类型及分布,以指导优生优育。方法采用聚合酶链式反应(PCR)和膜杂交术,进行α-地中海贫血和β-地中海贫血基因检测。结果 2012年9月至2013年9月共检出349例地中海贫血患者,其中α-地中海贫血患者125例,α-地中海贫血患者的基因突变类型以缺失为主,缺失类型主要为东南亚型缺失--SEA/αα(占73.60%)和右侧缺失-3.7/αα(占19.20%)。检出β-地中海贫血患者211例,基因突变热点分别为CD17(A→T)(29.38%)、CD41-42(-TCTT)(28.91%)、IVS-Ⅱ-654(C→T)(27.49%)。α-地中海贫血兼β-地中海贫血13例。结论了解重庆地区地中海贫血基因突变类型及分布可以为该地区地中海贫血的遗传咨询和临床诊疗提供有价值的信息。     

Immunomodulatory treatment strategies in inflammatory cardiomyopathy: current status and future perspectives

Chronic autoimmunity and viral persistence constitute prognostic factors for adverse outcome in dilated cardiomyopathy patients. Inflammatory cardiomyopathy is a specific cardiomyopathy entity diagnosed in approximately 50% of dilated cardiopmyopathy patients by immunohistological quantification of immunocompetent infiltrates and cell adhesion molecule abundance. Patients with autoimmune inflammatory cardiomyopathy benefit from immunosuppressive treatment and immunoadsorption by improvement of left ventricular ejection fraction and heart failure symptoms, paralleled by a significant suppression of intramyocardial inflammation. However, dilated cardiomyopathy patients with viral persistence do not respond favorably to immunosuppression.     

胃癌中钙黏附分子启动子甲基化与幽门螺杆菌感染及肿瘤生物学特性的关系

目的建立甲基化特异性聚合酶链式反应方法检测组织中钙黏附分子（CDH1）的甲基化程度;探索CDH1启动子的甲基化与幽门螺杆菌（HP）感染及与肿瘤分化、浸润、淋巴及远处转移之间的关系。方法采用热转化甲基化特异性聚合酶链式反应法检测2008年1月-2009年12月共40例胃癌手术标本中CDH1的启动子甲基化情况,并回顾性地分析CDH1的启动子甲基化与HP感染、肿瘤分化、浸润、淋巴及远处转移等肿瘤生物学特性的统计学关联。结果胃癌组CDH1基因甲基化阳性率高于对照组（67．5％、12．5％,P〈0．05）。胃癌组中低一未分化肿瘤组CDH1基因甲基化阳性率高于高．中分化肿瘤组（80．6％、22．2％,P〈0．05）;胃癌组中HP阳性患者的CDH1基因甲基化率高于HP阴性患者（78．1％、25．0％,P〈0．05）;而胃癌组中CDH1基因甲基化阳性率与患者性别、肿瘤浸润程度、淋巴转移及远处转移无明显关系（P〉0．05）。结论CDH1基因甲基化可能参与了胃癌的发展过程,并且CDH1基因甲基化可能导致了肿瘤分化程度的降低。CDH1基因甲基化与胃癌患者的HP感染之间可能存在密切关系,提示HP感染可能参与了抑癌基因甲基化失活及肿瘤演变的发展过程。     

血液病患者鲍曼不动杆菌的耐药性分析及其耐药基因检测

目的了解血液病患者临床分离鲍曼不动杆菌的耐药表型和多种耐药基因的携带情况。方法收集2011年临床分离的非重复鲍曼不动杆菌120株,采用纸片扩散法进行药敏试验,试验结果按照CLSI 2011年版标准判读,采用WHONET 5.6软件进行数据分析;应用聚合酶链反应及测序方法检测10种耐药相关基因（blaOXA-51-like、blaOXA-23-like、blaOXA-24-like、blaOXA-58-like、blaTEM、blaampC、armA、ISAba1、intI 1和intI 2）。结果鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物的耐药率范围为48.3%~94.2%,对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为51.7%和48.3%;耐药相关基因blaOXA-51-like、blaOXA-23-like、blaTEM、blaampC、armA、ISAba1和intI 1的阳性率分别为100%、60.0%、46.7%、85.8%、75.8%、86.7%和85.0%,而未检出blaOXA-24-like、blaOXA-58-like和intI 2。结论碳青霉烯类抗菌药物对鲍曼不动杆菌仍具有较好的体外抗菌活性,鲍曼不动杆菌多重耐药相关基因的携带率较高,多重耐药现象非常严重,应加强其耐药性监测,合理使用抗菌药物。     

多重PCR快速检测3种致泻性大肠埃希菌方法的建立

目的利用多重聚合酶链反应(PCR)技术,建立一种可以同时快速检测肠致病性大肠埃希菌(EPEC)、肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)、肠出血性大肠埃希菌(EHEC)3种致泻性大肠埃希菌的多重PCR方法。方法根据EPEC的eae基因、EIEC的ipaH基因、EHEC的stx1基因筛选设计引物,建立多重PCR检测体系,并对PCR反应体系和条件进行优化。结果设计的3对PCR引物均能特异地扩增出相应的目的基因,该多重PCR体系能同时检测3种目的菌,特异度强。结论初步建立了一种能够同时快速检测3种致泻性大肠埃希菌的多重PCR检测方法,可用于食品安全及食物中毒事件的快速筛查。     

云南省几个民族葡萄糖—6—磷酸脱氢酶基因突变型分析

目的：分析云南籍汉族及少数民族葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）缺乏症患者的Ｇ６ＰＤ基因突变。方法：应用自然引物或“错配引物”介导的多聚酶链反应限制性酶切分析方法，分析２９例云南籍几个民族Ｇ６ＰＤ缺乏症患者Ｇ６ＰＤ基因突变型。结果：发现１３８８突变１９例，１３７６突变１例，未定型９例。２９例标本中有７例为少数民族，分别为彝族３例（１３８８突变）、白族２例（１３８８突变）、傣族１例（１３８８突变）、纳西族１例（１３８８突变）。除傣族外，在其余三个少数民族中检出Ｇ６ＰＤ基因１３８８突变在国内尚属首次。结论：这种突变的发生早于少数民族形成之前，并可推测云南省Ｇ６ＰＤ缺乏症患者中Ｇ６ＰＤ基因突变型分布比例，有助于了解分子进化进程。     

STUDY ON CELL ORIGIN OF MALIGNANT LYMPHOPROLIFERATIVE DISORDERS WITH POLYMERASE CHAIN REACTION

Genotype of IgH, TCRγ and TCR δ gene rearrangement in 42 cases of malignant lymphoproliferative disorders were studied by using polymerase chain reaction (PCR) technique. The results suggested that among the 23 cases, in which malignant cells expressed B-lineage cell surface markers, 20 showed IgH gene rearrangement and 11 had TCRγ gene rearrangement and / or TCRδ gene deletion. All the 11 cases expressed T-lineage cell differentiation antigens were found to have TCRγand TCRδ gene rearrangement or deletion and only one had IgH gene rearrangement. Double rearrangements of IgH and TCRγ genes were detected in all the 3 cases of T and B double-phenotype ALL. In the cases malignant cells did not express any lineage specific antigens while 4/5 had TCRγ gene rearrangement but all failed in IgH gene rearrangement. The relation of cellular differentiation origin and rearrangement of antigen receptor genes with clinical manifestations was discussed.     

应用序列特异引物PCR法对广西壮族HLA－DQA_1进行基因分型

应用序列特异引物多聚酶链反应（ＰＣＲ）方法对８２名无血缘关系的广西壮族健康人的ＨＬＡ－ＤＱＡ＿１进行基因分型。共检出７种ＤＱＡ＿１等位基因，以ＤＱＡ＿１＊０３０１的频率最高，达３１％，其次为ＤＱＡ＿１＊０１０４，０１０２和０５０１，检出率分别为２４．３％，１６．９％和１１．７％。未检出的等位基因有ＤＱＡ＿１＊０２０１，０３０２和０６０１。结果表明，壮族的ＨＬＡ－ＤＱＡ＿１等位基因频率分布除与中国南方人相似外，尚有其特点。序列特异引物ＰＣＲ方法不需要放射性同位素，简便快速、准确可靠的ＨＬＡ－ＤＱＡ＿１基因分型新方法。