脐血单个核细胞在半固体培养基中向神经元样细胞的分化

为观察脐血单个核细胞在甲基纤维素半固体培养基中的生长情况 ,常规方法分离脐血单个核细胞 ,接种于含 SCF、GM-CSF、G-CSF、IL-3、IL-6、EPO的甲基纤维素半固体培养基中培养。第 5 d发现有 6～ 10个细胞组成的小集簇 ,散在分布 ,细胞形态无变化。第 11d有神经元样细胞生长 ,与集簇并存。以后神经元样细胞逐渐生长 ,但集簇生长停滞 ,第 16d仍未发现集落形成。收集细胞 ,进行神经元特异烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF)免疫细胞化学测定 ,显示少量神经元样细胞 NSE、NF阳性。该结果提示在半固体培养基中 ,脐血单个核细胞可向神经元样细胞分化 ,传统的用于集落培养的半固体培养基可能也适合脐血中其它细胞成分的生长     

人乳头瘤病毒多肽与人免疫球蛋白G融合表达

目的 将人乳头瘤病毒16型(Human papillomavirus type 16，HPV-16)的晚期表达蛋白E7上的抗原24肽(从第38位氨基酸到第61位氨基6病毒感染防治酸)与人免疫球蛋白G的重链恒定区融合表达，并以此融合蛋白作为抗原，可能为HPV-1提供免疫治疗方法。方法 利用PCR方法分别扩增HPV-16 E7(38-61)24肽的DNA片段和人免疫球蛋白G的重链恒定区DNA片段，并构建到pEV21a表达载体上，转化入E．coli中表达，利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质免疫印迹(Western-blotting)的方法对表达结果进行鉴定。结果 构建的表达载体HPV16E7e／hIgGHCCR-pET21a经酶切鉴定和测序显示序列正确；通过SDS-PAGE和Western-blotting的鉴定，重组融合蛋白Mr约40000，表达量可占菌体蛋白的20％左右。结论 成功构建HPV16-E7的抗原多肽片段和人免疫球蛋白G的重链恒定区的融合蛋白，并可在E．coli中高效表达。     

ELFP方案治疗晚期鼻咽癌及上消化道癌疗效分析

目的探索ELFP方案治疗转移复发的晚期鼻咽癌、食管癌、胃癌的临床疗效和毒性.方法选择病理证实的64例晚期鼻咽癌、食管癌、胃癌采用Vp-16 0.1 g静滴,d1-3;CF 0.1 g静滴,d1-3 5-FU 0.5 g静滴,d1-3;DDP 50 mg静滴,d1-2;21 d为1周期.治疗2～6个周期.结果鼻咽癌,食管癌、胃癌有效率(CR PR)分别为75%、70%、43.8%,其中胃癌与鼻咽癌及食管癌分别比较有差异;单病灶与多病灶之间疗效无差异.全组病例总生存期为3～41月,中位生存期分别为11.5、10、7.5个月.主要毒性为骨髓抑制,其中Ⅲ、Ⅳ度白细胞下降占21.9%;Ⅲ、Ⅳ度血红蛋白下降占15.6%;Ⅲ、Ⅳ度血小板下降占3.1%.Ⅲ、Ⅳ度恶心、呕吐发生率为7.8%.结论ELFP对晚期鼻咽癌及食管癌有较好的疗效,其毒性可以耐受,是临床治疗鼻咽癌,食管癌切实可行的方案.     

后路肿瘤摘除固定融合一期手术治疗颈椎椎管内肿瘤

目的探讨经后路全椎板切除摘除椎管内肿瘤,同时行颈椎侧块或椎弓根内固定植骨融合治疗颈椎椎管内肿瘤的临床疗效. 方法采用该手术方法治疗颈椎椎管内肿瘤8例. 结果所有患者术后早期(3周以内)可下床活动,无一例出现眩晕、颈痛、头痛等颈椎不稳的表现.随访6个月～2年未见后凸畸形发生,颈椎活动不受限制,内固定物无松动断裂. 结论经后路全椎板切除同时行经颈椎侧块或椎弓根内固定植骨融合治疗颈椎管内肿瘤,能够维持手术后颈椎的稳定性,防止远期后凸畸形的发生.     

低浓度5-Fu24-小时持续化疗对BEL-7402肝癌细胞株的细胞周期的影响

目的研究低浓度5-Fu 24-小时持续化疗和高浓度5-Fu短时间化疗对BEL-7402肝癌细胞株的细胞周期的影响：方法用低浓度(1000．0μg/L)的5．Fu对BEL-7402肝癌细胞株进行持续24小时的培养(A组)，用高浓度(50000．0μg/L)的5-Fu对BEL-1 7402肝癌细胞株进行2小时培养(B组)，在培养后的不同时间点用流式细胞技术检测细胞周期的变化。结果A组结果显示：0h、4h、8h、12h、16h、20h和24h的S期细胞的百分数分别为25.23％、32．35％、39．28％、41．05％、46．02％、47．00％及47．14％。B组结果显示：0h、4h、8h、12h、16h、20h和24h的S期细胞的百分数分别为24．68％、68．43％、46．67％、43．67％、35．42％、33．22％及32．96％。结论5-Fu引起的S期细胞周期阻滞不但和浓度相关，也和作用时间相关。低浓度(1000．0μg/L)的5-Fu持续化疗较高浓度(50000．0μg/L)的5-Fu短时间(2小时)化疗更容易引起BEL-7402肝癌细胞株S期阻滞。     

过氧化氢对血管平滑肌细胞的作用

目的　研究过氧化氢 (H2 O2 )对兔血管平滑肌细胞的作用机制。方法　兔血管平滑肌细胞 (VSMCs)原代培养 ,微量细胞培养四甲基偶氮唑蓝法 (MTT)检测不同浓度H2 O2 在不同时段对其增殖影响 ,确定进一步研究的H2 O2 浓度 ,并应用流式细胞仪检测此浓度H2 O2 对VSMCs细胞周期和细胞凋亡的作用。结果　MTT法检测 ,H2 O2 浓度≥ 10 0 μmol/L(10 0～ 14 0 0 μmol/L)时 ,与VSMCs作用仅 1h ,即出现吸光度值显著降低 (P <0 .0 1) ;流式细胞仪细胞周期检测 ,H2 O2 浓度≥ 10 0 μmol/L时 ,与VSMCs作用 2 4h后 ,其G1期细胞数显著高于对照组 (94.65 %和 79.97% ) (P <0 .0 1) ,以H2 O2浓度在 10 0 μmol/L时尤为明显 ;流式细胞仪AnnexinV PI双标细胞凋亡检测 ,10 0 μmol/LH2 O2 有促进VSMCs凋亡作用 ,并在作用 48h左右达到高峰 ,占 2 6.76% ,与对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　H2 O2 浓度≥ 10 0 μmol/L时 ,可显著抑制VSMCs增殖 ;当H2 O2 浓度为 10 0 μmol/L时 ,有促进VSMCs凋亡作用。     

三氧化二砷对人脐静脉内皮细胞中蛋白激酶C活性和白细胞介素-15分泌、表达的影响及其临床意义

目的 通过研究三氧化二砷(As2O3)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中蛋白激酶C(PKC)活性和白细胞介素(IL)-15表达和分泌的影响,探讨内皮细胞在As2O3抑制白血病或肿瘤中的作用。方法用不同浓度的As2O3作用于培养的HUVEC细胞,测定其生长情况、胞膜和胞浆PKC活性以及对IL-15基因表达和分泌的影响。结果0.25 μmol／L~50 μmol／L的.As2O3均抑制HUVEC细胞的增殖(P<0.01),随着药物浓度或作用时间的增加,细胞逐渐死亡。在As2O3作用细胞4 h测定胞浆和胞膜的PKC活性,两者在不同浓度作用下活性水平均得到提升(P<0.01),但胞膜的活性上升幅度更大。在As2O3的测定浓度范围内,PKC的活性水平与As2O3的浓度呈正相关。1、5、16 μmol／L的As2O3导致IL-15基因表达和分泌水平的增加(P<0.01),并呈浓度依赖性关系。结论As2O3可能是通过激活内皮细胞的PKC活性,促进IL-15或其他细胞因子的分泌,来抑制白血病或肿瘤发展的。     

食管内翻拔脱术治疗食管癌贲门癌19例分析

目的　探讨食管内翻拔脱术在食管癌、贲门癌外科治疗中的地位。方法　 19例食管癌、贲门癌病人接受了食管内翻拔脱术 ,其中食管鳞癌 15例 ,颈段 3例 ,胸中段 6例 ,胸下段 6例 ;贲门腺癌 4例。 0期 1例 ;Ⅰ期 4例 ;Ⅱa期 4例 ;Ⅱb期 1例 ;Ⅲ期 9例。 3例因有上消化道手术史行结肠代食管。结果　 19例均获切除 ,食管切缘阴性 ,无手术死亡。术后声音嘶哑 1例 ,心律失常1例 ,双侧胸腔积液 1例 ,左侧气胸伴左膈下脓肿 1例 ,5例出现小的颈部吻合口瘘。结论　食管内翻拔脱术扩大了食管癌、贲门癌的手术适应证 ,使某些常规手术高危患者重新获得手术机会。     

脊髓型颈椎病的非手术治疗

目的阐述早期、中期脊髓型颈椎病(CSM)可首选非手术治疗。方法研究1990年2001年共收治的CSM病人426例，执行严格的诊断、纳入标准，采用颈牵、推拿、药物等综合治疗。结果426例CSM患者的近期疗效的优良率为67．11％，好转率为97．67％，并对其中的169例进行1年至7年11个月的随访，平均随访2年8个月，优良率78．70％，好转率98．22％，在随访患者中有30例治疗前后颈椎MRI对比，显示15例患者颈椎间盘达到部分还纳，其余15例无明显变化，426例CSM患者中未出现1例并发症。结论非手术治疗早、中期CSM安全，有效，患者痛苦小。     

病毒白细胞介素-10转基因在造血干细胞中的表达

目的　观察逆转录病毒转病毒白细胞介素 10 (vIL 10 )基因在体内的表达。方法　用MSCVneo vIL 10重组体在体外转导CBA (H 2 K)小鼠的造血干细胞 (HSCs) ,给经致死照射(90 0rads)的 2 0只同基因CBA(H 2 K)小鼠注入经MSCVneo vIL 10转染的HSCs ,2× 10 6HSCs/只。酶联免疫吸附测定 (ELISA)、逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR )、Westernblot分析vIL 10的表达。结果　移植MSCVneo vIL 10转染HSCs的 2 0只小鼠 ,移植后 8周用ELISA检测 ,其中 15只小鼠血清的vIL 10浓度为 :2 70～ 13 40ng/L ,5只小鼠血清的vIL 10为阴性。 12周后有 2只小鼠vIL 10测不出 ,13只小鼠长时间表达vIL 10达 6个月。对照组小鼠血清vIL 10均为阴性。RT PCR和Westernblot证实小鼠的器官均有vIL 10的mRNA和蛋白的表达。结论　逆转录病毒能有效地将vIL 10基因导入造血干细胞并在体内长时间表达。