桃红四物汤有效成分的交互作用及其对血清VEGF浓度的影响

目的：探讨桃红四物汤主次要有效成分的交互作用及其对血清VEGF浓度的影响。方法：从桃红四物汤中提取4类有效成分：总生物碱（A）、总苷（B）、总多糖（C）和总挥发油（D）,按照前期实验所得结果（主要成分为A,次要为B、C、D）,对清洁级小白鼠徒手定点折骨造模后进行实验。按照L8（27）正交设计方案分组,观察分析其对血清VEGF浓度的影响,探讨主次要成分之间是否存在交互作用。结果：骨折造模后断端局部出现VEGF蛋白高表达,提取物组表达量显著高于模型组（P〈0.05）;动态观察结果,第2时相点（15 d）以内表达量逐渐升高,在第15天出现表达峰值,此后表达量开始下降;各组间比较,1~8组、10组3个时相点表达量均明显高于9组;在表达峰值（15 d）后VEGF表达量下降过程中,提取物及浓缩剂药物使表达量下降程度减缓,使其在第3时相点（25 d）断端骨痂组织内仍维持高量VEGF蛋白表达。正交实验表明,B药取水平1与水平2差异有统计学意义（P〈0.05）,C药和D药取水平1与水平2差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：有效成分总生物碱与总苷有交互作用,与总多糖和总挥发油无交互作用;总苷、总多糖与总挥发油之间也无交互作用。     

冬凌草愈伤组织诱导及细胞培养的研究

用组织培养、细胞悬浮培养和单细胞平板培养技术,诱导出冬 凌草愈伤组织,并探讨 了细胞悬浮培养时间、培养方法和接种密度对冬凌草单细胞平板培养植板率的影响。结果表 明：从冬凌草叶和嫩茎诱导愈伤组织,以 MS 2,4D 1 mg/L NAA 0.5 mg/L 培养基较好 ,愈 伤组织诱导率高达 96.80%。用普通单细胞平板培养法培养冬凌草单细胞的植板率很低,而 以悬浮培养 15～18 d 的单细胞为材料,接种密度为 5×103个/毫升时,进行条件培养 和 看护培养,植板率达 21.63%。本研究结果可供利用细胞培养技术筛选冬凌草高产冬 凌草素细胞株时参考。     

虎杖疏松愈伤组织诱导条件的研究

目的研究虎杖疏松愈伤组织诱导的最佳激素条件。方法通过单因素和正交实验研究不同外植体、不同浓度的激素组合对虎杖愈伤组织诱导率、疏松程度以及增殖率的影响。结果以诱导率为指标，NAA对虎杖细胞脱分化影响最显著。以增殖率为指标，2，4-D对虎杖的细胞生长分裂影响最显著。结论以叶柄为外植体更容易诱导出疏松的愈伤组织，虎杖愈伤组织诱导和继代增殖最佳的激素组合分别为6-BA1．5mg／L＋2，4-D1．0mg／L＋KT0．2mg／L＋NAA0．5mg／L和6-BA2．0mg／L＋2，4-D2．0mg／L＋KT0．4mg／L＋NAA0．4mg／L。     

提取金荞麦愈伤组织总RNA的一种有效方法

目的:建立金荞麦愈伤组织总RNA提取方法.方法:采用CTAB法结合LiCl沉淀的改良方法提取RNA,紫外分光光度检测、0.8%非变性琼脂糖凝胶电泳检测,RNA的反转录等评价RNA质量.结果:提取的总RNA 28S和18S条带清晰,且A260/A280在1.9～2.0,以提取的RNA为模板反转录的cDNA长度范围较广(500bp～5 kb).结论:该方法提取出的总RNA质量能满足RT-PCR等分子生物学操作的要求,且简单、有效、经济,可用于金荞麦愈伤组织总RNA的提取.     

紫背金盘愈伤组织诱导与再生体系的建立

目的 建立紫背金盘Ajugae nipponensis愈伤组织诱导体系,筛选出具较高再生率的植株发生途径,旨在构建高效、稳定的再生体系。方法 MS为基本培养基,添加不同种类和浓度配比的植物生长调节剂,以茎尖、带芽茎段和花序为外植体进行实验。结果 花序是较适宜诱导愈伤组织的外植体,在MS+6-BA 0.1 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L中可在1周内诱导出愈伤组织,2周后即分化出绿色小芽丛;丛生芽增殖的适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,愈伤组织芽丛再生率高达100%,再生系数为4.10,4周后增殖倍数5.0以上;生根的适宜培养基为1/2 MS+NAA 1.0 mg/L,3周后即可获得再生植株,生根率100%;生根苗移栽至排水良好的沙土中,成活率100%。结论 紫背金盘不同外植体均可诱导出愈伤组织,其中花序愈伤发生率最好,是最适宜的外植体;为保护紫背金盘野生资源和发展人工栽培奠定了良好基础,也为遗传转化研究提供重要的科学依据。     

液体振荡培养八角莲愈伤组织及其鬼臼毒素的含量测定

目的研究培养八角莲的愈伤组织。方法与结果在MS＋NAA 0.2 mg/L＋6-BA3.0 mg/L的液体培养基中,愈伤组织20 d平均增加重量达53.4 g。添加0.2g/L苯丙氨酸的培养基中,鬼臼毒素的含量可达0.5%。     

蛇床愈伤组织形态发生过程中过氧化物酶的变化规律研究

目的:研究蛇床愈伤组织形态发生过程中过氧化物酶活性的变化与过氧化物酶同工酶的差异。方法:采用分光光度法测定过氧化物酶活性,采用聚丙烯酰胺凝胶平板电泳分析过氧化物同工酶。结果:已分化愈伤组织的酶活性高于未分化愈伤组织,未分化愈伤组织、产生胚状体的愈伤组织及分化芽和根的愈伤组织的酶活性成线性递增关系。不同分化类型愈伤组织的过氧化物酶同工酶谱有明显的差异。三类愈伤组织都有酶带1和2,分化的愈伤组织都有3和5,分化芽和根的愈伤组织还有酶带4,分化芽和根的愈伤组织的酶带3比形成胚状体的愈伤组织的酶带3要宽,着色也深。结论:过氧化物酶活性与愈伤组织分化程度呈正相关;酶带1和2显示的两种同工酶与愈伤组织的增殖有关,酶带3和5是与分化有关的特异性蛋白质。酶带4可能催化器官发生特有反应,且对过氧化物酶的活性影响较大。     

超声联合X线对Ilizarov骨搬移术后搬移区的监测价值研究

【摘要】目的：为行Ilizarov骨搬移术的患者术后找到一种长期且有效的影像学监测手段,提高骨延长成功率。方法：对19例接受Ilizarov骨搬移术的患者分别在第1周、第3-4周、第6-8周、第14-16周及第24周行高频超声检查、X线检查和临床评估,在超声声像图及X线平片上观察新生骨痂形态、密度,对新生骨痂量做半定量分析、测量搬移距离并做对比。结果：超声与X线对新生骨痂的半定量评分随时间变化趋势不同,认为在第1周、第3-4周、第6-8周、第24周超声与X线显示骨痂填充量的差异具有统计学意义（P＜0.05）,在第14-16周超声与X线显示骨痂填充量的差异不具有统计学意义（P＞ 0.05）。在第1周、第3-4周、第6-8周、第14-16周,超声与X线对搬移区距离的测量值差异不明显,第24周,二者对搬移区长度的测量值产生明显差异。结论：与X线相比,高频超声在未矿化的更早期可以观测到新生骨痂,但在矿化后期提示作用有限,可以把超声联合X线作为Ilizarov骨搬移术后一种长期的常规监测手段。