Temporal delimitation of the healing phases via monitoring of fracture callus stiffness in rats

The healing process consists of at least three phases: inflammatory, repair, and remodeling phase. Because callus stiffness correlates with the healing phases, it is suitable for evaluating the fracture healing process. Our aim was to develop a method which allows determination of callus stiffness in vivo, the healing time and the duration of the repair phase. The right femurs of 16 Wistar rats were osteotomized and stabilized with either more rigid or more flexible external fixation. Fixator deformation was measured using strain gauges during gait analysis. The strains were recalculated as the callus stiffness over the time course of healing, and the healing phases were identified based on stiffness thresholds. Our hypothesis was that stabilization with more flexible external fixation prolongs the repair phase, therefore resulting in an extended healing time. Confirming our hypothesis, the duration of the repair phase (rigid: approximately 15 days, flexible: approximately 41 days) and the healing time (rigid: approximately 27 days, flexible: approximately 62 days) were significantly longer for more flexible external fixation. Our method allows the quantitative detection of differences in the healing time and duration of the repair phase without multiple time‐point sacrifices, which reduces the number of animals in experimental studies. © 2014 Orthopaedic Research Society. Published by Wiley Periodicals, Inc. J Orthop Res 32:1589–1595, 2014.     

富血小板血浆促进胫骨骨折模型兔的骨愈合

文题释义：富血小板血浆：通过高速离心的方法从全血中提取出来的血小板浓缩液,含有高浓度血小板和自身生长因子的血浆。 骨折愈合：是骨折断端之间组织修复的连续过程,成骨细胞与破骨细胞,联合多种细胞和生长因子参与的一系列复杂的生化反应,各种生物活性因子之间可以通过磷酸化等变化联系在一起。 骨折塑形期：为了符合人体生理结构要求,具有更牢固的结构和良好的功能,骨性骨痂通过成骨细胞、破骨细胞的协调作用下成为成熟的板层骨,使骨折两断端再次完全连接起来,髓腔再通,骨折恢复到与原骨组织一样的结构,达到完全愈合。   背景：骨折具有自我愈合周期长、延迟愈合等问题。生物组织具有自我修复的潜能,那么有没有办法将组织自身修复能力调动起来,为生物体自身修复所用呢？富血小板血浆技术正是解决这一难题的有效方式之一。 目的：探讨自体富血小板血浆对兔胫骨骨折愈合的促进作用。 方法：选取新西兰大白兔12只,随机分为富血小板血浆组及对照组,每组6只。所有动物均在右侧胫骨远端2 cm处用摆锯造成横行骨折,克氏针髓内固定。富血小板血浆组将制备的富血小板血浆凝胶注射至骨折断处,对照组相同方法将等量无菌生理盐水注射至骨折断端。术前及术后2,4,8周留取血液标本,测定骨钙素、骨碱性磷酸酶水平;术后2,4,8周分别处死2只,观察骨折标本的骨折修复情况,计算骨痂体积。结果与结论：①术后各时点,富血小板血浆组骨痂直径均大于对照组(P < 0.05);②术后第4周,富血小板血浆组骨痂体积明显大于对照组(P < 0.05);术后第8周时,富血小板血浆组骨痂体积大于对照组,但差异无显著性意义(P > 0.05);③术后第4周富血小板血浆组骨小梁平均宽度、骨小梁面积比及血管数目均优于对照组(P < 0.05);术后第8周2组数据差异无显著性意义(P > 0.05);④2组血清中骨钙素水平在术后第4周时达到最高,可维持高浓度一段时间,富血小板血浆组最高值大于对照组(P < 0.05);⑤富血小板血浆组中血清碱性磷酸酶水平始终高于对照组,说明富血小板血浆在骨折愈合过程中对碱性磷酸酶的影响始终存在;⑥提示富血小板血浆技术对骨折愈合有一定的促进作用,可为骨科临床骨折不愈合或延迟愈合的治疗提供新思路、新方法。 ORCID: 0000-0002-8527-6895(任军) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

微动对骨折端骨痂生物力学的影响

【目的】研究骨折端微动时应力对骨痂的弯曲刚度、扭转刚度和扭转强度的影响。【方法】60只新西兰大白兔随机分为微动组与固定组,利用万能材料实验机检测两组动物骨折端骨痂弯曲刚度、扭转刚度和扭转刚度的变化。【结果】①术后14d、21d、56d时固定组、微动组弯曲刚度差异无显著性;28d、42d时两组差异有显著性（P〈0．05）。②术后14d、21d时固定组、微动组扭转刚度差异无显著性;28d、42d、56d时差异有显著性（P〈0．05）。③术后28d、42d、56d时固定组、微动组扭转强度差异有显著性（P〈0．05）。     

黄芩愈伤组织中多酚氧化酶活性与黄芩苷合成的关系研究

目的 研究黄芩愈伤组织中多酚氧化酶活性变化规律及其与黄芩苷次生合成之间的关系.方法 采用紫外分光光度法测定多酚氧化酶活性,采用高效液相色谱法测定黄芩苷的量.研究不同添加物(抗坏血酸、氯化钠、苯甲酸、聚乙烯吡咯烷酮、硫酸铜)对多酚氧化酶和黄芩苷量的影响.结果 在黄芩愈伤组织生长周期的前20 d,黄芩苷基本没有合成,多酚氧化酶的活性低水平表达;20～35 d,黄芩苷大量合成,多酚氧化酶的活性有所降低,但降低趋势较小;35～50 d,多酚氧化酶活性高水平表达,黄芩苷次生合成受到抑制.结论 多酚氧化酶的高水平表达不利于黄芩苷的次生合成,抗坏血酸、氯化钠、苯甲酸等均可抑制多酚氧化酶的活性,促进黄芩苷次生合成,其中以添加0.02%的抗坏血酸效果最为明显,可使黄芩苷的量提高17.6%(82.3 mg/g),而聚乙烯吡咯烷酮、硫酸铜对多酚氧化酶的活性有着明显的促进作用,抑制了黄芩苷的积累.     

皖贝母试管鳞茎诱导技术的研究

目的：研究离体条件下皖贝母试管鳞茎诱导的最佳培养条件。方法：以单块愈伤组织分化形成的鳞茎个数和鲜重为指标，考察蔗糖浓度、水杨酸、活性炭和5 ℃低温预培养对皖贝母试管鳞茎的形成和生长的影响。结果：50 g·L-1的蔗糖处理形成的鳞茎个数和鲜重都极显著高于其他处理，水杨酸对试管鳞茎的形成具有抑制作用，以 5 g·L-1的活性炭处理形成鳞茎个数和鲜重优于其他处理，5 ℃低温预培养30～40 d对试管鳞茎的形成和膨大效果最好。结论：低温预培养30～40 d的皖贝母愈伤组织，接种于MS+KT 2 mg·L-1+NAA 2 mg·L-1+50 g·L-1蔗糖+5 g·L-1活性炭的培养基中，鳞茎形成和生长发育效果最佳。     

檀香体胚发生及影响因素的研究

目的　探讨檀香胚性细胞发生体胚的技术。方法　以檀香实生苗的下胚轴为材料 ,MT为基本培养基 ,附加不同种类的植物激素。结果　基本培养基以 MT或 MS为好 ;IAA与 BA结合有利于胚性愈伤组织的形成 ,诱导率可达 36 .7% ;体胚发生 ,以 MT+IAA(NAA) 0 .2 mg/ L+BA1mg/ L 培养基较好 ,能诱导体胚发育 ,长出正常茎叶 ;BA浓度为 0 .5～ 1.0 mg/ L 时 ,既有利于体胚发生 ,又能保证一定的增殖速度。结论　成功地诱导出檀香胚性愈伤组织 ,通过体细胞胚胎发生长出正常茎叶 ,为利用生物技术的手段进行檀香人工种子的研究奠定基础     

凹叶厚朴愈伤组织中厚朴酚及和厚朴酚的提取方法和工艺的优选研究

目的研究凹叶厚朴愈伤组织中厚朴酚及和厚朴酚提取方法和工艺的优选。方法采用超声波法、浸渍法及浸渍-超声波法提取厚朴酚及和厚朴酚,采用高效液相色谱法测定凹叶厚朴愈伤组织中酚的含量;采用正交试验设计,以超声波法为提取工艺,进一步考察溶剂、温度、提取时间对含量检出值的影响。结果厚朴酚与和厚朴酚的含量浸渍法为0.135%与0.017%,超声波法为0.144%与0.018%,浸渍-超声波法为0.146%与0.018%;最佳工艺为A3B2C3,即用丙酮30℃超声提取60 min。结论本试验的结果可以为凹叶厚朴的生物技术利用提供科学的实验及理论依据。     

青羊参遗传转化中组织培养系统的研究

目的建立用于遗传转化的青羊参组织培养系统。方法以不同外植体部位、不同消毒剂、不同消毒时间建立无菌苗;以不同外植体部位、不同激素种类及配比、不同质量浓度的2,4-D与KT诱导青羊参愈伤组织形成、继代、分化;测定青羊参对标记基因分解物庆大霉素(Gent.)的敏感性。结果以青羊参的种子及茎段做外植体,以10%次氯酸钠消毒种子20～30min,或以0.2%HgCl2消毒茎段3min建立无菌苗具有最好效果;青羊参的种子、根、茎、叶易于形成愈伤组织;2,4-D对青羊参愈伤组织的形成是必要的;青羊参对KT较为敏感,不论用KT诱导青羊参愈伤组织的形成,还是诱导胚芽或腋芽形成,均有较好效果;以MS为基本培养基,以2,4-D1.0mg/L KT1.0mg/L为激素配比诱导青羊参愈伤组织的形成具有较好效果;以MS 2,4-D0.5mg/L KT0.5mg/L继代愈伤组织具有较好效果;以MS KT0.5mg/L NAA0.1mg/L诱导种子的胚芽或茎段的腋芽萌发具有较好效果;青羊参的愈伤组织不论来源于种子,还是来源于根、茎、叶,不论使用激素6-BA,还是使用KT、ZT、2ip均未观察到愈伤组织分化形成不定芽;100μg/mL的庆大霉素是青羊参转基因植株筛选的最佳压力。结论通过基因枪介导转基因时,选择种子或茎段在MS 2,4-D1.0mg/L KT1.0mg/L培养基上萌动14d,形成愈伤但未形成芽的材料作为基因枪轰击材料较好。