RFDD-PCR技术用于构建证的相关基因表达谱初探

目的　运用限制性酶切片段差异显示 (RFDD -PCR)技术初步筛选支气管哮喘肾虚证的相关基因 ,以冀探讨构建中医证的相关基因表达谱的一种研究方法。方法　应用RFDD -PCR技术 ,收集支气管哮喘肾虚证患者治疗前后外周血 ,分离其总RNA ,进行DNaseI处理、合成双链cDNA、TaqI限切酶酶切、在其两端连上接头、特异配对于接头的引物来降落PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、AgNO3 染色、回收差异条带并重新PCR扩增、反向斑点杂交、测序、生物信息学分析。结果　共找到 36条差异条带 ,其中 2 5条能用斑点杂交验证 ,选取 3条测序 ,结果与基因库比较未发现同源序列。结论　 3条基因片段可能是与支气管哮喘肾虚证相关的新基因 ;RFDD -PCR技术不失为构建中医证的相关基因表达谱的一种好方法。     

肺癌术后支气管切缘癌发生的相关因素分析

目的　探讨肺癌术后支气管切缘癌发生的相关因素。方法　对 2 43例原发性非小细胞肺癌患者的病例资料进行回顾性分析 ,采用Logistic回归分析判断术后支气管切缘癌发生的相关因素。 结果　 2 43例肺癌患者中 ,支气管切缘癌发生 3 1例 ,发生率为 12 .8% ,多因素分析显示 ,中央型肺癌、肺叶支气管淋巴结转移及组织学类型为鳞癌是支气管切缘癌发生的危险因素。结论　中央型肺癌、肺叶支气管淋巴结转移及组织学类型为鳞癌的肺癌病例应考虑发生术后支气管切缘癌的可能     

氯化镉诱发16HBE细胞系恶性转化过程中TIF3 p36的变化

目的 探讨氯化镉诱发人支气管上皮细胞（16HBE）恶性转化过程中不同阶段蛋白翻译起始因子（TIF3）p36 mRNA表达水平的变化,为进一步阐明氯化镉的分子致癌机制提供线索.方法 应用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术,以及敏感先进的Taqman荧光定量PCR方法,检测并分析氯化镉诱发16HBE恶性转化不同阶段即转化期间细胞、转化细胞和成瘤细胞的TIF3 p36 mRNA表达量的变化.结果 相对于非转化对照细胞（16HBE）,氯化镉诱发恶性转化不同阶段细胞（转化期间细胞、转化细胞和成瘤细胞）的TIF3 p36 mRNA基因表达水平均明显升高（P＜0.01或P＜0.05）,其中低剂量组（5 μmol/L）所转化的各阶段细胞的eIF3 p36 mRNA平均表达量分别是对照细胞的3.1、5.9和9.9倍,中剂量组（10 μmol/L）的各阶段转化细胞的TIF3平均表达量分别是对照细胞的7.1、6.8和14.8倍,高剂量组（15 μmol/L）的各阶段转化细胞的TIF3 p36平均表达量分别是对照细胞的3.6、3.0和9.1倍.这些不同剂量组的研究结果提示,eIF3 p36的异常表达量与氯化镉诱发16HBE细胞恶变程度之间有正相关关系,但与镉的剂量无关.结论 氯化镉在诱发16HBE细胞恶变过程中,存在明显的蛋白翻译启动因子eIF3 p36异常表达现象,其表达水平与细胞的恶变程度密切相关,这可能是氯化镉诱发人细胞肿瘤的重要分子致癌机制之一.     

高渗盐水支气管激发试验

气道高反应性是哮喘的重要病理生理学特征，药物直接激发试验测定气道高反应性已被广泛应用，多年来在哮喘的诊断中发挥了重要作用。然而药物直接激发测定气道高反应性存在种种不尽人意的地方，近年来国内外有较多文献报道了高渗盐激发试验。为探讨高渗盐激发试验的应用价值，笔者对此作一综述。     

白三烯受体拮抗剂对哮喘小鼠气道重塑及细胞周期蛋白D1的表达影响

目的：研究应用白三烯受体拈抗剂（孟鲁司特钠）对哮喘小鼠肺组织中细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）的表达影响及对支气管哮喘气道重塑的作用，探讨白三烯受体拮抗剂在哮喘治疗中的作用。方法：将30只BALB／c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组、孟鲁司特钠组3组，每组10只；卵蛋白致敏和激发建立哮喘小鼠模型；HE染色观察各组气道炎症发生及气道结构改变情况；免疫组化观察肺组织中Cyclin D1的表达及定位；RT-PCR及Western-blot测定各组小鼠肺组织中Cyclin D1的mRNA和蛋白表达变化。结果：HE染色提示哮喘组与对照组相比出现嗜酸性粒细胞浸润增多、纤毛脱失、平滑肌细胞层增厚等改变．而治疗组上述改变较哮喘组为轻；免疫组化显示Cyclin D1在哮喘小鼠气道平滑肌细胞、内皮细胞、成纤维细胞中皆有表达而在对照组中表达减弱（P〈0．05），而治疗组表达量较哮喘组低（P〈0．05）；RT-PCR及Western blot检测发现Cyclin D1在哮喘组表达较对照组为高（P〈0．01），而治疗组表达量低于哮喘组（P〈0．01）。结论：哮喘小鼠肺组织中Cyclin D1表达量较正常组为高；白三烯受体拮抗剂能够抑制Cyclin D1表达，减轻气道炎症反应、延缓气道重塑进程。     

支气管动脉化疗加超分割放疗治疗局部晚期非小细胞肺癌的临床观察

目的:探讨支气管动脉灌注(BAI)化疗联合超分割放疗治疗局部晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及不良反应。方法:67例局部晚期NSCLC患者,信封法随机分两组。观察组32例,予泰素、顺铂BAI化疗3～4个疗程后行超分割放疗,总剂量72Gy;对照组35例,静脉滴入泰素、顺铂化疗3～4个疗程后行常规放疗,总剂量60Gy。结果:观察组的有效率、1年生存率分别为65.6%(21/32)和68.8%(22/32),对照组分别为51.4%(18/35)和54.3%(19/35),差异无统计学意义,P>0.05。两组中位生存期分别为14和12.5个月。观察组2年生存率、KPS评分增高率、放射性肺损伤发生率分别为31.2%(10/32)71.9%(23/32)和9.4%(3/32),对照组分别为11.4%(4/35)、40.0%(14/35)和28.6%(10/35),差异均有统计学意义,P<0.05。结论:两组有效率相当,支气管动脉化疗加超分割放疗的远期生存率及生存质量更高放射性肺损伤发生较低,显示一定的临床优越性。     

支气管哮喘中医辨证治疗概要

目的：探讨支气管哮喘证候诊断要点及辨证治疗规律。方法：基于近年来有关中医药诊疗支气管哮喘文献,结合长期的临床实践与研究结果,总结支气管哮喘的临床特点。结果：认为急性发作期的基本病机为伏痰遇感引动,痰气搏结,以实证为主;慢性持续期以虚实兼夹为主,表现为阳虚与饮伏、气虚与痰阻、气阴虚与痰热等;临床缓解期以虚为主,表现为肺、脾、肾气虚。拟订有关证候诊断要点,并总结辨证治疗规律。结论：常见证候为三期十证候,即急性发作期的外寒内饮、痰浊阻肺证、痰热壅肺证、阳气暴脱证,慢性持续期的阳虚饮伏证、气虚痰阻证、气阴虚痰热证,临床缓解期的肺脾气虚证、肺肾气虚证、脾肾阳虚证;血瘀为主要兼证,常兼见于上述证候中。为支气管哮喘的中医药辨证治疗提供了重要依据。     

基于网络药理学预测射干治疗支气管哮喘作用机制

目的:基于网络药理学预测射干治疗支气管哮喘的作用机制。方法:通过中药系统药理学技术平台(TCMSP)检索射干化学成分,Swiss Target Prediction数据库得到射干的预测靶点,通过Gene Cards数据库获取哮喘相关靶点将射干的预测靶点与哮喘相关靶点进行映射得到射干治疗哮喘的预测靶点。通过Cytoscape(3.6.0)软件,生成射干治疗哮喘的蛋白与蛋白相互作用(PPI)网络。通过DAVID网站(基因百科全书)进行KEGG通路分析,运用systems Dock网站对预测靶标与其对应的成分进行分子对接。结果:射干活性化合物有17种,筛选出射干可能与哮喘相关的靶点74个,关键靶点共16个,包括雌激素受体α(ESR1)、蛋白激酶C-α(PRKCA)、醛糖还原酶(AR)、蛋白激酶C-delta(PRKCD)、蛋白质激酶C-β(PRKCB)等。通过KEGG通路分析得到128条通路,结合文献检索,筛选出治疗哮喘的可能通路为20条,主要分为以下四类,①气道炎症相关通路:PI3K-Akt信号通路、趋化因子信号通路、MAPK信号通路等;②气道平滑肌相关通路:Ras信号通路、Hippo信号通路、钙信号通路等;③血管增生相关通路:VEGF信号通路;④免疫相关通路:T细胞受体信号通路、Toll样受体信号通路。结论:射干通过多靶点、多通路治疗哮喘,其机制可能与气道炎症相关通路、气道平滑肌相关通路、血管增生相关通路、免疫相关通路的作用相关。     

黄芪甲苷干预支气管哮喘的研究进展

综述黄芪甲苷对支气管哮喘的实验研究进展。分别从黄芪甲苷对哮喘炎症细胞、炎性细胞因子、趋化因子受体、转录因子等方面的影响进行综述。