2型糖尿病患者血清超敏C反应蛋白检测的临床价值

目的研究超敏C反应蛋白(hs-CRP)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),预测和监视2型糖尿病并发动脉粥样硬化的临床价值。方法收集63例2型糖尿病患者和38例体检正常者的血清,采用免疫透射比浊法检测hs-CRP,酶法(一步法)检测低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。结果Hs-CRP水平正常对照组为(0.87±0.56)mg/L,LDL-C正常糖尿病组为(2.14±1.39)mg/L,高LDL-C糖尿病组为(4.38±1.92)mg/L。LDL-C正常糖尿病组和高LDL-C糖尿病组hs-CRP明显高于正常对照组(分别为P<0.05,P<0.01);LDL-C正常糖尿病组和高LDL-C糖尿病组之间hs-CRP水平差异也有非常显著意义(P<0.01);同时hs-CRP水平与LDL-C水平呈正相关(r=0.89,P<0.01)。结论Hs-CRP作为炎症因子,在预测和监视2型糖尿病方面有重要意义,是一个强有力的筛选指标。联合血脂检测,对进一步预防2型糖尿病患者并发动脉粥样硬化有重要的临床意义。     

胰岛素基因逆转录病毒载体在人骨髓间充质干细胞表达的实验研究

目的构建携带胰岛素基因逆转录病毒载体,使其在人骨髓间充质干细胞(hMSCs)内稳定表达。方法通过RT-PCR法从人胰腺组织中提取胰岛素基因片段,并将其连接入逆转录病载体pLNCX,经包装细胞PT67的包装后,获得含外源性胰岛素基因的病毒颗粒(病毒滴度达4.2×106cfu/ml)并感染hMSCs,经过G418筛选后,用RT-PCR法、免疫荧光法、放射免疫法、葡萄糖刺激试验分析胰岛基因的表达情况。结果携带胰岛素基因的逆转录病毒载体构建成功,转导入hMSCs后能够稳定表达胰岛素基因,并分泌至细胞外持续3周以上,但对葡萄糖刺激无明显反应。结论重组人胰岛素基因逆转病毒载体能够将胰岛素基因导入hMSCs并稳定表达。     

超低温冻存对人骨髓基质干细胞生物学特性的影响

目的 观察超低温冻存对人骨髓基质干细胞(BMSC)生物学特性的影响. 方法 从正常献髓者髂骨采集骨髓,分离培养出BMSC,并对其进行成骨诱导培养.将第4代人BMSC经短期超低温冻存、复苏后,通过细胞活性率测定、形态学比较、细胞增殖功能、碱性磷酸酶(ALP)活性检测及体外矿化能力比较,观察超低温冻存对人BMSC生物学特性的影响.结果 第4代人BMSC冻存、复苏前后的两组细胞无论在细胞活性率、细胞形态、生长过程、ALP活性等方面均无显著性差异(P＞0.05).结论 短期的超低温冻存对人BMSC的生物活性无明显影响.     

大鼠骨髓内皮祖细胞的分离、培养和鉴定

目的研究大鼠骨髓内皮祖细胞（EPC）分离、培养并向内皮细胞方向诱导分化的方法和条件。方法从大鼠骨髓中分离单个核细胞．经差速贴壁后取二次贴壁细胞选择性诱导培养2W。以Dil-ac-LDL、FITC-UEA-1双荧光染色法以及vWF、Flk-1免疫荧光染色法鉴定EPC；流式细胞术（FACS）检测EPC纯度；细胞培养液一氧化氮（NO）含量测定分析EPC功能。结果二次贴壁细胞经诱导培养后3d开始伸展，5d形成集落，7～10d增殖加速并出现条索状结构，2W大部分细胞呈多角形。Dil—ac—LDL、FITC-UEA-1双染．vWF及Flk-1免疫荧光染色阳性率均〉70％。FACS检测其中vWF阳性细胞占77．93％．Flk-1阳性细胞占81．50％。二次贴壁并经诱导培养的细胞培养液中NO含量明显高于普通培养的细胞．但低于成熟内皮细胞（P〈0．05）。结论大鼠骨髓富含EPC，体外诱导培养后可以表现出内皮细胞的部分特征。     

维生素D受体基因多态性与移植肾受者骨密度的关系

目的研究移植肾受者维生素D受体(VDR)不同基因多态性是否与骨密度(BMD)相关。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度分析(PCR-RFLP)方法分析80例移植肾功能良好稳定(血清肌酐＜176μmol/L)、定期随访、无亲缘关系的上海地区移植肾受者VDR基因的ApaI和TaqI位点基因型,检测血钙、磷、镁及甲状旁腺激素、骨钙素、活性维生素D[1,25(OH)_2D_3]、尿钙、尿吡啶啉等骨代谢指标,应用双能X线骨密度仪测定腰椎(L_(2～4))、股骨颈(FN)、股骨华氏三角(WT)和股骨粗隆(TR)的BMD。结果经透析龄矫正后,VDR基因ApaI酶切位点的Aa型移植肾受者的L_(2～4)和TR的BMD为(1．03±0．05)和(0．64±0．02)g/cm~2,明显高于aa型的(0．83±0．05)和(0．55±0．03)g/cm~2(P＜0．05)；而TaqI位点不同基因型间BMD的差异无显著性(P＞0．05)。结论VDR基因ApaI多态性与移植肾受者L_(2～4)和TR的BMD有相关性,aa型移植肾受者可能更易骨质丢失。     

绿色荧光蛋白和酪氨酸羟化酶在骨髓基质细胞中的表达

目的研究反转录病毒介导的绿色荧光蛋白(EGFP)基因和酪氨酸羟化酶(TH)基因在原代培养的骨髓基质细胞(bMSCs)中的表达情况。方法体外分离培养大鼠四肢骨的bMSCs,原代培养8~10 d后,同时利用含EGFP和TH基因的反转录病毒上清依次转染bMSCs并进行抗性筛选,7~10 d可得到稳定表达EGFP的bMSCs,在稳定转染EGFP后10 d进行TH病毒上清的转染,7~10 d可得到稳定表达TH和EGFP的bMSCs。结果原代培养bMSCs 3~4 d后生长至70%~80%汇合,病毒转染EGFP后第2天,细胞呈现弱荧光,经G418筛选2~3 d后出现阳性细胞,约8~10 d生长融合,阳性率60%~70%,第2~5代阳性细胞比率无明显变化。TH阳性率也达60%以上。结论利用反转录病毒载体可有效地将EGFP和TH基因转至bMSCs中,并能在体外稳定表达传代。这种表达EGFP和TH的bMSCs对于研究bMSCs的体内迁移分化及帕金森病(PD)的基因治疗具有重要意义。     

仙灵骨葆改善去卵巢骨质疏松模型大鼠松质骨骨质量的实验研究

目的:探讨仙灵骨葆对去卵巢骨质疏松模型大鼠松质骨骨质量的影响。方法:将40只Wistar雌性大鼠随机分为正常组、模型组、倍美力组和仙灵骨葆组,每组10只。正常组仅行假手术,其余3组行卵巢切除术,术后91 d开始给药,连续90 d,处死,取出腰椎,用电镜观察第2、3腰椎形态结构,测定第2、3腰椎的骨质密度、第2腰椎骨质的钙、磷、有机质含量,并进行第3腰椎骨质的生物力学性能测定与分析。结果:仙灵骨葆能明显提高大鼠第2、3腰椎骨的骨质密度和第2腰椎骨质钙、磷含量,调整有机质含量,修复骨小梁三维结构,改善第3腰椎骨生物力学性能。结论:仙灵骨葆能够提高去卵巢骨质疏松模型大鼠松质骨的骨质量。     

体外诱导大鼠骨髓间质细胞转化为神经细胞

目的 体外培养骨髓间质细胞，探索大鼠骨髓间质细胞体外诱导及向神经细胞方向分化。方法分离大鼠骨髓间质细胞培养、扩增，检查细胞活力。应用脑神经营养因子（BDNF）、β-巯基乙醇（β-ME）对细胞诱导分化，行大体观察，6h后免疫组织化鉴定神经丝蛋白（NF-200）、神经烯醇化酶（NSE）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP），并用RT-PCR鉴定NF-200、NSE和GFAP的mRNA表达情况。结果 用BDNF、β-ME单独或者共同诱导3h，骨髓间质细胞形态类似神经细胞，6h后神经细胞标记蛋白和mRNA表达阳性，而且BDNF＋β-ME组诱导率最高。结论 BDNF和β-ME能协同刺激大鼠骨髓间质细胞转化并分化为神经细胞。     

2型糖尿病合并外周血管病变患者的骨密度变化

目的探讨2型糖尿病合并外周血管病变患者的骨密度变化。方法将100例2型糖尿病患者分为无并发症组(A组)和合并外周血管病变组(B组),进行双能X线吸收法(DEXA)骨密度(BMD)测定,同时测定臂踝脉波传播速度(baPWV)及超声波颈动脉内膜-中层厚度(IMT),并对两组患者临床数据与骨密度进行比较。结果2型糖尿病患者BMD低于同龄的非糖尿病患者;2型糖尿病合并外周血管病变患者BMD低于同年龄的2型糖尿病患者。结论2型糖尿病合并外周血管病变患者的动脉硬化可能与骨质疏松有关,二者的明确因果关系有待进一步研究。     

郑州市某地表水源藻类与环境因子回归分析

目的了解郑州市某地表水源藻类与环境因子的关系，并建立预测模型。方法2004年3～10月间，在该水源设2个采样点，采用标准方法监测：水温（WT）、透明度（SD）、水深（WD）、高锰酸盐指数（CODMn）、总氮（TN）、总磷（TP）、叶绿素a（Chla）和藻类细胞密度（ACD）8项指标，应用直线相关分析和多元回归方法探讨CNa和ACD与环境因子之间的关系，并初步建立叶绿素a和藻类细胞密度的预测模型。结果直线相关分析显示，该水源标准化叶绿素a与wT、CODMn、TP呈显著正相关，与SD呈显著负相关；标准化藻类细胞密度与WT、TP呈显著正相关。与SD、WD呈显著负相关。多元回归统计分析显示，WT、TP和CODMn为该水源标准化叶绿素a的显著相关因子。WT和TP为该水源标准化藻类细胞密度的显著相关因子，应用回归方程计算出来的预测值能够较好地与实测值拟合。结论建立的多元回归方程能够较好地预测Chla和ACD的变化趋势；削减TP和CODMn含量在控制Chla和ACD方面具有现实意义。